강화약쑥, 감잎 및 유자 주정추출물이 혈행개선 및 지질대사 조절에 미치는 영향; in vitro and in vivo system Effects of ethanol extract of sajabalssuk, persimmon leaf and Citrus junos Sieb on the improvement of blood circulation and lipid metabolism;in vitro and in vivo system원문보기
본 연구에서는 1차적으로 3종의 강화약쑥, 감잎, 유자 주정추출물 및 이들의 대표 flavonoids 7종 (eupatilin, jaceosidin, catechin, epicatechin, epigallocatehin gallate, naringin, hesperidin)을 먼저 in vitro system에서 혈행개선 효과를 검증하였다. 이어서 2차적으로는 in vivo system에서 고지방식이와 함께 3종 주정 추출물 (강화약쑥, 감잎, 유자)을 비만 흰쥐 모델에서 혈행개선, 지질대사 및 ...
본 연구에서는 1차적으로 3종의 강화약쑥, 감잎, 유자 주정추출물 및 이들의 대표 flavonoids 7종 (eupatilin, jaceosidin, catechin, epicatechin, epigallocatehin gallate, naringin, hesperidin)을 먼저 in vitro system에서 혈행개선 효과를 검증하였다. 이어서 2차적으로는 in vivo system에서 고지방식이와 함께 3종 주정 추출물 (강화약쑥, 감잎, 유자)을 비만 흰쥐 모델에서 혈행개선, 지질대사 및 염증반응에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. 따라서 두 차례 실시된 실험과정은 다음과 같으며 이에 따른 요약 및 결론을 각각 제시한다. 실험 Ⅰ: 정상인의 혈장에 강화약쑥, 감잎 및 유자 주정추출물 (EAP, EPL, ECJ)과 이들의 대표 flavonoids (eupatilin, jaceosidin, catechin, epicatechin, epigallocatehin gallate, naringin, hesperidin)을 처리하여 실험을 진행하였다. 실험 Ⅱ: 생후 5주령 수컷 흰쥐 모델을 음성대조군인 HFD군, 시험군 및 양성대조군 (은행잎 추출물, 오메가-3)으로 나누었고, HFD 식이 (20% fat, 1% cholesterol)에 PL (0.5% 감잎주정추출물, w/w), CJS (0.5% 유자 주정추출물, w/w), SJL (0.05% 강화약쑥 주정추출물, w/w), SJH (0.15% 강화약쑥 주정추출물, w/w), GB (0.5% 은행잎 추출물, w/w) 및 n-3 (2.5% Omega-3, w/w)를 보충하여 실험을 진행하였다. 강화약쑥, 감잎 및 유자 주정추출물이 혈행개선 및 지질대사 조절에 미치는 영향에 대한 결과를 요약하면 다음과 같다. 실험 Ⅰ의 요약 및 결론 1. In vitro system에서 강화약쑥, 감잎 및 유자 주정추출물과 이 소재들의 대표 flavonoids가 혈행개선에 미치는 영향 1) 강화약쑥, 감잎, 유자 주정추출물 및 이들의 대표 flavonoids 7종은 혈소판 응집 agonist인 AA, ADP 및 collagen에 의해 유도된 혈소판 응집 중 AA에 의해 유도된 혈소판 응집률을 유의적으로 낮추었다. 2) 혈소판을 활성화시키는 주요 인자인 serotonin, TXB2 및 sP-selectin의 혈장 농도가 강화약쑥, 감잎, 유자 주정추출물 및 이들의 대표 flavonoids 7종에 의해 유의적으로 감소되었다. 3) 정상인의 혈장에서 PT와 aPTT을 통해 외인성과 내인성의 혈액 응고인자 활성화를 분석한 결과, 3종 주정 추출물 및 이들의 대표 flavonoids에 의해 전반적으로 PT와 aPTT가 유의적으로 연장되었다. 4) ICR mice에게 3종 후보소재 및 7종 flavonoids를 경구 투여한 후 bleeding time을 측정한 결과, 모든 군에서 마우스의 bleeding time이 유의적으로 증가되었다. 실험 Ⅱ의 요약 및 결론 1. 3종 후보소재의 식이 보충이 고지방식이 유도 비만 흰쥐의 혈행개선에 미치는 영향 1) 3종 후보소재 중 감잎 식이 보충군에서 PT와 aPTT가 유의적으로 연장되어 외인성 및 내인성 시스템의 개선이 관찰되었다. 2) 식이 유도성 비만 흰쥐의 혈장에서 혈소판 활성화 관련 바이오 마커 분석 결과, TXB2 함량이 감잎, 유자 및 강화약쑥 고용량군에서 유의적으로 감소되었으며 serotonin 및 sP-selectin 농도는 유의적인 차이를 나타내지 않았다. 2. 3종 후보소재의 식이보충이 고지방식이 유도 비만 흰쥐의 지질대사조절에 미치는 영향 1) 9주간 고지방식이로 비만을 유도한 흰쥐의 최종 체중 증가량 및 식이섭취량은 모든 군에서 유의적인 차이가 관찰되지 않았다. 2) 총 7개 부위의 지방 조직을 적출하여 무게를 비교한 결과, SJL 및 SJH 군에서 HFD군에 비해 부고환 지방, 피하지방, 내장지방 및 총 백색지방 량이 유의적으로 감소되었으며 PL군은 견갑골 백색지방 량이 HFD군에 비해 유의적으로 감소되었다. 3) 혈장 중성지질의 농도는 군간 유의적인 차이가 없었으며, 혈장 총 콜레스테롤 농도는 PL, SJL 및 SJH군이 HFD군에 비해 유의적으로 낮추어졌다. 