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문제 정의
- 따라서 본 실험은 시판 녹차, 오룡차 및 홍차에서 추출된 조카테킨 조성 및 이들 카테킨의 2성 분 항산화 시스템, 3성분 항산화 시스템의 항산화 효과를 조사하 고자 하였다.
- 따라서 본 실험은 시판 녹차, 오룡차 및 홍차에서 추출된 조카테킨 조성 및 이들 카테킨의 2성 분 항산화 시스템, 3성분 항산화 시스템의 항산화 효과를 조사하 고자 하였다.
제안 방법
- 녹차, 오룡차 및 홍차 중의 카테킨 조성은 HPLC (high performance liquid chromatography)# 이용하여 측정하였다. 동결건조하여 얻어진 조카테킨은 ethyl acetate에 녹여 0.
- 녹차, 오룡차 및 홍차에 5배의 증류수를 가하고 5분 간 환류 냉각하에서 각각 열수 추출한 후 여과 (Whatman No. 2)하여 물 추출물을 얻었다. 이 물 추출 물에 caffein을 제거 하기 위하여 동량의 클로로폼을 가 한 후 그 수용액 층만을 분리하여 ethyl acetate로 3회 추출하고, 다시 이 ethyl acetate층에 소량의 물을 가하여 40℃에서 감압농축하여 얻어진 수용액을 동결 건 조하여 조카테킨을 조제하였다.
- 녹차, 오룡차 및 홍차에 대한 a-tocopherol과의 상승 효과를 비교하기 위해 각각의 차추출물(100ppm)에 a -tocopherol(50ppm)^ 각각 첨가하여 a a-tocopher이과의 2성분 항산화 시스템에서 이들의 상승효과를 비교하였다. 또한 차 추출물(100ppm)에 ^-tocopherol(50 ppm) 과 ascorbyl palmitate(50ppm)를 함께 첨가하여 3성분 항산화 시 스템에서 이들의 상승효과도 비교, 조사하였다.
- 각각의 농도별로 제 조된 linoleic acid는 감압농축기 (40± 1 °(')를 사용하여 용매를 제거하였다. 또한 기존 항산화제 중 a-toco- pherol (Sigma Co. Ltd., U.S.A.)과 ascorbyl palmitate (Aldrich Chemical Co., U.S.A), BHT(Sigma Co. Ltd., USA.)도 위와 동일한 방법을 사용하여 비교, 조사하였다.
- 녹차, 오룡차 및 홍차에 대한 a-tocopherol과의 상승 효과를 비교하기 위해 각각의 차추출물(100ppm)에 a -tocopherol(50ppm)^ 각각 첨가하여 a a-tocopher이과의 2성분 항산화 시스템에서 이들의 상승효과를 비교하였다. 또한 차 추출물(100ppm)에 ^-tocopherol(50 ppm) 과 ascorbyl palmitate(50ppm)를 함께 첨가하여 3성분 항산화 시 스템에서 이들의 상승효과도 비교, 조사하였다.
- 열수 및 메탄올 추출물의 수소공여능은 DPPH(1, 1- diphenyl-picrylhydrazyl)의 환원성 을 이용하여 516nm에서 UV/Vis spectrophtometer(Beckman DU-65, U.S.A.)로 측정하였다. 즉, 분획물 8ml와 0.
- 2)하여 물 추출물을 얻었다. 이 물 추출 물에 caffein을 제거 하기 위하여 동량의 클로로폼을 가 한 후 그 수용액 층만을 분리하여 ethyl acetate로 3회 추출하고, 다시 이 ethyl acetate층에 소량의 물을 가하여 40℃에서 감압농축하여 얻어진 수용액을 동결 건 조하여 조카테킨을 조제하였다.
- 이와 같이 농도별로 첨가된 linoleic acid는 100ml 비 이 커 에 40g씩 분취 하여 40 ℃ 로 유지 되는 항온기 에 저 장하면서 일정 저장기간별로 과산화물가(AOCS Cd 8-35)를 측정(5)하였다.
