음양곽의 항산화 효과를 규명하기 위하여 흰쥐(Sprague-Dawley계)를 사용하여 음양곽 추출물을 2주간 복강내로 투여하고 $CCl_4$에 의한 간독성 경감기전을 혈액 및 간 조직에서의 효소 변동과 간 조직을 병리학적으로 관찰하였다. $CCl_4$의 투여로 AST, ALT, MDA가 증가하였으나 음양곽을 전처리하고 $CCl_4$를 후 투여한 경우에는 AST, ALT, MDA가 감소하였다. $CCl_4$의 투여로 SOD, catalase, GPx가 감소하였으나 음양 곽 전처리 한 후 $CCl_4$를 투여 한 경우에는 SOD, catalase, GPx가 증가하였다. 음양곽은 $CCl_4$로 유도된 free radicals를 scavenging함으로써 간독성을 경감시키는 것으로 사료된다. 위의 생리활성과 항산화계 변화 지표에서 나타난 음양곽의 간기능 보호효과를 형태학적으로 확인하기 위한 조직병리학적 검사결과 음양곽이 세포막의 소기관들을 과산화로부터 보호함으로써 효소활성의 최적구조를 유지시켜 간 손상을 완화시키는 것으로 사료된다.
음양곽의 항산화 효과를 규명하기 위하여 흰쥐(Sprague-Dawley계)를 사용하여 음양곽 추출물을 2주간 복강내로 투여하고 $CCl_4$에 의한 간독성 경감기전을 혈액 및 간 조직에서의 효소 변동과 간 조직을 병리학적으로 관찰하였다. $CCl_4$의 투여로 AST, ALT, MDA가 증가하였으나 음양곽을 전처리하고 $CCl_4$를 후 투여한 경우에는 AST, ALT, MDA가 감소하였다. $CCl_4$의 투여로 SOD, catalase, GPx가 감소하였으나 음양 곽 전처리 한 후 $CCl_4$를 투여 한 경우에는 SOD, catalase, GPx가 증가하였다. 음양곽은 $CCl_4$로 유도된 free radicals를 scavenging함으로써 간독성을 경감시키는 것으로 사료된다. 위의 생리활성과 항산화계 변화 지표에서 나타난 음양곽의 간기능 보호효과를 형태학적으로 확인하기 위한 조직병리학적 검사결과 음양곽이 세포막의 소기관들을 과산화로부터 보호함으로써 효소활성의 최적구조를 유지시켜 간 손상을 완화시키는 것으로 사료된다.
In this study, the effect of Epimedii Herba (EH) on the antioxidative enzymatic activity was investigated. EH (100mg/kg) was intraperitoneally administered into rats for 2 weeks. On the last day, carbon tetrachloride $(50\%\;CCl_4,\;3.3ml/kg,\;i.p.)$ dissolved in olive oil was injected be...
In this study, the effect of Epimedii Herba (EH) on the antioxidative enzymatic activity was investigated. EH (100mg/kg) was intraperitoneally administered into rats for 2 weeks. On the last day, carbon tetrachloride $(50\%\;CCl_4,\;3.3ml/kg,\;i.p.)$ dissolved in olive oil was injected before 12 hours. EH-pread-ministered and $CCl_4-treated$ (EC) group showed higher inhibitory effect in aminotransferase (AST, ALT) activity compared to $CCl_4-treated (CT)$ group. Superoxide dismutase (SOD) and Catalase in EC group were increased compared to those of CT group. The activity of glutathione peroxidase (GPx) was significantly higher than those of CT group compared to EC group. These results suggest that EH has a hepatoprotective effect through scavenging the free radicals induced by $CCl_4$.
In this study, the effect of Epimedii Herba (EH) on the antioxidative enzymatic activity was investigated. EH (100mg/kg) was intraperitoneally administered into rats for 2 weeks. On the last day, carbon tetrachloride $(50\%\;CCl_4,\;3.3ml/kg,\;i.p.)$ dissolved in olive oil was injected before 12 hours. EH-pread-ministered and $CCl_4-treated$ (EC) group showed higher inhibitory effect in aminotransferase (AST, ALT) activity compared to $CCl_4-treated (CT)$ group. Superoxide dismutase (SOD) and Catalase in EC group were increased compared to those of CT group. The activity of glutathione peroxidase (GPx) was significantly higher than those of CT group compared to EC group. These results suggest that EH has a hepatoprotective effect through scavenging the free radicals induced by $CCl_4$.