혈중 유리지방산의 농도는 CJS 식이 보충에 의해 감소되었으며 Apo B의 농도는 PL 및 SJL군에서 HFD군에 비해 유의적으로 저하되었다. 또한 동맥경화 위험지수인 AI는 모든 군에서 낮아지는 경향이 관찰되었다. 4) 간조직에서 지질대사 관련 효소 활성도 측정 결과, 지방산 합성 관련 효소인 FAS, G6PD 및 ME 활성도가 HFD군에 비해 모든 군에서 유의적으로 감소되었다. 지방산 산화 관련 효소인 CPT 활성도는 HFD군에 비해 4종 후보소재 보충에 의해서 유의적으로 저하되었다. 또한 중성지질 합성 관련 효소 PAP 활성도가 PL 및 CJS군에서 HFD군에 비해 유의적으로 감소되었다. 5) 지방조직에서 지질대사 관련 효소 활성도 측정 결과, 지방조직의 FAS 활성도는 HFD군에 비해 SJL 및 SJH 보충에 의해 유의적으로 저하되었고 G6PD 활성도도 CJS, SJL 및 SJH군에서 HFD군에 비해 유의적으로 저하되었다. ME 활성도는 군간 유의적인 차이가 없었다. CPT 활성도는 CJS 및 SJH군에서 HFD군에 비해 유의적으로 증가하였으며 PL 및 SJL군에서도 증가하는 경향이 나타났다. 또한 PAP 활성도는 SJH군이 HFD군에 비해 유의적으로 저하되었다. 6) 간조직 및 지방조직의 형태학적 비교 분석 결과, 후보소재 보충에 의해 지방구 및 지방세포의 크기가 HFD군에 비해 감소되는 것으로 관찰되었다. 3. 3종 후보소재의 식이보충이 고지방식이 유도 비만 흰쥐의 혈중 adipokine 수준에 미치는 영향 1) 대표적 염증관련 바이오마커인 IL-1β, IL 10, TNF-α 및 MCP-1의 혈장 농도를 분석한 결과, IL-1β 및 TNF-α 농도는 SJL군에서 HFD군에 비해 유의적으로 감소하였으며 혈장 IL-10 수준은 유의적으로 증가하였고 다른 군에서도 증가하는 양상을 나타냈다. 또한 혈중 MCP-1 농도는 HFD군에 비해 SJH 보충에 의해 유의적으로 감소하였다. 2) 혈장 leptin 농도는 PL, SJL 및 SJH군에서 HFD군에 비해 유의적으로 낮아졌고, 혈장 ghrelin 농도는 PL 보충군에서만 HFD군에 비해 유의적으로 증가하였다. 한편, 혈장 adiponectin 농도는 모든 군에서 유의적 차이가 없었으나 항동맥경화 보조지표인 leptin:adiponectin ratio는 PL, SJL 및 SJH군에서 HFD군에 비해 유의적으로 낮아졌다. 4. 3종 후보소재의 식이보충이 고지방식이 유도 비만 흰쥐의 동맥조직에서 유전자 발현에 미치는 영향 1) 혈소판 활성 관련 바이오마커의 유전자 발현도를 분석한 결과, TXA2의 상위 조절자인 COX2의 mRNA 발현이 SJL군에서 HFD군에 비해 유의적으로 감소하였으며 serotonin transporter (SERT)의 mRNA 발현도는 PL군이 HFD군에 비해 유의적으로 감소하였고 PL 외 3종 후보소재에 의해서도 하향 조절되는 경향을 나타내었다. 또한 selectin-P (SELP)의 mRNA 발현도가 4종 후보소재에 의해 하향 조절되는 것으로 관찰되었다. 이상의 모든 연구 결과들을 종합하면, 3종 주정 추출물은 in vitro system에서 AA에 의해 유도된 혈소판 응집률을 낮추었고, 아울러 혈소판 활성 인자와 혈액응고 인자의 활성도를 낮춤으로써 혈행개선 효과를 나타내었다. 또한 흰쥐에 고지방식이와 함께 3종 주정 추출물을 식이 보충한 in vivo system의 경우 감잎 주정추출물은 혈행 관련 바이오 마커와 지질대사 바이오마커를 조절함으로써 혈행개선 효과를 나타내었고 강화약쑥 주정추출물은 식이 섭취는 지질대사와 염증반응 조절에 영향을 미쳐 혈행이 개선되는 것으로 관찰되었다. 따라서 감잎 및 강화약쑥 주정추출물의 장기간 섭취는 혈행 및 지질대사 개선에 유익할 것으로 사료되며, 향후 혈행개선용 건강기능식품 소재 개발의 가능성이 본 실험에서 제시되었다.
본 연구에서는 1차적으로 3종의 강화약쑥, 감잎, 유자 주정추출물 및 이들의 대표 flavonoids 7종 (eupatilin, jaceosidin, catechin, epicatechin, epigallocatehin gallate, naringin, hesperidin)을 먼저 in vitro system에서 혈행개선 효과를 검증하였다. 이어서 2차적으로는 in vivo system에서 고지방식이와 함께 3종 주정 추출물 (강화약쑥, 감잎, 유자)을 비만 흰쥐 모델에서 혈행개선, 지질대사 및 염증반응에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. 따라서 두 차례 실시된 실험과정은 다음과 같으며 이에 따른 요약 및 결론을 각각 제시한다. 실험 Ⅰ: 정상인의 혈장에 강화약쑥, 감잎 및 유자 주정추출물 (EAP, EPL, ECJ)과 이들의 대표 flavonoids (eupatilin, jaceosidin, catechin, epicatechin, epigallocatehin gallate, naringin, hesperidin)을 처리하여 실험을 진행하였다. 실험 Ⅱ: 생후 5주령 수컷 흰쥐 모델을 음성대조군인 HFD군, 시험군 및 양성대조군 (은행잎 추출물, 오메가-3)으로 나누었고, HFD 식이 (20% fat, 1% cholesterol)에 PL (0.5% 감잎주정추출물, w/w), CJS (0.5% 유자 주정추출물, w/w), SJL (0.05% 강화약쑥 주정추출물, w/w), SJH (0.15% 강화약쑥 주정추출물, w/w), GB (0.5% 은행잎 추출물, w/w) 및 n-3 (2.5% Omega-3, w/w)를 보충하여 실험을 진행하였다. 