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설치류에서 Ginsenoside Rgl의 항스트레스 활성
Anti-stress Activities of Ginsenoside Rgl in Rodents 원문보기

약학회지 = Yakhak hoeji, v.51 no.3, 2007년, pp.219 - 227  

최종현 (삼육대학교 약학과) ,  허율 ((주)비티진) ,  정재훈 (삼육대학교 의명신경과학연구소)

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Ginsenoside Rgl (Rgl), the pharmacologically active constituent of ginseng (Panax ginseng C.A. Meyer), has a variety of biological activities. The present study was undertaken to evaluate a possibility of Rgl whether it can be used in treatment or prevention of stress disorders. Animals were stresse...

주제어

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제안 방법

  • 즉, 부신은 비대해지고, 부신피질호르몬의 생성과 분비가 증가한다.415) 이러한 변화를 토대로 본 연구에서는 시상하부뇌하수체-부신 축에 대한 작용의 신뢰할 만한 지표인 혈중 corticosterone의 함량을 측정하였다. 그림 6에서 보는 바와 같이 구속 스트레스와 전기충격 스트레스에 노출되면 corticosterone함량C구속-corticosterone 수치로, 전기충격-corticosterone 수치로)이 472.
  • 사육 기간 동안 음식과 물은 자유롭게 먹을 수 있도록 하였으나 스트레스 유도 또는 반응 검색 동안은 물과 사료를 주지 않았다. 동물들은 어떤 스트레스에도 노출시키지 않고 약물도 투여하지 않은 정상군, 생리식염수를 경구투여하고 스트레스에 노출시킨음성대조군, 홍삼 200㎎/㎏을 경구투여하고 스트레스에 노출시킨 양성대조군 및 Rgl 5㎎/㎏ 또는 10㎎/㎏ 피하 내 투여하고 스트레스에 노출시킨 Rgl 처치군으로 구분하였고, 동물들에게 홍삼과 Rgl을 5일간 전처치한 후, 5일간 경구 투여 및 피하내 투여와 함께 스트레스를 부과한 후 스트레스 정도를 검색하였다. 약물의 전 처치는 오전 10시에서 12시 사이에 실시하였고, 스트레스 부과와 반응 검색은 오전 10시에서 오후 3시 사이에 실시하였다.
  • 전체 기구는 바닥에서 50cm 높이에 설치되었다. 동물에게 최종 스트레스를 부과하고 10분 후에 동물을 중심 정사각형 공간에 두고, 10분 동안 자유롭게 움직이도록 놓아둔 후 열린 공간과 닫힌 공간에 동물이 머무는 시간을 측정하였다.29)
  • 마지막 스트레스를 부과한 후, 각각의 투명플라스틱 관찰 상자(40X20X18 cm, 모서리는 직각, 높이 30 cm)에서 동물들의 특이적인 스트레스 관련 운동활성을 측정하였다. 즉, smelling(킁킁거림), burrowing(앞발로 굴을 파는 행동), heezing(호흡외 움직임이 없는 상태), face washing(앞발로 두부의 전면을 만지는 행동), grooming(입으로 몸 단장을 하는 행동) 및 rearing(앞발과 고개를 드는 행동)시간을 5분 동안 측정하였다.
  • 생쥐에게 시험물질을 5일 동안 경구 투여한 후 6~8℃의 냉 욕 풀에서 지칠 때까지의 수영시간을 측정하였고, 평형줄(직경 4 mm, 길이 150 cm, 높이 80 cm)에서 떨어질 때까지 머무는 시간을 측정하였으며, 생쥐가 직경 3.5cm, 60rpm 속도의 회전판 (UGO BASILE, Italy)에서 떨어질 때까지 견디는 시간을 측정하였다.
  • 동물들은 어떤 스트레스에도 노출시키지 않고 약물도 투여하지 않은 정상군, 생리식염수를 경구투여하고 스트레스에 노출시킨음성대조군, 홍삼 200㎎/㎏을 경구투여하고 스트레스에 노출시킨 양성대조군 및 Rgl 5㎎/㎏ 또는 10㎎/㎏ 피하 내 투여하고 스트레스에 노출시킨 Rgl 처치군으로 구분하였고, 동물들에게 홍삼과 Rgl을 5일간 전처치한 후, 5일간 경구 투여 및 피하내 투여와 함께 스트레스를 부과한 후 스트레스 정도를 검색하였다. 약물의 전 처치는 오전 10시에서 12시 사이에 실시하였고, 스트레스 부과와 반응 검색은 오전 10시에서 오후 3시 사이에 실시하였다.
  • 전통적으로 인삼의 경우 스트레스의 예방과 완화 활성이 있는 것으로 알려지고 있으나 어떤 기준으로 인삼 제품의 항스트레스 효능을 인정할 것인지에 대해서는 논란이 많다. 이에 본 연구팀은 이전 연구를 통해서 스트레스 수준의 평가를 위해 실험동물에서 스트레스를 유발하고 이를 판정할 수 있는 기준들과 방법들을 설정하고 체계화하였다.Mr)
  • u, Netherlandse)을 사용하여 검색되었다. 일반운동 활성은 검정 상자(47X47X42 cm) 내에서 20분간 총 이동거리와 운동 시간을 기준으로 측정하였다.
  • 스트레스 관련 운동활성을 측정하였다. 즉, smelling(킁킁거림), burrowing(앞발로 굴을 파는 행동), heezing(호흡외 움직임이 없는 상태), face washing(앞발로 두부의 전면을 만지는 행동), grooming(입으로 몸 단장을 하는 행동) 및 rearing(앞발과 고개를 드는 행동)시간을 5분 동안 측정하였다.
  • 최종 스트레스를 부과하고 30분 후에 심장에서 직접 혈액을 채취하고, 부신을 적출하여 무게를 측정하였다. 혈액 중 corticosterone 함량은 SI-2 3004 columr과 UV-Visible detector 를 人용하여 HPLC(Shiseido, Tokyo, Japan)로 240 nm에서의 흡광도로 측정하였다.
  • 최종 스트레스를 부과한 후 동물의 행동변화는 비디오 모니터-컴퓨터 시스템으로 체계화된 Ethovision 시스템 (Noldus IT b.u, Netherlandse)을 사용하여 검색되었다. 일반운동 활성은 검정 상자(47X47X42 cm) 내에서 20분간 총 이동거리와 운동 시간을 기준으로 측정하였다.
  • 부신을 적출하여 무게를 측정하였다. 혈액 중 corticosterone 함량은 SI-2 3004 columr과 UV-Visible detector 를 人용하여 HPLC(Shiseido, Tokyo, Japan)로 240 nm에서의 흡광도로 측정하였다.險)Dexamethasone(Sigma, St, Louis, MO, USA.
  • 노출시켰다. 흰쥐 및 생쥐를 환기가 잘 되는 원추형의 플라스틱 튜브(흰쥐■직경 6.2 cm, 길이 16.5 cm, 생쥐■직경 3 cm, 길이 7 cm)에 매일 2시간간 구속시키거나 1mA 강도, 20초 간격으로 1초간씩 20분간 전기 충격을 가함으로 스트레스를 부과하였다. 16, 17) 스트레스를 부과하는 동안에는 어떠한 음식과 물도 허용하지 않았다.