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문제 정의
본 연구에서는 실험동물에 음양곽을 투여한 후 CC14로 처리했을 때, 혈액 및 간 조직 중에서의 효소 활성에 미치는 영향과 병리 조직학적 검사를 병행하여 CC14 투여로 유도되는 독성의 억제 효과에 대하여 관찰하였다.
제안 방법
Aebi의 방법 [1]을 이용하여 phosphate buffer (0.05 M pH 7.0) 1.9 ml에 sample (homogenate와 mitochondrial fraction을 800 xg에서 20 min 원심분리한 상등액 100 μl를 buffer로 10, 20, 40, 80배 희석) 0.1 ml 와 과산화수소 용액 1 ml를 혼합하여 240 nm에서 90 sec 동안 흡광도 감소를 측정하였다.
CT 군과 EC 군에서 실험동물의 간 손상의 유도를 위해 사 염화 탄소를 olive oil에 1:1 비율로 용해시켜 체중 1 k 응당 3.3 ml의 용량을 희생하기 24시간 전에 하루 2번 복강 내로 투여 하여 각각 간 독성을 유발시켰다. 10시간 절식 후 혈액과 간을 채취하여 실험에 임하였다.
실험동물은 체중 150 g 내외의 암컷 흰쥐(Sprague-Dawley 계)를 대구 효창 사이언스로부터 제공받았고 7일 동안 적응시켰다. 실험동물은 cage에 각각 분리시키고 고형사료와 물을 자유롭게 섭취하도록 했다. 실험동 안 동물들은 22±의 온도와 60±5℃ 상대습도로 유지시켰다.
음양곽의 항산화 효과를 규명하기 위하여 흰쥐(Sprague- Dawley 계)를 사용하여 음양곽 추출물을 2주간 복강내로 투여하고 CClt에 의한 간 독성 경감기전을 혈액 및 간 조직에서의 효소변동과 간 조직을 병리학적으로 관찰하였다. CQ의 투여로 AST, ALT, MDA가 증가하였으나 음양곽을 전처리하고 CCk를 후투여한 경우에는 AST, ALT, MDA가 감소하였다.
100% xylene 처리 후, paraffin으로 포매하여 mi- crotome을 이용하여 5 ling] 조직 절편을 제작하였다. 이 절편을 hematoxylin-eosin (H&E)으로 염색한 후, 광학현미경으로 관찰하였다.
혈청 중의 aspartate aminotransferase (AST) 와 alanine aminotransferase (ALT) 의 활성은 Fuji Dri-Chem Qinical Chemistry Analyzer (Fuji Dri-Chem 3500, Fujifilm, Japan)로 측정하였다.
대상 데이터
시판(부전시장 약재상)되고 있는 음양곽 건초를 10배의 증류수로 열수 추출하여 감압 농축기로 농축한 후 동결 건조하여 사용하였다.
실험동물은 체중 150 g 내외의 암컷 흰쥐(Sprague-Dawley 계)를 대구 효창 사이언스로부터 제공받았고 7일 동안 적응시켰다. 실험동물은 cage에 각각 분리시키고 고형사료와 물을 자유롭게 섭취하도록 했다.
데이터처리
본 실험에 대한 모든 실험 결과는 평균치와 표준편차로 나타내었고, 통계적 유의성은 Student's f-test를 이용하여 검정하였다.
이론/모형
Lawrence 등의 방법 [15] 에 준하여 0.1 M phosphate buffer (4 mM EDTA) 400 μl, 0.01 M NaN3 70 0.01 M GSH 70μl, 1.5 mM NADPH 70 μl H2O 360 μl GSSG-reductase (1.8 U/ml) 20 pl, sample 10 μl를 혼합하여 상온에서 1분간 방치한 후 5 mM H2O2 100 μl를 가해 잘 섞은 후 340 nm에서 90 sec 동안 흡광도 감소 측정을 하였다.
단백질의 정량은 Lowry 등의 방법[17]에 의해서 750 nm에서 홉 광도를 측정하고 표준 단백 시료를 Bovine Serum Albumin (BSA) 으로 정량하였다.