강화약쑥, 감잎 및 유자 주정추출물이 혈행개선 및 지질대사 조절에 미치는 영향에 대한 결과를 요약하면 다음과 같다. 실험 Ⅰ의 요약 및 결론 1. In vitro system에서 강화약쑥, 감잎 및 유자 주정추출물과 이 소재들의 대표 flavonoids가 혈행개선에 미치는 영향 1) 강화약쑥, 감잎, 유자 주정추출물 및 이들의 대표 flavonoids 7종은 혈소판 응집 agonist인 AA, ADP 및 collagen에 의해 유도된 혈소판 응집 중 AA에 의해 유도된 혈소판 응집률을 유의적으로 낮추었다. 2) 혈소판을 활성화시키는 주요 인자인 serotonin, TXB2 및 sP-selectin의 혈장 농도가 강화약쑥, 감잎, 유자 주정추출물 및 이들의 대표 flavonoids 7종에 의해 유의적으로 감소되었다. 3) 정상인의 혈장에서 PT와 aPTT을 통해 외인성과 내인성의 혈액 응고인자 활성화를 분석한 결과, 3종 주정 추출물 및 이들의 대표 flavonoids에 의해 전반적으로 PT와 aPTT가 유의적으로 연장되었다. 4) ICR mice에게 3종 후보소재 및 7종 flavonoids를 경구 투여한 후 bleeding time을 측정한 결과, 모든 군에서 마우스의 bleeding time이 유의적으로 증가되었다. 실험 Ⅱ의 요약 및 결론 1. 3종 후보소재의 식이 보충이 고지방식이 유도 비만 흰쥐의 혈행개선에 미치는 영향 1) 3종 후보소재 중 감잎 식이 보충군에서 PT와 aPTT가 유의적으로 연장되어 외인성 및 내인성 시스템의 개선이 관찰되었다. 2) 식이 유도성 비만 흰쥐의 혈장에서 혈소판 활성화 관련 바이오 마커 분석 결과, TXB2 함량이 감잎, 유자 및 강화약쑥 고용량군에서 유의적으로 감소되었으며 serotonin 및 sP-selectin 농도는 유의적인 차이를 나타내지 않았다. 2. 3종 후보소재의 식이보충이 고지방식이 유도 비만 흰쥐의 지질대사조절에 미치는 영향 1) 9주간 고지방식이로 비만을 유도한 흰쥐의 최종 체중 증가량 및 식이섭취량은 모든 군에서 유의적인 차이가 관찰되지 않았다. 2) 총 7개 부위의 지방 조직을 적출하여 무게를 비교한 결과, SJL 및 SJH 군에서 HFD군에 비해 부고환 지방, 피하지방, 내장지방 및 총 백색지방 량이 유의적으로 감소되었으며 PL군은 견갑골 백색지방 량이 HFD군에 비해 유의적으로 감소되었다. 3) 혈장 중성지질의 농도는 군간 유의적인 차이가 없었으며, 혈장 총 콜레스테롤 농도는 PL, SJL 및 SJH군이 HFD군에 비해 유의적으로 낮추어졌다. 혈중 유리지방산의 농도는 CJS 식이 보충에 의해 감소되었으며 Apo B의 농도는 PL 및 SJL군에서 HFD군에 비해 유의적으로 저하되었다. 또한 동맥경화 위험지수인 AI는 모든 군에서 낮아지는 경향이 관찰되었다. 4) 간조직에서 지질대사 관련 효소 활성도 측정 결과, 지방산 합성 관련 효소인 FAS, G6PD 및 ME 활성도가 HFD군에 비해 모든 군에서 유의적으로 감소되었다. 지방산 산화 관련 효소인 CPT 활성도는 HFD군에 비해 4종 후보소재 보충에 의해서 유의적으로 저하되었다. 또한 중성지질 합성 관련 효소 PAP 활성도가 PL 및 CJS군에서 HFD군에 비해 유의적으로 감소되었다. 5) 지방조직에서 지질대사 관련 효소 활성도 측정 결과, 지방조직의 FAS 활성도는 HFD군에 비해 SJL 및 SJH 보충에 의해 유의적으로 저하되었고 G6PD 활성도도 CJS, SJL 및 SJH군에서 HFD군에 비해 유의적으로 저하되었다. ME 활성도는 군간 유의적인 차이가 없었다. CPT 활성도는 CJS 및 SJH군에서 HFD군에 비해 유의적으로 증가하였으며 PL 및 SJL군에서도 증가하는 경향이 나타났다. 또한 PAP 활성도는 SJH군이 HFD군에 비해 유의적으로 저하되었다. 6) 간조직 및 지방조직의 형태학적 비교 분석 결과, 후보소재 보충에 의해 지방구 및 지방세포의 크기가 HFD군에 비해 감소되는 것으로 관찰되었다. 3. 3종 후보소재의 식이보충이 고지방식이 유도 비만 흰쥐의 혈중 adipokine 수준에 미치는 영향 1) 대표적 염증관련 바이오마커인 IL-1β, IL 10, TNF-α 및 MCP-1의 혈장 농도를 분석한 결과, IL-1β 및 TNF-α 농도는 SJL군에서 HFD군에 비해 유의적으로 감소하였으며 혈장 IL-10 수준은 유의적으로 증가하였고 다른 군에서도 증가하는 양상을 나타냈다. 또한 혈중 MCP-1 농도는 HFD군에 비해 SJH 보충에 의해 유의적으로 감소하였다. 2) 혈장 leptin 농도는 PL, SJL 및 SJH군에서 HFD군에 비해 유의적으로 낮아졌고, 혈장 ghrelin 농도는 PL 보충군에서만 HFD군에 비해 유의적으로 증가하였다. 한편, 혈장 adiponectin 농도는 모든 군에서 유의적 차이가 없었으나 항동맥경화 보조지표인 leptin:adiponectin ratio는 PL, SJL 및 SJH군에서 HFD군에 비해 유의적으로 낮아졌다. 4. 