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문제 정의
- 많이 이용되고 있다. 따라서 본 실험에서는 예로부터 우리가 상용하거나 식용 또는 약재로 사용되어 그 안전성이 확인된 각종 생약재를 메탄올로 추출하여 이들 추출물의 DPPH 와 superoxide anion radical 소거능을 검색하여 천연 항산화제로서의 개발 가능성을 조사하였다.
제안 방법
- Superoxide anion radical 소거 능 측정. 이 분석 법 은 xanthine/xanthine oxidase system에 의해 발생되는 superoxide anion radical를 항산화제가 제거시키는 정도를 확인하는 실험으로써 nitro blue tetrazolium(NBT)의 감소 정도를 통하여 항산화능을 측정 한다.
- 각 실험은 3회 반복하여 수행하였다. 음성 대조구 실험은 시료 대신에 EtOH 100μl를 취하여 실험 하였고 양성 대조구 실험은 항산화 물질을 함유 하고 있는 것으로 확인된 생강 근경과 작약 뿌리6, 7)및 녹차에서 추출한 MeOH 추출물과 그리고 상용항산화제인 BHT, BHA, L-Ascorbic acid, a-tocopherol을 이용하여 동일한 방법으로 실시하였다. EDA는 시료 첨가구와 무첨가구의 흡광도를 구하여 다음과 같이 백분율로 표시하였다.
- Superoxide anion radical 소거 능 측정. 이 분석 법 은 xanthine/xanthine oxidase system에 의해 발생되는 superoxide anion radical를 항산화제가 제거시키는 정도를 확인하는 실험으로써 nitro blue tetrazolium(NBT)의 감소 정도를 통하여 항산화능을 측정 한다. 측정은 권등8)의 방법에 따라 수행하였으며 각 시료를 1 mg이 되게 취한 후 50% EtOH 1 ml에 용해하여 사용하였다.
대상 데이터
- 및 실험기기. 본 실험에 사용된 DPPH(l, l-diphenyl-2- picryl hydrazyl)와 xanthine, xanthine oxidase, BHA(butylated hydroxyanisole), BHT(butylated hydroxytoluene), L-ascorbic acid, cx-tocopherol 및 NBT(nitro blue tetrazolium)는 Sigma(st. Louis, USA) 제품을 사용하였고 그 외 시약은 특급 시약을 사용하였다. 분석에 이용된 UV-Visible spectrophotometer는 Shimadzu(Tokyo, Japan) UV-1601 을 사용하였다.
- Louis, USA) 제품을 사용하였고 그 외 시약은 특급 시약을 사용하였다. 분석에 이용된 UV-Visible spectrophotometer는 Shimadzu(Tokyo, Japan) UV-1601 을 사용하였다.
- 실험 재료 및 활성 측정용 시료 제조 본 실험에 사용된 시료는 시판되는 한약재와 약용식물을 사용하였으며 공시된 생약재는 Table 1과 같다. 이들 시료는 한약재상에서 구입 동정하여 건조한 후 미세하게 마쇄하였고, 실온에서 하루 동안 80% 메탄올로 침지하여 여과, 농축 한 후 측정용 시료로 사용하였다.
- Table 1과 같다. 이들 시료는 한약재상에서 구입 동정하여 건조한 후 미세하게 마쇄하였고, 실온에서 하루 동안 80% 메탄올로 침지하여 여과, 농축 한 후 측정용 시료로 사용하였다.
이론/모형
- DPPH를 이용한 전자 공여능 측정. DPPH에 대한 전자 공여능(electron donating ability, EDA)은 Blois5' 방, 법에 따라 즉정하였다. 각 시료 1 mg을 EtOH 1 ml에 용해하여 사용하였다.
- 이 분석 법 은 xanthine/xanthine oxidase system에 의해 발생되는 superoxide anion radical를 항산화제가 제거시키는 정도를 확인하는 실험으로써 nitro blue tetrazolium(NBT)의 감소 정도를 통하여 항산화능을 측정 한다. 측정은 권등8)의 방법에 따라 수행하였으며 각 시료를 1 mg이 되게 취한 후 50% EtOH 1 ml에 용해하여 사용하였다. 시험관에 시료용액 100M와 0.
