[논문]토복령(土茯令, Smilacis Chinae Radix)으로부터 Dioscin의 분리 및 함량분석

서정학; 이주미; 권순진; 장승엽; 이경순; 손건호

문제 정의

2)토복령의 성분에 관한 연구로는 spirostane 배당체인 prosapogenin A of dioscin, gracillin과 furostane 배 딩체로서 methyl pro-to-prosapogenin A of dioscin, methyl proto-dioscin, methyl proto-gracillin이 분리되어 모두 6종의 steroid saponin이 분리 보고되었다가 이중 dioscin은 토복령의 주성분일뿐 아니라 항돌연변이원성작용,⁵⁾ 항암작용,⁶⁾PLA 저해작용⁷⁾ 등의 다양한 생리활성이 보고되어 있어 본 연구에서는 dioscin을 지표물질로 한 정량법을 개발하고자 하였으며 생약 규격집에 규정되어 있는 건조감량, 회분 및 산불용성 회분 기준치와 현재 국내에서 유통되고 있는 토복령의 실험치를 비교. 검토하였다.

제안 방법

Dioscint 지표물질로서 사용 가능성을 검토하기 위하여 HPLC를 실시하였다. 분석조건을 검토하기 위하여 여러 가지 용매조건에서 HPLC chromatogram을 얻고 이들을 검토해 본 결과 CH₃CN-H₂O(60:40)을 이동상으로 사용했을 때 가장 좋은 분리능을 얻을 수 있었다.
분리된 화합물의 분광학적 결과는 문헌치와 잘 일치하였다 ' Dioscin을 지표물질로 하여 국내 각 지역에서 구입한 50종의 토복령에 대하여 TLC법으로 확인시험을 하였으나 이 중 25종의 시료만이 표준품과 Rf치가 일치되는 반점을 나타내었다. Dioscin이 확인된 25종의 토복령에 대해서 생약규격집에 규정되어 있는 이화학적 실험을 시행하고 dioscin을 지표물질로 하여 HPLC 정량법을 개발하고 그 함량을 정하였다.
이 조건에서 dioscin의 retention time은 약 8분에서 나타나며 다른 물질의 peak와 양호하게 분리되므로 적합한 분석조건임을 알 수 있었다. dioscin의 표준 검량선을 작성하여 정량에 이용할 목적으로 stock solution을 만들고 이를 희석하여 표준용액을 제조하였다. 각 표준용액의 chromatogram으로부터 얻은 peak 면적과 농도와의 관계로부터 검량선을 작성한 결과 40-200 μg/ml의 농도범위에서 그 직선성이 인정되었으며 이때의 회귀직선 방정식은 y=10.
이를 일정량씩 취하여 40, 80, 120, 160, 20μg/ml 농도의 표준 용액을 조제하였다. 각 표준용액을 20μl씩 취하여 HPLC의 chromatogram을 얻고 이로부터 평균 area를 구하였다. dioscin의 회귀직선방정식은 y=10.
산불용성 회분시험 - 회분에 묽은 염산 25 m/를 조심하여 넣고 5분간 조용히 끓여 불용물을 정량용 여과지를 써서 여과하여 취하고 열탕으로 잘 씻어 잔유물을 여과지와 함께 건조한 다음 회분의 항과 같은 조작으로 무게를 미리 단 백금제 도가니에서 3시간 강열하여 데시케이터(silica gel)에서 방냉한 다음 무게를 정밀하게 달아 산불용성 회분량(%)으로 하였다.
하였다. 이를 일정량씩 취하여 40, 80, 120, 160, 20μg/ml 농도의 표준 용액을 조제하였다. 각 표준용액을 20μl씩 취하여 HPLC의 chromatogram을 얻고 이로부터 평균 area를 구하였다.
따로 표준품 1 mg을 MeOH 1 mH 녹여 표준액으로 하였다. 표준액 및 검액을 각각 5μl씩 silica gel TLC plate(Merck 5715)에 점적한 후 CHCl₃-MeOH-H₂O(7:3:1 하층부)의 용매로 dioscin의 표준품과 함께 전개하여 10% H₂SO₄으로 발색시켜 표준품과의 Rf값을 비교하였다.

대상 데이터

검체 -2000년 국내 전지역에서 시판되고 있는 토복령 50종을 구입하여 마쇄한 다음 확인 시험을 거쳐 선별한 25종을 시료로 하였다.

