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제안 방법
- Caffeic acid(Sigma Co., St. Louis, MO, USA)를 0～100 μg/mL의 농도로 제조하여 시료와 동일한 방법으로 분석하여 얻은 표준검량선으로부터 시료 추출물의 총 페놀 함량을 산출하였다.
- Quercetin(Sigma Co.)를 표준물질로 하여 0～100 μg/ mL의 농도 범위에서 얻어진 표준검량선으로부터 추출물의 총 플라보노이드 함량을 계산하였다.
- 또한, 균사체를 이용한 수삼 고체발효물의 화학적 조성 및항산화효과의 변화에서도 수삼보다는 고체발효물이 페놀함량 및 electron donating abilities(EDA), SOD유사활성, 지질 과산화에 효과가 있어, 수삼 고체발효물이 단순한 수삼보다 건강 기능 유효성분이 더 많이 함유되어져 있다고 보고하였다(14). 따라서 본 실험에서는 등급 외 더덕을 이용하여 발효 더덕을 제조한 후 추출물의 항산화활성을 측정하여 발효에 따른 항산화활성의 증가효과를 확인하였다.
- 발효더덕의 기능성식품 및 화장품 소재로서의 이용 가능성을 조사하기 위해 발효더덕의 열수 추출물의 총 페놀 함량, 총 플라보노이드 함량, 전자공여능, SOD 유사활성, 아질산염 소거능, 환원력을 측정하였다. 발효더덕 추출물의 총페놀 함량은 2.
- 생더덕 및 발효더덕 추출물의 아질산염 소거능은 반응조건의 pH를 1.2, 3.0, 4.2, 6.0으로 달리하여 각각 측정하였다(Fig. 1). pH 1.
- 2로 조정한 반응용액을 가해 총량을 10 mL로 하였다. 이용액을 37℃에서 1시간 반응시킨 후 각 반응액을 1 mL씩 취하여 2% 초산용액 5 mL, Griess 시약 0.4 mL를 가하여잘 혼합시킨 다음 실온에서 15분간 방치시킨 후 UV-spectrophotometer를 사용하여 520 nm에서 흡광도를 측정하여 잔존하는 아질산염량을 구하였다. 공시험은 Griess 시약 대신 증류수를 0.
- 추출물의 전자공여작용(electron donating abilities, EDA) 은 각각의 추출물에 대한 DPPH(α,α-diphenyl-picrylhydrazyl)의 전자공여효과로 각 시료의 환원력을 측정하였다.
대상 데이터
- 생더덕은 강원도 횡성지역에서 2008년 9월에 채취한 것을 시료로 사용하였다. 구입한 더덕은 선별 후 깨끗이 세정하여 물기를 제거한 후 전보(13)와 동일한 조건으로 발효더덕을 제조 후 세절하여 동결건조기(PVTFA 10AT, Ilsin, Gyeonggi-do, Korea)를 사용하여 동결 건조하였다. 건조된 시료는 마쇄하여 유리병에 넣고 밀봉한 후 냉장고(4℃)에 보존하면서 시료로 사용하였다.
- 생더덕은 강원도 횡성지역에서 2008년 9월에 채취한 것을 시료로 사용하였다. 구입한 더덕은 선별 후 깨끗이 세정하여 물기를 제거한 후 전보(13)와 동일한 조건으로 발효더덕을 제조 후 세절하여 동결건조기(PVTFA 10AT, Ilsin, Gyeonggi-do, Korea)를 사용하여 동결 건조하였다.
- 시료의 열수 추출물은 동결건조 시료 100 g에 증류수 1 L를 가하여 90℃ 수욕상에서 환류냉각 시키면서 5시간씩 2회 반복 추출한 다음 여과한 여액을 회전식진공농축기를 이용하여 농축시킨 후 동결건조기(PVTFA 10AT, Ilsin)를 사용하여 분말 상태로 준비하여 실험에 사용하였으며, 추출 수율은 38.4%였다.
데이터처리
- 실험에서 얻어진 결과는 실험군당 평균 ± 표준편차로 표시하였고, 각 군당 3개의 시료를 사용하여 실험은 3회 반복 시행하였다.
이론/모형
- Oyaizu(20)의 방법에 따라 측정하였으며 시료 1 mL에 pH 6.6의 200 mM 인산 완충액 및 1%의 potassium ferricyanide를 각 1 mL씩 차례로 가하여 교반한 후 50℃의 수욕상에서 20분간 반응시켰다. 여기에 15% TCA(trichloroacetic acid) 용액을 1 mL 가하고 12,000 rpm에서 15분간 원심분리하여 얻은 상징액 1 mL에 증류수 및 ferric chloride 각 1 mL를 가하여 혼합한 후 700 mm에서 흡광도를 측정하였다.
- SOD 유사활성은 Marklund와 Marklund(18)의 방법에 따라 과산화수소(H 2 O 2 )로 전환 반응을 촉매하는 pyrogallol의 생성량을 측정하여 SOD 유사활성으로 나타내었다. 즉, 일정 농도의 시료 0.
- 아질산염 소거작용은 Gray와 Dugan(19)의 방법에 의하여 측정하였다. 즉, 1 mM NaNO 2 용액 1 mL에 일정 농도의 시료 1 mL를 가하고 0.
- 총 페놀 함량은 Folin-Denis법(15)에 따라 추출물 1 mL에 Folin-Ciocalteau 시약 및 10% Na2CO3 용액을 각 1 mL씩 차례로 가한 다음 실온에서 1시간 정치한 후 spectrophotometer(UV 1600 PC, Shimadzu, Tokyo, Japan)를 이용하여 700 nm에서 흡광도를 측정하였다. Caffeic acid(Sigma Co.
- 총 플라보노이드는 Moreno 등(16)의 방법에 따라 추출물 0.5 mL에 10% aluminum nitrate 0.1 mL 및 1 M potassium acetate 0.1 mL, ethanol 4.3 mL를 차례로 가하여 혼합하고 실온에서 40분간 정치한 다음 415 nm에서 흡광도를 측정하였다. Quercetin(Sigma Co.
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