3종 후보소재의 식이보충이 고지방식이 유도 비만 흰쥐의 동맥조직에서 유전자 발현에 미치는 영향 1) 혈소판 활성 관련 바이오마커의 유전자 발현도를 분석한 결과, TXA2의 상위 조절자인 COX2의 mRNA 발현이 SJL군에서 HFD군에 비해 유의적으로 감소하였으며 serotonin transporter (SERT)의 mRNA 발현도는 PL군이 HFD군에 비해 유의적으로 감소하였고 PL 외 3종 후보소재에 의해서도 하향 조절되는 경향을 나타내었다. 또한 selectin-P (SELP)의 mRNA 발현도가 4종 후보소재에 의해 하향 조절되는 것으로 관찰되었다. 이상의 모든 연구 결과들을 종합하면, 3종 주정 추출물은 in vitro system에서 AA에 의해 유도된 혈소판 응집률을 낮추었고, 아울러 혈소판 활성 인자와 혈액응고 인자의 활성도를 낮춤으로써 혈행개선 효과를 나타내었다. 또한 흰쥐에 고지방식이와 함께 3종 주정 추출물을 식이 보충한 in vivo system의 경우 감잎 주정추출물은 혈행 관련 바이오 마커와 지질대사 바이오마커를 조절함으로써 혈행개선 효과를 나타내었고 강화약쑥 주정추출물은 식이 섭취는 지질대사와 염증반응 조절에 영향을 미쳐 혈행이 개선되는 것으로 관찰되었다. 따라서 감잎 및 강화약쑥 주정추출물의 장기간 섭취는 혈행 및 지질대사 개선에 유익할 것으로 사료되며, 향후 혈행개선용 건강기능식품 소재 개발의 가능성이 본 실험에서 제시되었다.
Recently, cardiovascular diseases (CVD) such as thrombotic disorders, atherosclerosis and coronary heart disease have been increased and is the leading cause of death in the world. Thrombosis results from activation of plasma proteins such as coagulation factors and platelet. Sajabalssuk and persimm...
Recently, cardiovascular diseases (CVD) such as thrombotic disorders, atherosclerosis and coronary heart disease have been increased and is the leading cause of death in the world. Thrombosis results from activation of plasma proteins such as coagulation factors and platelet. Sajabalssuk and persimmon leaf have long been used for tea in Korea, China and Japan. They are known to have beneficial properties on oxidative stress and non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD). Also, Citrus junos Sieb has been reported to have anti-inflammation. This present study evaluated antithrombotic property of ethanol extracts of sajabalssuk, persimmon leaf and Citrus junos Seib and their major flavonoids in vitro. In addition, we investigated the anticoagulant and antiplatelet activities as well as lipid levels of ethanol extract of sajabalssuk, persimmon leaf and Citrus junos Sieb in rats fed a high-fat diet (HFD) as followed. Experiment Ⅰ: Ethanol extract of Artemisia Princeps Pampanini (EAP), ethanol extract of persimmon leaves (EPL), ethanol extract of Citrus junos Sieb (ECJ) and their major flavonoids (eupatilin, jaceosidin, catechin, epicatechin, epigallocatechin gallate, naringin, hesperidin) are treated in normal human plasma. Experiment Ⅱ: Sixty eight male Sprague-Dawely rats (5 weeks-old) were randomly divided into 7 groups and were fed HFD (20% fat and 1% cholesterol, w/w) or HFD supplemented with PL (HFD+0.5% EPL, w/w), CJS (HFD+0.5% ECJ, w/w), SJL (HFD+0.05% EAP, w/w), SJH (HFD+0.15% EAP, w/w), GB (HFD+0.5% Ginko biloba, w/w) or n-3 (HFD+2.5% Omega-3, w/w) for 9 weeks. The results were as follows. Summary of experiment Ⅰ 1. Effect of ethanol extracts of sajabalssuk, persimmon leaf, Citrus