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문제 정의
- 이에, 식품의 안전성 확보 및 공중보건 향상을 위하여 예비실험 에서 약용식물들 중 항균력 이 뛰 어나고, 추출수율이 높은 황금추출물을 대상으로 L. monocytogenese:°1] 대한 천연항균제로서의 적용기능성을 검토하였다. 먼저 식품가검물에 있어서 L.
제안 방법
- l 표준탁도로 맞춘 다음 1 mL를 시료에 접종하였다. 각각 접종한 다음, 이를 35℃에서 0, 3, 6, 24, 48, 72, 96, 120시간 동안 배양하였다. 각각의 시험군에서 시료 1 mL씩을 취한 다음 멸균생리식염수로써 10배수 단계 별 희 석 액 100 虬씩 을 Oxford 배 지 에 도말하여 35℃, 24시간 배 양한 후에 colony를 count하여 생육곡선을 측정하였다.
- 각각 접종한 다음, 이를 35℃에서 0, 3, 6, 24, 48, 72, 96, 120시간 동안 배양하였다. 각각의 시험군에서 시료 1 mL씩을 취한 다음 멸균생리식염수로써 10배수 단계 별 희 석 액 100 虬씩 을 Oxford 배 지 에 도말하여 35℃, 24시간 배 양한 후에 colony를 count하여 생육곡선을 측정하였다.
- monocytogenese:°1] 대한 천연항균제로서의 적용기능성을 검토하였다. 먼저 식품가검물에 있어서 L. monocytogenese:^ 오염실태를 조사하였고, L. monocytogenese0] 접종된 식품에 있어서 황금추출불의 항균작용을 살펴 보았으며 , 전자현미 경 을 이용하여 황금 추출물에의 한 L. monocytogenese:^ 세포형태 변화를 관찰하였다.
- monocytogenes 균에 대한 황금추출물의 생육 저해 곡선을 측정 하였다. 시 판되는 무방부제 햄 50 g을 121℃에서 15분간 증기멸균한 후, 동량의 멸균생리식염수를 넣고 황금 추출물을 0, 500, 1,000 및 5,000 ppm(㎎/㎏)의 4개의 시험군으로 하여 균질기를 이용하여 균질화시 킨 것을 시료로 사용하여 생육 곡선 측정 에서와 같은 방법으로 35℃에서 0, 3, 6, 24, 48시간 동안 배양하면서 생육저해곡선을 측정하였다.
- 시료를 3개의 시험군으로 하여 식품 가검물에서 분리 된 L. monocytogenes serotype OT 과 0-4 및 표준균주인 L. monocytogenes ATCC 19111 균주를 1백금이 씩 취해서 10 mL TSB에 각각 접 종한 다음 35℃에서 24시간 동안 배양시 킨 배 양액 을 McFarland No.l 표준탁도로 맞춘 다음 1 mL를 시료에 접종하였다. 각각 접종한 다음, 이를 35℃에서 0, 3, 6, 24, 48, 72, 96, 120시간 동안 배양하였다.
- 식 품 가검 물로부터 분리 ■ 동정 된 L. monocytogenes 에 대하여 황금추출물의 항균력을 검토하였다. 먼저 오염실태를 조사하였는데, 검사대상 가검 물 178건 중 30건이 검출되 어 16.
- 식품에 있어서 분리균주의 생육특성을 조사하기 위하여 시판되는 무방부제 햄 50 g을 121℃에서 15분간 증기 뗠균한 후, 동량의 멸균생리식 염수를 넣고 균질화시킨 것을 시료로 이용하였다. 시료를 3개의 시험군으로 하여 식품 가검물에서 분리 된 L.
- 3 %)■으로 나타났다. 식품에 있어서 생육관계를 조사하기 위하여 시 판되는 무방부제 햄 을 시료로 분리 균주들을 각각 접종한 다음 35℃에서 0, 3, 6, 24, 48, 72, 96 및 120시간 동안 배양하여 얻은 생육곡선에서 L. monocytogenes 균주들 모두가 유도기, 대 수기 , 정 지 기 , 사멸 기 를 거 치 는 전 형 적 인 S자 모양의 생육곡선을 보였다. 식품에 대한 황금추출물의 항균작용을 알아보기 위하여 증기멸균된 무방부제햄과 동량의 멸균생리식 염수를 넣고 황금추출불의 농도가 0, 500, 1,000 및 5, 000 ppm(㎎/㎏)이 되도록 균질화시킨 시료에 분리균주들을 각각 접 종한 다음, 35℃에서 0, 3, 6, 24, 48시간 동안 배양하여 얻은 생육저 해곡선에서 L.