대상 데이터

  • Rgle 주식회사 비티진(충남 금산군)에서 공급받아 사용하였다. 양성대조군에 투여된 홍삼농축액은 시중에서 판매되는 정관장 홍삼정(한국인삼공사)을 사용하였다.
  • 혈액 중 corticosterone 함량은 SI-2 3004 columr과 UV-Visible detector 를 人용하여 HPLC(Shiseido, Tokyo, Japan)로 240 nm에서의 흡광도로 측정하였다.險)Dexamethasone(Sigma, St, Louis, MO, USA.)을 내부 표준물질로 사용하였고, 에세토니트릴 : 메탄올 : 0.1% 황산용액(32 :4: 64)을 이동상으로 사용하였다.
  • 성숙한 웅성 Sprague Dawley 흰쥐 (SD Rat-12주령)와 웅성 ICR 생쥐(25±5g)를 한림실험동물주식회사(화성, 한국)에서 구입하여 1주일간 안정화시킨 후에 시험 목적에 맞게 분류하여 스트레스가 없는 사육조건 즉, 항온(22±3℃), 항습(55±5%), 조명 (200-300LUX 12시간/1일), 소음(40dB 이하), 적정한 식이와 음수 조건 및 기타 스트레스 자극이 없는 환경에서 사육한 후 또는 사육하면서 연구를 진행하였다. 일반 운동 활성 , 육체적 스트레스 저항력을 살펴보기 위하여 생쥐를 사용하였고, Elevated plus-maze 시험, 스트레스 관련 특이적인 행동 활성, 부신의 무게 및 혈중 코르티코스테론 함량 측정에 흰쥐를 사용하였다.
  • 양성대조군에 투여된 홍삼농축액은 시중에서 판매되는 정관장 홍삼정(한국인삼공사)을 사용하였다. 기타 실험에 필요 되는 시약은 국내에서 구입 가능한 일급 또는 특급시약을 사용하였다.
  • 사육하면서 연구를 진행하였다. 일반 운동 활성 , 육체적 스트레스 저항력을 살펴보기 위하여 생쥐를 사용하였고, Elevated plus-maze 시험, 스트레스 관련 특이적인 행동 활성, 부신의 무게 및 혈중 코르티코스테론 함량 측정에 흰쥐를 사용하였다. 사육 기간 동안 음식과 물은 자유롭게 먹을 수 있도록 하였으나 스트레스 유도 또는 반응 검색 동안은 물과 사료를 주지 않았다.

데이터처리

  • EM.으로 나타냈고, ANOVA와 Newman-keuls test(post-hoc test)를 사용하여 유의성을 검정흐]" 였다. P값이 0.
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