junos Sieb and their major flavonoids on improvement of blood circulation in vitro. The arachidonic acid (AA)-induced platelet aggregation was significantly reduced by EAP, EPL, ECJ and their major flavonoids. Although, adenosine diphosphate- and collagen-induced platelet aggregations were not altered by them. The plasma serotonin, thromboxane B2 (TXB2) and soluble P-selectin (sP-selectin) levels were significantly decreased by EAP, EPL, ECJ and their major flavonoids. Futhermore, EAP, EPL, ECJ and their major flavonoids significantly prolonged activated partial thromboplastin time (aPTT) and prothrombin time(PT) in human plasma and they significantly prolonged bleeding time in ICR mice. Summary of experiment Ⅱ 1. Effect of dietary supplementation of sajabalssuk, persimmon leaf and Citrus junos Sieb on improvement of blood circulation in rats fed a HFD for 9 weeks. PL group prolonged significantly aPTT and PT than in the HFD group. In addition, the plasma TXB2 levels of the PL, CJS and SJH groups were lower than in the HFD group, while there were no significant differences in the plasma levels of serotonin and sP-selectin. 2. Effect of dietary supplementation of sajabalssuk, persimmon leaf and Citrus junos Sieb on the regulation of lipid metabolism in rats fed high-fat diet for 9 weeks. Body weight gain and daily food intake were not remarkably altered in the experimental groups compared to the HFD group. However, epididymal fat, subcutaneous fat, visceral fat, and total white adipose tissue weights were significantly lower in the SJL and SJH groups than in the HFD group and PL also lowered interscapular white adipose tissue weight. Compared to the HFD group, plasma total cholesterol level was significantly decreased in the PL, SJL and SJH groups, but triglyceride level was not changed. Plasma free fatty acid level was significantly lower in the CJS group than in the HFD group. In addition, AI tended to decrease in PL, CJS, SJL and SJH groups compared to the HFD group. Among the activities of hepatic lipogenic enzymes, fatty acid synthase (FAS), glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD) and malic enzyme (ME) were significantly lower in all experimental groups than in the HFD group. Hepatic carnitine palmitoyl-CoA transferase (CPT) activity was significantly lower in all experimental groups. Moreover, hepatic phosphatidate phosphohydrolase (PAP) activity was significantly lower in the PL and CJS groups than in the HFD control group. Among the activities of adipose tissue lipogenic enzymes, FAS was significantly lower in the SJL and SJH groups and G6PD was significantly lower