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문제 정의
- 따라서, 본 실험은 연어 알에서 추출한 DNA와 칡에서 추출한 crude catechin을 투여 하며, 주기적으로 적용한 운동 부하가 생체내 지방조성과 항산화작용에 미치는 영향을 조사하고자 실시하였다.
제안 방법
- DNA와 칡 catechin 및 운동부하가 생체 내 미치는 영향을 조사하기 위해 혈장 내 성분을 다음 방법을 이용하여 정 량혹은 측정하였다.
- 대조군 외 운동부하 및 경구투여가 요구되는 군은 매일 17시에 상기 조제주사를 경구투여 한 후 운동부하를 주어 실험하였다. DNA와 칡 추출물의 경구투여는 각각 사료섭취량의 0.4%와 0.1% 수준으로 맞추어 DNA는 0.08 g/mL, 칡은 0.02 g/mL의 농도로 투여하였다.
- 경구 투여로 실시하였다. 대조군 외 운동부하 및 경구투여가 요구되는 군은 매일 17시에 상기 조제주사를 경구투여 한 후 운동부하를 주어 실험하였다. DNA와 칡 추출물의 경구투여는 각각 사료섭취량의 0.
- 사료 급여 외에 DNA 및 칡 catechin의 급여는 조제 주사를 이용한 경구 투여로 실시하였다. 대조군 외 운동부하 및 경구투여가 요구되는 군은 매일 17시에 상기 조제주사를 경구투여 한 후 운동부하를 주어 실험하였다.
- 사료는 (주)일본 크레아(# 配合飼料)에서 공급받은 rat 사료로 실험동물의 건강유지에 충분한 양을 공급해 주었다. 사료의 급여는 매일 9시부터 17시까지 충분히 섭취시킨 후, 다음날 9시까지 절식시켜 충분한 계류시간을 두었다.
- 실험동물은 건국대학교 실험동물 사육실에서 8마리를 한 군으로 하여 Table 1과 같이 각각 대조군(Con), 운동처리군 (Exercise), 운동처리와 DNA를 투여한 군(Exercise+DNA) 및 운동 처리에 DNA와 crude catechin을 투여한 군(Exercise+ DNA+Crude catechin)의 4군으로 나누어 사육하였다. 사료는 (주)일본 크레아(# 配合飼料)에서 공급받은 rat 사료로 실험동물의 건강유지에 충분한 양을 공급해 주었다.
- 실험종료군은 24시간 절식하여 에테르로 가볍게 마취한 후 복부를 절개하여 심장채혈하였고, 개복 후 간, 심장, 신장지방, 부고환지방 등을 적출하여 무게를 칭 량하고 냉동 보관하였다. 채혈한 혈액은 30분 동안 실온에 방치하였다가 3, 000 rpm으로 20분간 원심분리하여 혈청을 분리한 후 - 18℃에 냉동 보관하며 실험에 이용하였다.
- 운동 부하는 경사 7℃에서 평균 20 m/min의 조건으로 최초 15분부터 일일 5분의 증가량을 감안하여 최종 60분까지를 상한선으로 하여 주행시키면서 6주 동안 운동처치 하였다. 운동처리가 끝난 군은 충분한 식수공급으로 다음날 9시까지 절식하여 스트레스를 받지 않도록 계류 조치하였다.
- Puerariae thunbergiana 에서 Iwasa와 Torri(1962) 의 방법에의해 추출하였다. 즉, 시중 한국산 칡뿌리에서 즙을 짠 후, 칡즙 100 mL에 대하여 1:10의 부피(V/V)비로 물 및 에탄올에 현탁 시켜, 100℃에서 환류기를 이용해 추출하였다. 그 증류액은 플라스크에 모아 진공농축을 하였고, 냉동보관하며 사용하였다.
대상 데이터
- DNA는 연어 알에서 추출하여 분말화 한 것을 (주)일본 사루데약품으로부터 제공받아 이용하였으며, 칡 crude catechin 은 Puerariae thunbergiana 에서 Iwasa와 Torri(1962) 의 방법에의해 추출하였다. 즉, 시중 한국산 칡뿌리에서 즙을 짠 후, 칡즙 100 mL에 대하여 1:10의 부피(V/V)비로 물 및 에탄올에 현탁 시켜, 100℃에서 환류기를 이용해 추출하였다.
- 그 증류액은 플라스크에 모아 진공농축을 하였고, 냉동보관하며 사용하였다. 또, 본 실험에 사용된 동물은 Sprague-Dawley계 rat 로 6주령(90~110 g)의 수컷을 사용하였다.
- 사료는 (주)일본 크레아(# 配合飼料)에서 공급받은 rat 사료로 실험동물의 건강유지에 충분한 양을 공급해 주었다. 사료의 급여는 매일 9시부터 17시까지 충분히 섭취시킨 후, 다음날 9시까지 절식시켜 충분한 계류시간을 두었다.
데이터처리
- 실험에 의한 자료처리는 MS Excel 및 SAS(Stastic Analytical System, USA) Program을 사용하여 구하였고, 신뢰구간 검정은 K2 검정에 의하였고, 유의차 검정은 Duncan Multiple Range Test로 모두 95% 이상의 신뢰구간을 기준으로산술하였다.
이론/모형
- 또한 glutamate oxaloacetate transaminase(GOT) 및 glutamate pyruvate transa-minase(GPT)농도는 일본 소화기학회 간기능 연구반이 만든 표준 조제법 (Reitmamflankle법)에 따라 transaminase 측정 kit 를 이용하여 측정하였다. Thiobarbituric acid(TBA)가는 Yagi 등(1979)의 방법을 사용하여 측정하였다.