- 식품에 있어서 황금추출물의 항균작용을 알아보기 위하여 L. monocytogenes 균에 대한 황금추출물의 생육 저해 곡선을 측정 하였다. 시 판되는 무방부제 햄 50 g을 121℃에서 15분간 증기멸균한 후, 동량의 멸균생리식염수를 넣고 황금 추출물을 0, 500, 1,000 및 5,000 ppm(㎎/㎏)의 4개의 시험군으로 하여 균질기를 이용하여 균질화시 킨 것을 시료로 사용하여 생육 곡선 측정 에서와 같은 방법으로 35℃에서 0, 3, 6, 24, 48시간 동안 배양하면서 생육저해곡선을 측정하였다.
- 식품에 있어서 황금추출물의 항균착용을 알아보기 위하여 시 판되는 무방부 제 햄 에 황금추출물을 0, 500, 1000, 5000 ppm (m增Zkg)의 똥도가 되 도록 첨가한 4게의 시험 군에 L monocytogenes serotype OT과 0-4 및 표준균주인 L monocytogenes ATCC 19111 균주를 접종한 다음 35℃에서 0, 3, 6, 24, 48시간 동안 배양하면서 얻은 L monocytogenes있어서 생육저 해곡선은 Fig. 2, 3, 4와 같다. L monocytogenes serotype OT과 0-4 및 표준균주인 L.
- 전 처리 한 시 료들을 증균배 양 시 킨 후 Oxford Agar 상에서 흑갈색의 전형적 인 집락을 선별하여 Gram염 색 양성, :motility 양성 , catalase 양성 , oxidase 음성 , P-hemolysis 양성인 균주를 골라 API -Li s teria (bioMericux) kit 를 사용하여 판독하였다. 그 결과 축산물의 유형 별 L.
- 황금추출물의 처리로 인한 L. 의 세포형태변화를 알아보기 위해 대수성장기의 균체세포■들에 대하여 황금추출물 1,000 ppm의 농도로 처리한 것과, 처리하지 않은 것을 대조구로 이용하였다. 처리 전후의 세포구조는 Park 등 (14)의 방법에 따라 조직표본을 제작하여 투과전자현미경 (TEM : Transmission electron microscope, Hitachi H-600, Japan)으로 관찰하였다.
대상 데이터
- 동부지역(김해시, 밀양시의 3개 권역에서 2。。。년 3월부터 10월까지 시 판된 국내산 및 수입 축산물 및 식육 가공품, 유 가공'품, 냉동식 품 등 종 178건을 대상으로 L. monocytagenes균의 오염 실태 조사를 실시하였다. L.
이론/모형
- monocytagenes균의 오염 실태 조사를 실시하였다. L. monocytogenes균의 분리 및 동정은 식품공전(12), 축산불 가공기준 및 성분규격(13)에 따라 식육 및 식육가공품과 유가공품으로 분리하여 실험하였다.
- 의 세포형태변화를 알아보기 위해 대수성장기의 균체세포■들에 대하여 황금추출물 1,000 ppm의 농도로 처리한 것과, 처리하지 않은 것을 대조구로 이용하였다. 처리 전후의 세포구조는 Park 등 (14)의 방법에 따라 조직표본을 제작하여 투과전자현미경 (TEM : Transmission electron microscope, Hitachi H-600, Japan)으로 관찰하였다.
성능/효과
- monocytogenes 30균주를 슬라이드 응집법(slide agglutination)으로 혈청형을 확인하였는데 n 결과는 Table 2와 같으며, 분리 된 乙. monocytogenes 30균주 중에서 serotype OTe 23건(76.7%)확인되 었으며 , serotype 0-4는 7건(23.3%)으로 나타났다. 축산물의 유형별 혈청형을 살펴보면 쇠고기 8균주, 돼 지 고기 4균주를 비롯한 닭고기에서 분리한 9균주와 냉동식품에서 분리 한 2균주는 모두 serotype O-1 혈청형이었고, 쇠고기에서 분리된 5균주, 돼지고기에서 분리된 2균주는 serotype O-4 혈청형으로 확인되었다.
- 그 결과 축산물의 유형 별 L. monocytogenes 검출율은 Table 1과 같으며, 검사대상 가검물 178건 중 30건이 검출되어 16.9%의 검출율을 나타내었다. 쇠고기에 있어서 93건 중 13건이 검출되어 14.
- 0%의 검출율을 보였고, 원산지별로는 한우 27건 중 5건, 미 국산 32건 중 5건, 호주산 25건중 2건, 카나다산 9건 중 1건의 순으로 검출되었다. 돼지고기 에서는 29건 중 6건이 분리 되어 20.7%의 비교적 높은 검출율을 보였으며, 닭고기는 검사 시료 23건 중 9건이 검출되어 39.2%의 가장 높은 검출율을 나타내었다. 한편, 가공식품에 있어서 육제품인 소시지류 및 햄류와 유제품인 치즈, 시유 등의 살균제품에서는 L.