성능/효과
CC11 로 간 손상이 초래된 CC14 투여군은 지질과산화물인 MDA 량이 정상군보다 간의 총 균질화는 약 3배, 미토콘드리아 분획은 약 4배 증가하는 경향을 나타내었다. 음양곽만을 투여한 군은 간의 총 균질화와 미토콘드리아 분획에서 정상군과 유사하였다.
간 조직 중의 SOD의 활성 변화를 관찰한 결과는 Table 4와 같다. 간 조직에서의 SOD 활성 정도는 CCU 투여군의 효 소활성이 정상군에 비해서 간의 총 균질화와 미토콘드리아 분획에서 각각 2배 정도로 낮게 나타났다. 음양곽만 투여한 군의 SOD 활성은 정상군보다 각각 1.
1 배(미토콘드리아 분획) 높게 나타나는 경향을 보였다. 또한, 음양곽과 CCk를 투여한 군에서의 SOD 활성 수치는 CC14 투여군보다 각각 44.07%(간의 총 균질화), 38.52%(미토콘드리아 분획) 높게 나타났다.
본 실험에서 AST 활성의 경우, 정상군에 비해 CCk투여 군에서 CCk의 간 장애 유발로 인해 효소 활성이 약 7배 증가하여 Takaharu와 Kiyonori의 보괴24] 와 일치하였으며, 음양곽과 CCk투여 군에서는 54.28% 감소하여 음양곽의 활성 감소 효과를 확인할 수 있었다.
음양곽은 CCU로 유도된 free radicals를 scavenging함으로써 간 독성을 경감시키는 것으로 사료된다. 위의 생리활성과 항산화 계 변화 지표에서 나타난 음양곽의 간 기능 보호 효과를 형태학적으로 확인하기 위한 조직병리학적 검사 결과 음양곽이 세포막의 소기관들을 과산화로부터 보호함으로써 효소 활성의 최적 구조를 유지시켜 간 손상을 완화시키는 것으로 사료된다.
에서 보면 CCI4 투여군에서의 catalase 활성 치는 정상군과 비교했을 때 약 3배(간의 총 균질화), 약 2배(미토콘드리아 분획) 감소를 보였다. 음양곽과 CC14를 투여군에서의 catalase 활성은 CCU 투여군에서보다 각각 61.19%(간의 총 균질화), 36.88%(미토콘드리아 분획) 높게 나타났다.
음양곽과 CCL를 투여한 군의 MDA 함량은 간의 총 균질화에서는 64.02%, 미토콘드리아 분획에서는 67.50%의 억제 효과를 나타내어 정상군 수준으로 회복됨을 나타내었다.
간 조직에서의 SOD 활성 정도는 CCU 투여군의 효 소활성이 정상군에 비해서 간의 총 균질화와 미토콘드리아 분획에서 각각 2배 정도로 낮게 나타났다. 음양곽만 투여한 군의 SOD 활성은 정상군보다 각각 1.2배(간의 총 균질화), 약 1.1 배(미토콘드리아 분획) 높게 나타나는 경향을 보였다. 또한, 음양곽과 CCk를 투여한 군에서의 SOD 활성 수치는 CC14 투여군보다 각각 44.
이에 비해 음양곽과 CCk를 투여한 군에서는 centrilobular congestion과 hepatocytic degeneration0] 완화되어 간세포 변성면적이 작아짐으로써 지방과립과 염증세포 침윤이 국소적으로 중심 정맥 주변으로 분포하여(Fig. 1-D) CCI4 투여군 보다 상당히 개선되었음을 보여 주었다. 이러한 조직병리학적 소견에 있어서의 경향은 항산화계의 효소 활성의 변동을 뒷받침하는 것으로 사료되며 앞으로 더욱 많은 연구가 이루어져야 할 것으로 생각된다.
후속연구
1-D) CCI4 투여군 보다 상당히 개선되었음을 보여 주었다. 이러한 조직병리학적 소견에 있어서의 경향은 항산화계의 효소 활성의 변동을 뒷받침하는 것으로 사료되며 앞으로 더욱 많은 연구가 이루어져야 할 것으로 생각된다.
참고문헌 (27)
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