성능/효과
- 0%정도의 활성을 나타내었다. 그리고 약용식 물은 희수(Camptotheca acuminata Dence)의 지상부가 82.1%의 높은 활성을 나타내었고 창질경이(Pfcmtago lanceolatd) 지상부, 짚신나물(Agrimonia pilosd) 잎 그리고 순비기나무(V&ex mtwidifolid)^ 줄기가 각각 70.0%, 66.0%, 55.1%의 활성을 보였으며 개망초annuus) 지상부가 23.1%, 도꼬마리 (Xanthium chinensis) 뿌리는 7.9%의 활성을 보였다. 그리고 DPPH 전자 공여능과 superoxide anion radical 두 가지 모두 활성을 나타낸 것은 괴화(Scp/zcwa japonica, 줄기부), 박하 (Mentha arvensis, 지상부), 비파엽(Eriobotrya japonica, 지상부), 소엽 (Perilla frutescens, 줄기부), 초과(Amomum costatum, 지상부), 희 수 (Camptotheca acuminata Dence, 지 상부), 애 엽(Artemisia asiatica, 줄기부), 창질경이 (Plantago lanceolata, 지상부), 짚신나물 (Agrinionia pilosa, 잎), 순비기나무 (Vitex rotundifolia, 줄기부), 개망초(Ezigem/t annuus, 지상부), 도꼬마 (Xanthium chinensis, 뿌리)였다.
- 3%) 보다는 높게 나타났다. 그리고 희수(Camptotheca acuminata Dence) 의지상부는 50.9%의 높은 활성을 보였으며 또한 박하(Mentha arvensis: 지상부), 비파엽 (Eriobotrya japonica: 지상부), 소엽 (Perilla frutescens: 줄기 부), (Artemisia asiatica: 줄기 부), 초과(Amomumcostatum: 지상부) 및 살구나무(Psws ansu) 잎과 산비장이 (Serranula koreand) 잎이 30% 이상의 활성을 나타내었고, 만병 초(Rhododendron fciwiei)잎과 개망초(ErZgenm annuus) 지상부 추출물이 20%이상의 활성을 보였다. 그 외에 가시오갈피 (Eleutherococcus senticosus: 가지), 개오동 (CataIpa ovata) 지상부, 꽈리(Physalis franchetii) 잎, 목향(Inula heleniuni) 잎, 순비기나무(Vitex rotundifolia)의 잎 주줄물 등에서 10%이상의 활성을 나타내었다.
- 보인 것도 극히 소수에 불과 했다. 박하(Mentha arvensis, 지상부), 비파엽 japonica, 지상부), 초과costatum, 지상부)가 각각 87.7%, 84.9%, 그리고 82.9%의 높은 활성을 보였고 애엽(Artemisia asiatica, 줄기부)과 괴화(Sophora japonica, 줄기부)는 70.0%정도의 활성을 나타내었다. 그리고 약용식 물은 희수(Camptotheca acuminata Dence)의 지상부가 82.
- 시판 상용 항산화제를 비롯하여 약용식물 추출물의 superoxide anion radical 소거능을 측정한 결과(Table 1) 어떤 상용 항산화제에서도 활성이 나타나지 않았으며 식물 추출물에서도 항산화능을 보인 것도 극히 소수에 불과 했다. 박하(Mentha arvensis, 지상부), 비파엽 japonica, 지상부), 초과costatum, 지상부)가 각각 87.
후속연구
- a 식물로부터 유래된 phenol 물질의 항산화제는 일부가 금속 복합체를 형성하는 작용(sencondary activity)을 하나, 주요 기능은 이들의 primary antioxidant activity(free radical scavenger)에 있다. 따라서 식물추출물로부터 radical 소거 기능을 탐색함으로써 천연 항산화제를 개발 할 수 있을 것이다. 그동안 DPPH radical 소거 기능을 갖는 식물유래 항산화제에 대한 연구는 많이 이루어 졌지만 superoxide anion radical 소거능에 대한 항산화 연구는 미미한 편이었다.
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