- monocytogenes 에 대하여 황금추출물의 항균력을 검토하였다. 먼저 오염실태를 조사하였는데, 검사대상 가검 물 178건 중 30건이 검출되 어 16.9%의 검출율을 보였다. 쇠고기에서는 93건 중 13건(140 %)이 검출되었고, 돼지고기 에서는 '29건 중 6건(20.
- 7知이 검줄되 었다. 분리 된 L. monocytogenes 30균주를 슬라이드 응집법으로 혈청 형을 확인한 결과 30균주 중에서 serotype 0-Ie 23건(76.7%)이 확인되 었으며, serotype 0-4는 7건(23.3 %)■으로 나타났다. 식품에 있어서 생육관계를 조사하기 위하여 시 판되는 무방부제 햄 을 시료로 분리 균주들을 각각 접종한 다음 35℃에서 0, 3, 6, 24, 48, 72, 96 및 120시간 동안 배양하여 얻은 생육곡선에서 L.
- 9%의 검출율을 나타내었다. 쇠고기에 있어서 93건 중 13건이 검출되어 14.0%의 검출율을 보였고, 원산지별로는 한우 27건 중 5건, 미 국산 32건 중 5건, 호주산 25건중 2건, 카나다산 9건 중 1건의 순으로 검출되었다. 돼지고기 에서는 29건 중 6건이 분리 되어 20.
- 9%의 검출율을 보였다. 쇠고기에서는 93건 중 13건(140 %)이 검출되었고, 돼지고기 에서는 '29건 중 6건(20.7%)이 분리되 었으며, 닭고기는 검사 시료 23건 중 9건(39.2%)이 검출되어 가장 높은 검줄율을 나타내었다. 가공식품에 있어서 육제품인 소시지류 및 햄류와 유제품인 치즈, 시유 등의 살균제폼에서는 乙 monocytogenes 균이 검출되지 않은 반면, 냉동식품인 분쇄가공품에서는 검사시료 12건 중 2건(16.
- monocytogenes 균주들 모두가 유도기, 대 수기 , 정 지 기 , 사멸 기 를 거 치 는 전 형 적 인 S자 모양의 생육곡선을 보였다. 식품에 대한 황금추출물의 항균작용을 알아보기 위하여 증기멸균된 무방부제햄과 동량의 멸균생리식 염수를 넣고 황금추출불의 농도가 0, 500, 1,000 및 5, 000 ppm(㎎/㎏)이 되도록 균질화시킨 시료에 분리균주들을 각각 접 종한 다음, 35℃에서 0, 3, 6, 24, 48시간 동안 배양하여 얻은 생육저 해곡선에서 L. monocytogenes 균주들 모두가 유도기를 거 친 다음인 6시간이 경 과된 후 황금추출물의 농도에 따라 시험 균주의 균수 차이를 보였고, 식품 중의 L. monocytogenes에 있어서 생육이 억제되는 황금추출물 유효저해농도는 1000 ppm이었다. 세포형태변화를 관찰하기 위한 투과형전자현미경(TEM)상에서 황금추출물 처리로 인한L.
- 식품에 있어서 분리균주의 생육관계를 조사하기 위하여 시 판되는 무방부제햄을 시료로 하여, L monocytogenes serotype OT과 0-4 및 표준균주인 L monocytogenes ATCC 19111 균주를 접종한 다음 35℃에서 0, 3, 6, 24, 48, 72, 96, 120시간 동안 배양하면서 얻은 L. monocytogenese 생육곡선은 Fig. 1과 갚다, L. monocytogenes serotype OT과 0~4 및 표준 균주인 L. monocytogenes ATCC 19111 모두가 유도기, 대수기, 정지기, 사멸기를 거치는 전형적인 S자 모양의 생육 곡선을 나타내고 있음을 볼 수 있다.
- 3%)으로 나타났다. 축산물의 유형별 혈청형을 살펴보면 쇠고기 8균주, 돼 지 고기 4균주를 비롯한 닭고기에서 분리한 9균주와 냉동식품에서 분리 한 2균주는 모두 serotype O-1 혈청형이었고, 쇠고기에서 분리된 5균주, 돼지고기에서 분리된 2균주는 serotype O-4 혈청형으로 확인되었다.
- monocytogenes ATCC 19111 균주 모두가 유도기를 거친 다음인 6시간이 경과된 후 황금추출물의 농도에 따라 시험균주의 균수 차이를 볼 수 있었다' 황금추출물 1,000 ppm 농도에서 생육이 억제되는 것을 확인할 수 있었고, 5, ppm 이상의 농도에서는 생육이 크게 저해되는 것을 볼 수 있었다. 황금추출물에 대한 감수성에 있어서는 표준균주인 L. monocytogenes ATCC 19111 균주가 식품가검물에서 분리 한 L. monocytogenes serotype OT과 O -4 균주들에 비해 감수성이 높은 것을 확인할 수 있었다.
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