[논문]식육 중 항생제 florfenicol의 분석

국주희; 송영미; 배민석; 고명진; 유명상; 안은숙; 박은희; 조명식; 강길진

식육 중 항생제 florfenicol의 분석
Analysis of Florfenicol in Meats 원문보기

한국식품위생안전성학회지 = Journal of food hygiene and safety, v.23 no.4, 2008년, pp.319 - 323

국주희 (광주지방식품의약품안전청) , 송영미 (경인지방식품의약품안전청) , 배민석 (광주지방식품의약품안전청) , 고명진 (광주지방식품의약품안전청) , 유명상 (광주지방식품의약품안전청) , 안은숙 (광주지방식품의약품안전청) , 박은희 (광주지방식품의약품안전청) , 조명식 (광주지방식품의약품안전청) , 강길진 (식품의약품안전청 영양기능식품국)

초록
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식육 중 플로르페니콜을 분석하기 위하여 시료를 ethyl acetate로 추출 농축한 후 이 농축액을 acetonitrile과 n-hexane을 가하여 분획하고, acetonitrile층을 분리하여 농축하였다. 이를 Oasis HLB cartridge로 정제하고 $C_{18}$ 컬럼을 이용한 HPLC-FLD로 분석하였다. 분석법은 표준물질 $0.05{\sim}1.0\;mg/kg$의 농도범위에서 직선성($r^2=0.9997$)을 나타냈으며, 검출한계는 0.012 mg/kg, 정량한계는 0.039 mg/kg이었다. 또한 회수율은 쇠고기에서 $87.6{\sim}92.3%$, 돼지고기에서 $85.6{\sim}93.3%$, 닭고기에서 $92.9{\sim}95.6%$이었으며, 상대표준편차(RSD)는 쇠고기, 돼지고기, 닭고기에서 각각 $1.1{\sim}4.8%$, $1.1{\sim}3.4%$, $1.0{\sim}5.3%$이었다. 본 연구에서 확립된 분석방법으로 유통 중인 식육(쇠고기, 돼지고기, 닭고기) 150건을 전국 지역(서울, 부산, 대구, 대전, 광주)별로 수거하여 플로르페니콜의 잔류 실태를 조사한 결과, 돼지고기 1건에서 0.040 mg/kg이 검출되었으며, 돼지고기 2건, 쇠고기 1건, 닭고기 2건에서는 검출되었으나 정량한계 미만의 수준이었다. 이들 결과로부터 우리나라에서 유통 중인 조사한 식육 150건의 플로르페니콜 잔류량은 모두 국제기준에 적합한 것으로 조사되었다.

Abstract ▼ AI-Helper

Analytical method for determination of florfenicol was developed for estimate veterinary drug residue of unestablished MRLs in meat. The method was validated in correspondence with the CODEX guideline for florfenicol residue in meat. The samples mixed with sodium sulfate were extracted with ethyl acetate. After clean-up, the residue was dissolved in mobile phase and analyzed using high-performance liquid chromatography with fluorescence detector. The calibration curve showed good linearity($r^2=0.9997$) within the concentration range of $0.05{\sim}1.0\;mg/kg$. The limit of detection(LOD) and limit of quantification(LOQ) were validated at 0.012 and 0.039 mg/kg, respectively. The recoveries in fortified meat ranged from 85.6 to 95.6%($1.1{\sim}5.3%$ RSD) at the 0.05 to 0.4 spiking levels. We monitored 150 samples of meats that were purchased in Korea(Seoul, Busan, Daegu, Daejeon and Gwangju). Among tested samples, florfenicol was detected in 1 of pig at the level of 0.040 mg/kg, and below LOQ in 1 of cattle, 2 of pig and 2 of chicken. The residues of florfenicol in the tested samples were within the MRLs.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

이에 본 연구에서는 우리나라에서 사용이 허용되어 있으나 아직까지 잔류허용기준이 설정되어 있지 않은 동물용 의약품 중 플로르페니콜에 대한 선형성, 회수율, 검출한계, 정량한계 등 유효성 평가를 통하여 식육 중 잔류 플로르페니콜 함량을 측정하기 위한 정량실험법을 확립하고, 최적화한 분석방법으로 시중에 유통되는 식육 150건을 전국 5개 지역별로 수거하여 플로르페니콜을 대상으로 잔류실태를 조사하였기에 이를 보고하고자 한다.

제안 방법

분석방법에 따른 회수율 측정을 위하여 플로르페니콜이함유되어 있지 않은 쇠고기, 돼지고기에 각 표준용액을0.1, 0.2, 0.4㎎/㎏, 닭고기에 0.05, 0.1, 0.2㎎/㎏이 되도록 첨가하여 본 실험방법에 따라 6회 반복 실험하여 구하였다.
식육 중 플로르페니콜 잔류량을 모니터링하기 위하여 상기의 최적화한 분석방법을 식육에 적용하여 플로르페니콜잔류량을 조사하였다. 시중에 유통되는 식육 150건을 전국 5개 지역별로 수거하여 잔류량을 조사한 결과, 돼지고기 1건에서 0.
얻어진 크로마토그램의 signal과 noise 비율(S/N ratio) 3 에 해당하는 피크 면적으로부터 계산된 플로르 페니 콜의 농도를 기기적인 검출한계로 하였으며, 또한 signal과 noise 비율 10배에 해당하는 농도를 정량한계로 하였다.
플로르페니콜 표준품 100 mg을 정밀히 달아 100 mL 용량 플라스크에 취하고 acetonitrile 10mL를 가하여 잘 녹인 다음 acetonitrile로 표시선까지 채워 잘 혼합한 용액을 표준원액으로 사용하였으며 , 표준원액을 이동상으로 희석 하여 각 농도(0.05, 0.1, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0mg/L)의 표준용액을 조제하였다.