성능/효과

dioscin의 표준 검량선을 작성하여 정량에 이용할 목적으로 stock solution을 만들고 이를 희석하여 표준용액을 제조하였다. 각 표준용액의 chromatogram으로부터 얻은 peak 면적과 농도와의 관계로부터 검량선을 작성한 결과 40-200 μg/ml의 농도범위에서 그 직선성이 인정되었으며 이때의 회귀직선 방정식은 y=10.6325×+2.6432 이며 상관계수는 0.9999로서 1.0에 접근하였다.
이는 장기간 보관 등으로 인하여 유효성분이 분해된 때문이 아닌가 추정하였으나 정확한 이유는 알 수 없었다. 본 실험결과 25종의 시료 중 dioscin의 평균 함량 및 표준편차는 0.21±0.27%이며 20종의 시료가 0.01% 이상을 나타내고 있으므로 토복령 중 dioscin의 함량 0.01% 이상으로 규정함이 타당하다고 사료된다.
50% 이하로 규정되어 있다. 본 실험에서 회분은 3.43±1.26%, 산불용성회분은 0.45±0.43으로 나타나며 25개의 시료 중 생약규격집의 규정에 맞지 않는 경우는 회분의 경우 3개, 산불용성회분의 경우 7개이었다. 따라서 회분의 경우 현 규정이 타당하나 산불용성회분의 경우 0.
따라서 dioscin을 실험부에서 제시한 바와 같이 토복령의 n-BuOH 분획을 silica gel 및 RP-18 column chroma-tography로 분리하였다. 분리된 화합물의 분광학적 결과는 문헌치와 잘 일치하였다 ' Dioscin을 지표물질로 하여 국내 각 지역에서 구입한 50종의 토복령에 대하여 TLC법으로 확인시험을 하였으나 이 중 25종의 시료만이 표준품과 Rf치가 일치되는 반점을 나타내었다. Dioscin이 확인된 25종의 토복령에 대해서 생약규격집에 규정되어 있는 이화학적 실험을 시행하고 dioscin을 지표물질로 하여 HPLC 정량법을 개발하고 그 함량을 정하였다.
HPLC를 실시하였다. 분석조건을 검토하기 위하여 여러 가지 용매조건에서 HPLC chromatogram을 얻고 이들을 검토해 본 결과 CH₃CN-H₂O(60:40)을 이동상으로 사용했을 때 가장 좋은 분리능을 얻을 수 있었다. 이 조건에서 dioscin의 retention time은 약 8분에서 나타나며 다른 물질의 peak와 양호하게 분리되므로 적합한 분석조건임을 알 수 있었다.
분석조건을 검토하기 위하여 여러 가지 용매조건에서 HPLC chromatogram을 얻고 이들을 검토해 본 결과 CH₃CN-H₂O(60:40)을 이동상으로 사용했을 때 가장 좋은 분리능을 얻을 수 있었다. 이 조건에서 dioscin의 retention time은 약 8분에서 나타나며 다른 물질의 peak와 양호하게 분리되므로 적합한 분석조건임을 알 수 있었다. dioscin의 표준 검량선을 작성하여 정량에 이용할 목적으로 stock solution을 만들고 이를 희석하여 표준용액을 제조하였다.
이상과 같은 조건에서 검액도 HPLC를 실시하여 상기 회귀직선방정식으로부터 dioscin 함량을 구한 결과 9종의 시료는 0.5-0.6%의 함량을 나타낸 반면 나머지 시료는 매우 낮은 함량치를 보이고 있다. 이는 장기간 보관 등으로 인하여 유효성분이 분해된 때문이 아닌가 추정하였으나 정확한 이유는 알 수 없었다.

내보내기 구분	파일저장 인쇄 메일전송
구성항목	기본정보 상세정보 관리번호, 논문명, 저널/프로시딩명, 저자 , 발행년, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, 발행기관 관리번호, 논문명, 대등논문명, 저자 , 저널/프로시딩명, 발행기관, 발행년, 발행언어, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, ISBN, ISSN, 주제분야, 키워드, 초록(한글), 초록(영문), 저자(소속기관)
저장형식	Text(ASCII format) Excel format RefWorks Direct Export RIS format (for Reference Manager, ProCite, EndNote), Scholar's Aids, Mendeley
메일정보	받는사람 (필수) @ 보내는사람 (선택) @ 제목 내용 KISTI 검색결과 이메일 서비스
안내	총 건의 자료가 검색되었습니다. 다운받으실 자료의 인덱스를 입력하세요. (1-10,000) 검색결과의 순서대로 최대 10,000건 까지 다운로드가 가능합니다. 데이타가 많을 경우 속도가 느려질 수 있습니다.(최대 2~3분 소요) 다운로드 파일은 UTF-8 형태로 저장됩니다. 파일의 내용이 제대로 보이지 않을실 때는 웹브라우저 상단의 보기 -> 인코딩 -> 자동선택 여부를 확인하십시오. ~ Text(ASCII format) Excel format

연합인증

토복령(土茯令, Smilacis Chinae Radix)으로부터 Dioscin의 분리 및 함량분석
Isolation and Quantitative Determination of Dioscin from Smilacis Chinae Radix 원문보기

Abstract ▼ AI-Helper

주제어

AI 본문요약
AI-Helper

문제 정의

제안 방법

대상 데이터

성능/효과

이 논문을 인용한 문헌

저자의 다른 논문 :

관련 콘텐츠

원문 보기

원문 URL 링크

이 논문과 함께 이용한 콘텐츠

AI-Helper ※ AI-Helper는 오픈소스 모델을 사용합니다.

선택된 텍스트

연합인증

토복령(土茯令, Smilacis Chinae Radix)으로부터 Dioscin의 분리 및 함량분석 Isolation and Quantitative Determination of Dioscin from Smilacis Chinae Radix 원문보기

Abstract ▼ AI-Helper

주제어

AI 본문요약 엑셀 다운로드 AI-Helper

문제 정의

제안 방법

대상 데이터

성능/효과

이 논문을 인용한 문헌

저자의 다른 논문 :

이주미 (2) 장승엽 (19) 이경순 (67) 손건호 (117)

관련 콘텐츠

원문 보기

원문 URL 링크

이 논문과 함께 이용한 콘텐츠

AI-Helper ※ AI-Helper는 오픈소스 모델을 사용합니다.

선택된 텍스트

토복령(土茯令, Smilacis Chinae Radix)으로부터 Dioscin의 분리 및 함량분석
Isolation and Quantitative Determination of Dioscin from Smilacis Chinae Radix 원문보기

AI 본문요약
AI-Helper