- (Japan)의 HDL-cholesterol kit 및 phospholipids kit, triglyceride G-test kit, NEFA kit를 사용하였다. 또한 glutamate oxaloacetate transaminase(GOT) 및 glutamate pyruvate transa-minase(GPT)농도는 일본 소화기학회 간기능 연구반이 만든 표준 조제법 (Reitmamflankle법)에 따라 transaminase 측정 kit 를 이용하여 측정하였다. Thiobarbituric acid(TBA)가는 Yagi 등(1979)의 방법을 사용하여 측정하였다.
- 분리된 혈청의 생화학적 검사로 혈중 cholesterol 농도는 효소법을 이용한 Sterozyme 545 Kit(Fiyi Lebio Co., Japan)를 사용하였다. High density lipoprotein cholesterol 및 phospholipids, triglyceride, non-esterified fatty acid 농도는 Wako Pure Chemical Co.
성능/효과
- 6주 동안의 체중증가량은 운동부하를 적용한 운동군이 대조군(Control)과 비교하여 약 10-20 g의 체중증가를 보였으나, 운동군 및 운동 + DNA군과 운동 + DNA + catechin군의 체중증가량은 101.6±21.8, 104.1±12.3 및 102.3±35.3 g으로유의차가 없는 균일한 범위내로 나타났다.
- 확인되었다. DNA와 crude catechin의 투여는 기대한 만큼 생체내 지방산조성과 항산화활성에 효과가 나타나지 않았으나 catechin 투여군에서 혈액내 GOT활성이 낮고 NEFA 는 증가하는 경향이 나타났다.
- 특히 간의 무게는 운동에다 DNA와 catechin의 투여에 의하여 감소되 었고, 부고환 지방 및 신장지방의 무게는 운동부하군 내에서는 DNA 및 catechin투여에 의한 차이는 없었다. 따라서 운동부하가 체지방을 줄이는데 가장 효과적인 것이 재확인되었다.
- 또한 glucose의 함량도 각 군간의 유의차는 없었지만 운동 부하가 적 용된 군에서 증가되는 경향을 보였고 운동과 칡 catechin 을 적용한 군에서 가장 적은 범위를 나타내었다(Table 6).
- 사료급여에 따른 증체와의 상관관계를 살펴볼 때, 100 g 당 사료 섭취 량은 운동부하군들이 대조군의 섭취 량에 비해 낮은 수치를 보였다. 즉 사료효율은 대조군에 비해 운동부하군, 운동부하+DNA, 운동부하+DNA+Crude catechin 첨가군이 유의성은 없으나 낮은 값을 나타냈고, DNA 및 Crude catechin의 투여에 따른 효과는 나타나지 않았다.
- 이상의 결과를 종합하면 운동부하가 혈액내 phospholipid 총 cholesterol과 triglyceride# 감소시키고 HDL-cholesterole증가시켜 혈액내의 지질변화를 긍정적으로 개선시켜 주는 것이 확인되었다. DNA와 crude catechin의 투여는 기대한 만큼 생체내 지방산조성과 항산화활성에 효과가 나타나지 않았으나 catechin 투여군에서 혈액내 GOT활성이 낮고 NEFA 는 증가하는 경향이 나타났다.
- 보였다. 즉 사료효율은 대조군에 비해 운동부하군, 운동부하+DNA, 운동부하+DNA+Crude catechin 첨가군이 유의성은 없으나 낮은 값을 나타냈고, DNA 및 Crude catechin의 투여에 따른 효과는 나타나지 않았다. 따라서 대조군과 다른 3군 간의 사료효율차는 운동부하에 따른 것으로 사료된다.
- 혈액중의 GOT활성은 Exercise+DNA+catechin군이 유의성은 없었으나 다른 군에 비하여 비교적 낮았으며, GPT 활성은 각 군간에 차이가 없었다(Table 5). GOT 및 GPT 활성이 높은 경우는 심근경색, 급성간염 및 만성간염이 발병한다는 사실을 유의하면 운동을 하며 칡 catechin을 섭취하면 이들의 질병 예방에 어느 정도 효과가 있을 것으로 기대되며, 이를 위하여 세분화된 연구가 필요하다고 생각한다.
- 이는 Mayumi 등(1986)의 고지방식이에 녹차추출물인 catechin섭취 후 혈청 triglyceride가 유의하게 낮아지는 보고와 일치하는 결과로 나타났다. 혈중 phospholipid 및 총 cholesterol 량은 대조군에 비해 운동 부하 군들이 유의하게 낮은 값을 나타내었으며 (p<0.05), HDL-Cholesterol인 경우는 대조군에 비해 운동부하군과 운동 및 DNA투여군이 유의하게 높은 값을 나타냈다(pv0.05). 그러나, HDL-cholesterol 농도는 DNA에 의한 영 향은 없고 칡 catechin에 의해 오히려 감소되는 것으로 나타났으므로 이 결과는 운동에 의한 것으로 판단된다.
- 혈증 NEFA의 함량은 운동에 의해서는 대조군과 유의차는 없었으나 칡 crude catechin 첨가군이 대조군에 비해 p<0.05로유의하게 크게 나타났다(Table 6).
후속연구
- 군간에 차이가 없었다(Table 5). GOT 및 GPT 활성이 높은 경우는 심근경색, 급성간염 및 만성간염이 발병한다는 사실을 유의하면 운동을 하며 칡 catechin을 섭취하면 이들의 질병 예방에 어느 정도 효과가 있을 것으로 기대되며, 이를 위하여 세분화된 연구가 필요하다고 생각한다. TBA가는 각 군 간의 유의차가 보이지 않았다.
- 따라서, 운동과 더불어 crude catechin 섭취가 유의한 차이를 나타내지는 않았지만 혈청지질의 성분의 향상에 보조역할을 할 것으로 사료된다.
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