대상 데이터

표준용액의 조제 및 시료의 추출용매(ethyl acetate, acetonitrile, -hexane)는 Merck사(Darmstadt, Germany)의 HPLC급을 사용하였고, sodium sulfate는 Merck 사의 특급시 약을 사용하였다. Oasis HLB cartridge(200 mg) 는 Waters사(Milford, MA) 제품을 사용하였다 고속액체크로마토그래피 (HPLC), 형광검출기 (Fluorescence detector)는 Nanospace SI-2(Shiseido Fine Chemicals, Yo-kohama,Japan)를 사용하였으며, 분석조건을 Table 1에 나타내었다.
플로르페니콜 표준품은 Sigma사(St. Louis, MO, USA)제품을 사용하였다. 표준용액의 조제 및 시료의 추출용매(ethyl acetate, acetonitrile, -hexane)는 Merck사(Darmstadt, Germany)의 HPLC급을 사용하였고, sodium sulfate는 Merck 사의 특급시 약을 사용하였다.

이론/모형

1 ㎎/㎏ 이상의 범위에서 회수율 허용범위는 80-110%, 상대표준편차 허용범위는 15%미만이다'3). 따라서 본 시험법은 CODEX 규정에 부합하였다.

성능/효과

검량선 작성을 위한 표준물질 농도범위는 CODEX 및 EU의 쇠고기, 돼지고기 및 닭고기의 플로르페니콜의 잔류허용기준을 고려하여 표준물질 농도범위(0.05, 0.1, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0 ㎎/㎏)에서 3회 반복하여 분석한 결과 상관계수(Correlation coefficient) r2는 0.9997로 CODEX에서 권장하는 rdO.95와 비교했을 때 높은 수준으로 매우 양호한 직선성을 나타내었다(Fig. 4).
040 ㎎/㎏이 검출되었으며, 돼지고기 2건, 쇠고기 1건, 닭고기 2건에서는 검출되었으나 정량한계 미만의 수준이었다(Table 4). 소 근육, 돼지 근육, 닭 근육에서 플로르페 니콜의 잔류허용기준이 EU 0.1~0.3 ㎎/㎏(소, 돼지, 가금류 근육), 미국 0.3 ㎎/㎏(소 근육), 일본 0.1-0.2 mg/ kg(소, 돼지, 닭 근육)임을 고려할 때 우리나라에서 유통중인 식육은 국제기준에 적합하여 안전한 것으로 조사되었다.
조사하였다. 시중에 유통되는 식육 150건을 전국 5개 지역별로 수거하여 잔류량을 조사한 결과, 돼지고기 1건에서 0.040 ㎎/㎏이 검출되었으며, 돼지고기 2건, 쇠고기 1건, 닭고기 2건에서는 검출되었으나 정량한계 미만의 수준이었다(Table 4). 소 근육, 돼지 근육, 닭 근육에서 플로르페 니콜의 잔류허용기준이 EU 0.
0mg/L이 되도록 표준용액을 첨가하고, ethyl acetate로 추출 농축한 후 acetonitrile과 hexane으로 분리하여 acetonitrile 층을 농축하였다. 이를 Oasis HLB cartridge로 정제하고 C₁₈ column 을 이용한 HPLC로 분석한 결과, 표준물질 플로르 페니 콜은 머무름시간 9.4분대에서 검출되었으며, 플로르 페니 콜을 첨가하지 않은 blank 시료에서는 이 시간대에 아무런 피크도 나타내지 않아 방해피크가 없음을 확인하였다. 이에 대한 HPLC 크로마토그램은 Fig.
이상의 확립된 시험법은 HPLC 크로마토그램상의 머무름 시간, 직선성 (F), 검출한계, 정량한계, 회수율의 결과로 볼 때 CODEX 시험법 validation 기준에 모두 적합하여 그 유효성이 인정되었다(Table 4).
039 ㎎/㎏이었다. 플로르페니콜의 잔류허용기준을 고려할 때 유효한 수준이었다. 플로르 페니 콜의 잔류허 용기준은 미국의 경우 0.

후속연구

있지 않다. 동물용의약품의 안전관리를 위해서는 잔류허용기준을 설정하여 규제할 필요가 있으며, 이를 위해서는 죽, 수산물 중에 잔류하고 있는 항생제를 정확하고 신속하게 분석하기 위한 유효성이 검증된 시험법이 요구된다.

참고문헌 (13)

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상세보기
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CODEX guidelines for the establishment of a regulatory program for control of veterinary drug residues in foods (CAC/ GL16-1993)

저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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