in the CJS, SJL and SJH groups compared to the HFD control group. In particular, CPT activity was significantly increased in the CJS and SJH groups, while PAP activity was significantly lower in the SJH group compared to the HFD group. In analysis of liver and adipose tissue morphology, all experimental groups showed small-sized adipocyte and less hepatic accumulation of lipid droplets in compared to the HFD control group. 3. Effect of dietary supplementation of sajabalssuk, persimmon leaf and Citrus junos Sieb on the expression of genes in arterty of rats fed high-fat diet for 9 weeks. In artery, mRNA expression of cyclooxygenase 2, upstream regulator of thromboxane A2 was significantly lower in the SJL group than in the HFD group. serotonin transporter mRNA expression was significantly lower in the PL group than in the HFD group. Moreover, selectin-P mRNA expression were down-regulated in all experimental groups compared to the HFD control group. In conclusion, AA-induced platelet aggregation was significantly reduced by EAP, EPL, ECJ and their major flavonoids. The activities of platelets and blood coagulation were also lowered by EAP, EPL, ECJ and their major flavonoids in vitro system. Furthermore, dietary supplementation of PL in rats fed a HFD changed biomarkers associated with blood circulation and lipid metabolism. Also, both SJL and SJH supplementations were effective in improving inflammation response as well as lipid metabolism in rats. Taken together, these results indicate PL, SJL and SJH may be useful for improvement of blood circulation, cardiovascular diseases and lipid metabolism. However, further studies are needed to evaluate the long-term supplementation effects of these extracts in the animal models.
Recently, cardiovascular diseases (CVD) such as thrombotic disorders, atherosclerosis and coronary heart disease have been increased and is the leading cause of death in the world. Thrombosis results from activation of plasma proteins such as coagulation factors and platelet. Sajabalssuk and persimmon leaf have long been used for tea in Korea, China and Japan. They are known to have beneficial properties on oxidative stress and non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD). Also, Citrus junos Sieb has been reported to have anti-inflammation. This present study evaluated antithrombotic property of ethanol extracts of sajabalssuk, persimmon leaf and Citrus junos Seib and their major flavonoids in vitro. In addition, we investigated the anticoagulant and antiplatelet activities as well as lipid levels of ethanol extract of sajabalssuk, persimmon leaf and Citrus junos