- )로 측정하였다. 즉, 분획물 8ml와 0.035% DPPH용액 (6.25 X 10 5 M) 2ml를 시험관에서 5초동안 vortex mixer로 혼합한 후 30분 후의 홉광도를 측정하였다.
대상 데이터
- 실험에 사용한 녹차, 오룡차, 홍차시료는 국내에서 시판되고 있는 tea bag제품을 구입하여 사용하였다. 추출에 사용한 chloroform, ethyl acetate는 일급시 약, 이 외의 분석용 시약들은 모두 특급시약을 사용하였다.
성능/효과
- 5%이었다. EGC, EC, EGCg 및 ECg의 4개의 카테 킨류가 확인되었으며, EGCg 성분이 가장 많은 함량을 보였다. 녹차, 오룡차 및 홍차의 총 카테킨의 함량은 각각 926.
- 각각의 차 추출물(lOOppm)에 a-tocopher이과 ascorbyl palmitate 50ppm을 함께 첨가된 linoleic acid의 과산 화물가의 변화를 측정한 결과(Fig. 5), 저장 6일째의 과 산화물가는 각각 7.0 meq/kg oil, 7.2 meq/kg oil 및 17.0 meq/kg oil로 녹차에서의 상승효과가 가장 강한 것으로 나타났다. 이들의 항산화 효과는 녹차 카테킨 200 ppm 단독 첨가의 경우<43.
- 일반적으로 카테킨류는 3위의 칼레이트기(gallate group) 및 B환의 5위의 수산기가 항산화력 발현에 관 여하는 것으로 알려져 있으며, 특히 B환의 5위에 수산 기가 붙어 있는 EGC, EGCg는 B환의 5위의 수산기가 없는 EC, ECg에 비하여 3배 정도 강한 것에서 B환의 수산기의 수가 항산화 활성에 영향을 미치는 것으로 알려져 있다'" 여 등'"은 오룡차 중의 EGCg의 함량이 녹차, 홍차보다 많기 때문에 오룡차의 효과가 가장 큰 것으로 설명하고 있다. 그러나 본 실험에서는 녹차의 경우, EGCg의 함량이 가장 많음에도 불구하고 오룡차 보다 유지 산패억제 효과가 낮은 것으로 나타났다.
- 녹차, 오룡차 및 홍차 조카테킨 첨가구의 항산화 효과는 오 룡차〉녹차〉홍차의 순이었다. 녹차, 오룡차 및 홍 차 조카테 킨(100ppm)에 a-tocopherol(50ppm)을 첨가 했을 때의 항산화효과는 녹차〉오룡차〉홍차 조카 테킨 순으로 녹차에서 가장 강한 상승작용을 나타냈 다. 녹차, 오룡차 및 홍차 카테 킨(100ppm)에 a-toco- pherol(50ppm) 및 ascorbyl palmitate(50ppm)를 함께 첨가한 경우, 조카테킨(200 ppm)을 단독으로 첨가한 경 우보다 항산화 효과가 강하였다.
- 녹차, 오룡차 및 홍차 추출물(lOOppm)에 ^-tocophe- rol(50ppm)을 병용하여 첨가한 linoleic acid의 과산화 물가의 변화를 측정한 결과(Fig. 4), 저장 6일째의 과산 화물가는 각각 16.0 meq/kg oil, 18.6 meq/kg oil 및 23.0 meq/kg oil로 녹차의 항산화 효과가 가장 강한 것으로 나타났다. 상승제 첨가의 결과는 대조구보다 산패억 제 효과가 있었으며 조카테킨를 단독으로 200ppm 첨 가시보다 효과가 우수하였다.
- 녹차, 오룡차 및 홍차로부터 추출한 조카테킨을 200ppm의 농도로 각각 첨가된 linoleic acid의 과산화 물가의 변화를 측정한 결과(Fig. 2), 저장 6일째의 과산 화물가는 각각 43.6 meq/kg oil, 35.6 meq/kg oil 및 47.0 meq/kg oil로 오룡차의 항산화 효과가 가장 강하였다.