Sieb in rats fed a high-fat diet (HFD) as followed. Experiment Ⅰ: Ethanol extract of Artemisia Princeps Pampanini (EAP), ethanol extract of persimmon leaves (EPL), ethanol extract of Citrus junos Sieb (ECJ) and their major flavonoids (eupatilin, jaceosidin, catechin, epicatechin, epigallocatechin gallate, naringin, hesperidin) are treated in normal human plasma. Experiment Ⅱ: Sixty eight male Sprague-Dawely rats (5 weeks-old) were randomly divided into 7 groups and were fed HFD (20% fat and 1% cholesterol, w/w) or HFD supplemented with PL (HFD+0.5% EPL, w/w), CJS (HFD+0.5% ECJ, w/w), SJL (HFD+0.05% EAP, w/w), SJH (HFD+0.15% EAP, w/w), GB (HFD+0.5% Ginko biloba, w/w) or n-3 (HFD+2.5% Omega-3, w/w) for 9 weeks. The results were as follows. Summary of experiment Ⅰ 1. Effect of ethanol extracts of sajabalssuk, persimmon leaf, Citrus junos Sieb and their major flavonoids on improvement of blood circulation in vitro. The arachidonic acid (AA)-induced platelet aggregation was significantly reduced by EAP, EPL, ECJ and their major flavonoids. Although, adenosine diphosphate- and collagen-induced platelet aggregations were not altered by them. The plasma serotonin, thromboxane B2 (TXB2) and soluble P-selectin (sP-selectin) levels were significantly decreased by EAP, EPL, ECJ and their major flavonoids. Futhermore, EAP, EPL, ECJ and their major flavonoids significantly prolonged activated partial thromboplastin time (aPTT) and prothrombin time(PT) in human plasma and they significantly prolonged bleeding time in ICR mice. Summary of experiment Ⅱ 1. Effect of dietary supplementation of sajabalssuk, persimmon leaf and Citrus junos Sieb on improvement of blood circulation in rats fed a HFD for 9 weeks. PL group prolonged significantly aPTT and PT than in the HFD group. In addition, the plasma TXB2 levels of the PL, CJS and SJH groups were lower than in the HFD group, while there were no significant differences in the plasma levels of serotonin and sP-selectin. 2. Effect of dietary supplementation of sajabalssuk, persimmon leaf and Citrus junos Sieb on the regulation of lipid metabolism in rats fed high-fat diet for 9 weeks. Body weight gain and daily food intake were not remarkably altered in the experimental groups compared to the HFD group. However, epididymal fat, subcutaneous fat, visceral fat, and total white adipose tissue weights were significantly lower in the SJL and SJH groups than in the HFD group and PL also lowered interscapular white adipose tissue weight. Compared to the HFD group, plasma total cholesterol level was significantly decreased in the PL, SJL and SJH groups, but triglyceride level