- 4%로 EGCg의 함량비율이 절반을 차지하였다. 녹차, 오룡차 및 홍차의 총 카테킨의 함량은 각각 926.3ug/g, 713.8ug/g 및 318.0 ug/g으로 녹차에 비해 각각 32.9% 및 65.7% 정도 적은 것으로 나타났다.
- 녹차, 오룡차 홍차의 조카테킨의 수율은 각각 5.4%, 3.5% 및 2.5%으로 녹차의 수율이 가장 높았다. 또한 녹차, 오룡차 및 홍차의 조카테 킨 조성 및 함량을 조사 한 결과(Fig.
- 5%으로 녹차의 수율이 가장 높았다. 또한 녹차, 오룡차 및 홍차의 조카테 킨 조성 및 함량을 조사 한 결과(Fig. 1 및 Table 2), EGC, EC, EGCg 및 ECg 등 4개의 카테킨류가 확인되었으며, 그 중에서 EGCg 성분이 가장 많은 함량을, EC는 가장 적은 함량을 보였다. 녹차의 경우, EGC, EC, EGCg 및 ECg의 성분비 율은 24.
- 5배 정도로 상당히 높은 것을 나타냈다. 또한 수 소공여능은 녹차의 경우 가장 높았으며 홍차의 경우가 가장 낮은 것으로 나타나 녹차, 오룡차 및 홍차의 항산화 효과는 갈색도나 수소공여능과 밀접한 관련성 을 보이지 않았다.
- 본 연구에서의 갈변도, 카테킨의 함량을 종합적으 로 고려해 볼 때, 오룡차의 항산화 효과는 반발효과정 에서의 생성된 갈색화 반응 초기 생성물나 카테킨류 의 가수분해에 의해 생성되는 gallic acids와의 상승작 용에 기인하는 것으로 사료되었다.
- 0 meq/kg oil로 녹차의 항산화 효과가 가장 강한 것으로 나타났다. 상승제 첨가의 결과는 대조구보다 산패억 제 효과가 있었으며 조카테킨를 단독으로 200ppm 첨 가시보다 효과가 우수하였다.
- 0 meq/kg oil로 녹차에서의 상승효과가 가장 강한 것으로 나타났다. 이들의 항산화 효과는 녹차 카테킨 200 ppm 단독 첨가의 경우<43.6 meq/kg oil)보다 상당히 강한 항산화 효과를 나타냈으며, 합성 항산화제 인 BHT(17.0 meq/ kg oil)보다도 우수하였다.
- 0 meq/kg oil로 BHT가 가장 강한 효과를 보였다. 전체적으로 차카테킨은 천연항산화제 인 a-tocopherol, ascorbyl palmitate보다는 항산화 효과가 강한 반면, 합성 항산화제인 BHT보다는 약한 것으로 나타났다.
- 한편 기존의 항산화제 인 a-tocopherol, ascorbyl palmitate 및 BHT를 200ppm의 농도로 각각 첨가된 linoleic acid의 과산화물가의 변화를 측정한 결과(Fig.3), 저장 6일째의 과산화물가는 각각 72.5 meq/kg oil,89.1 meq/kg oil 및 13.0 meq/kg oil로 BHT가 가장 강한 효과를 보였다. 전체적으로 차카테킨은 천연항산화제 인 a-tocopherol, ascorbyl palmitate보다는 항산화 효과가 강한 반면, 합성 항산화제인 BHT보다는 약한 것으로 나타났다.
후속연구
- 지금까지의 상승제에 관한 연구는 1종류의 항산화 제에 1종류의 상승제를 병용한 2성분 항산화제 시스 템에서 행한 것이 대부분이다. 차카테킨과 같은 폴리 페놀 화합물들은 단독 또는 2성분 항산화시스템 (binary antioxidant system)보다는 1종류의 항산화제에 2종류의 상승제를 병용한 3성분 항산화 시스템(temaiy antioxidant system)에서 항산화 효과를 보다 개선할 수 있을 것으로 기대된다.
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