was not changed. Plasma free fatty acid level was significantly lower in the CJS group than in the HFD group. In addition, AI tended to decrease in PL, CJS, SJL and SJH groups compared to the HFD group. Among the activities of hepatic lipogenic enzymes, fatty acid synthase (FAS), glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD) and malic enzyme (ME) were significantly lower in all experimental groups than in the HFD group. Hepatic carnitine palmitoyl-CoA transferase (CPT) activity was significantly lower in all experimental groups. Moreover, hepatic phosphatidate phosphohydrolase (PAP) activity was significantly lower in the PL and CJS groups than in the HFD control group. Among the activities of adipose tissue lipogenic enzymes, FAS was significantly lower in the SJL and SJH groups and G6PD was significantly lower in the CJS, SJL and SJH groups compared to the HFD control group. In particular, CPT activity was significantly increased in the CJS and SJH groups, while PAP activity was significantly lower in the SJH group compared to the HFD group. In analysis of liver and adipose tissue morphology, all experimental groups showed small-sized adipocyte and less hepatic accumulation of lipid droplets in compared to the HFD control group. 3. Effect of dietary supplementation of sajabalssuk, persimmon leaf and Citrus junos Sieb on the expression of genes in arterty of rats fed high-fat diet for 9 weeks. In artery, mRNA expression of cyclooxygenase 2, upstream regulator of thromboxane A2 was significantly lower in the SJL group than in the HFD group. serotonin transporter mRNA expression was significantly lower in the PL group than in the HFD group. Moreover, selectin-P mRNA expression were down-regulated in all experimental groups compared to the HFD control group. In conclusion, AA-induced platelet aggregation was significantly reduced by EAP, EPL, ECJ and their major flavonoids. The activities of platelets and blood coagulation were also lowered by EAP, EPL, ECJ and their major flavonoids in vitro system. Furthermore, dietary supplementation of PL in rats fed a HFD changed biomarkers associated with blood circulation and lipid metabolism. Also, both SJL and SJH supplementations were effective in improving inflammation response as well as lipid metabolism in rats. Taken together, these results indicate PL, SJL and SJH may be useful for improvement of blood circulation, cardiovascular diseases and lipid metabolism. However, further studies are needed to evaluate the long-term supplementation effects of these extracts in the animal models.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.