Objectives : Positive effects of Ginseng has great research attentions such as anticancer, anti-diabetic, antiaging, liver, immune function, CNS, etc. In this study, we investigated Hydroponic-cultured Ginseng Folium fermented byBacillus subtilisto establish fermentation conditions for enhancing fun...
Objectives : Positive effects of Ginseng has great research attentions such as anticancer, anti-diabetic, antiaging, liver, immune function, CNS, etc. In this study, we investigated Hydroponic-cultured Ginseng Folium fermented byBacillus subtilisto establish fermentation conditions for enhancing functionality.Methods : Ginseng Folium were cultivated hydroponic-cultured and were extracted with methanol. We inoculateBacillus subtilisfor fermentation by adding to 0%, 3% and 5% sugar respectively and checked antioxidant activities, total phenolic content and total saponin content in 2 days intervals during 11 days. The antioxidant activities were studied by the 1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl(DPPH) radical, 2, 2'-Azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6 sulfonic acid) diammonium salt(ABTS) radical scavenging assay and Reducing power assay. We analyzed the Total phenol content, crude saponin content and ginsenoside content. Moreever, Hepatoprotective effects by Glutamic oxaloacetic transaminase(GOT) and Glutamic pyruvic transaminase(GPT) in Sprague-Dawley rat.Results : The results of DPPH and ABTS were 66.89% and 96.72%, respectively. The reducing power was resulted in optical density of 0.7312 with 3% sugar after 9 days of fermentation. and the concentration at 200 ㎍/㎖. Total phenol content was 36.92㎎/g with 3% sugar after 9 days of fermentation, in which crude saponin content wasn't changed, and ginsenoside content such as Rg3, Re and Rb was increased. Activities of GOT and GPT concentration were decreased in rat.Conclusions : This study suggests that hydroponic-cultured Ginseng Folium fermented byBacillus subtilisin 9 days showed significant efficacy of hepato-protection as well as antioxidant compared to the others. In addition, it shows not only improved value but also utilized hydroponic-cultured Ginseng Folium by fermentation.
Objectives : Positive effects of Ginseng has great research attentions such as anticancer, anti-diabetic, antiaging, liver, immune function, CNS, etc. In this study, we investigated Hydroponic-cultured Ginseng Folium fermented byBacillus subtilisto establish fermentation conditions for enhancing functionality.Methods : Ginseng Folium were cultivated hydroponic-cultured and were extracted with methanol. We inoculateBacillus subtilisfor fermentation by adding to 0%, 3% and 5% sugar respectively and checked antioxidant activities, total phenolic content and total saponin content in 2 days intervals during 11 days. The antioxidant activities were studied by the 1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl(DPPH) radical, 2, 2'-Azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6 sulfonic acid) diammonium salt(ABTS) radical scavenging assay and Reducing power assay. We analyzed the Total phenol content, crude saponin content and ginsenoside content. Moreever, Hepatoprotective effects by Glutamic oxaloacetic transaminase(GOT) and Glutamic pyruvic transaminase(GPT) in Sprague-Dawley rat.Results : The results of DPPH and ABTS were 66.89% and 96.72%, respectively. The reducing power was resulted in optical density of 0.7312 with 3% sugar after 9 days of fermentation. and the concentration at 200 ㎍/㎖. Total phenol content was 36.92㎎/g with 3% sugar after 9 days of fermentation, in which crude saponin content wasn't changed, and ginsenoside content such as Rg3, Re and Rb was increased. Activities of GOT and GPT concentration were decreased in rat.Conclusions : This study suggests that hydroponic-cultured Ginseng Folium fermented byBacillus subtilisin 9 days showed significant efficacy of hepato-protection as well as antioxidant compared to the others. In addition, it shows not only improved value but also utilized hydroponic-cultured Ginseng Folium by fermentation.
* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.
문제 정의
높았던 Bacillus subtilis 균주를 선발하였다. 본 연구에서는 선발된 Bacillus subtilis 의 최적 발효조건을 확립하기 위해 발효 일자 및 당 첨가에 따른 생물학적 유용성을 평가하였다.
본 연구에서는 최근 다양한 식품소재로 이용되고 있는 수경 재배 인삼 잎의 기능성 증진을 위해 발효조건을 확립하고, 생리 활성 물질을 분석하여 수경재배 발효人蔘 잎의 생물학적 유용성을 평가하고자 한다.
제안 방법
3% 당을 첨가하고 9일간 B.subtilis 균주로 발효된 수경재배 人蔘 잎 추출물의 간보호 효과를 검증하기 위하여 혈중 생화학지표 Glutamic oxaloacetic transaminase(GOT), glutamic pyruvic transaminase(GPT)를 분석하였다.
B. subtilis 균주로 발효된 수경재배 人蔘 잎 추출물의 항산화 활성은 DPPH와 ABTS 라디칼 소거능으로 비교 분석하였다. DPPH 라디칼 소거능은 발효 3일 째부터 3% 당 첨가 실험군에서 활성이 높았으며 9일과 11일에서 가장 높은 활성을 보였다.
B.subtilis 균주로 발효된 수경재배 人蔘 잎의 항산화 활성 분석을 위해 DPPH, ABTS 라디칼 소거활성 그리고 환원력을 당 첨가에 따라 비교 분석하여 나타냈다.
B.subtilis 균주로 발효된 수경재배 人蔘 잎의 환원력의 평가는 700nm에서 나타내는 O.D의 값을 비교하였다. 흡광도가 증가하는 것에 따라 환원력이 증가하는 것으로, 발효일수의 경과에 따라 흡광도가 증가하였으며 200 ㎍/㎖의 농도에서 발효 9일 째 3% 당 첨가 조건에서 0.
B.subtilis로 발효된 수경재배 人蔘 잎의 일자별, 당 첨가 조건에 따른 ginsenoside 함량을 분석하기 위해 아래의 8가지의 standard를 이용하여 함량을 분석하였다. Fig.
7이 되게 희석하였다. 각 농도별 추출물 40㎕에 ABTS solution을 760㎕씩 각각 첨가한 후 20분간 37℃에서 반응시킨 후 UV/Visible spectrophotometer(Human Cop, Xma -3000PC)을 이용하여 734nm에서 흡광도를 측정하였다. 시료 처리에 의한 소거활성률은 DMSO 처리 대조구와 비교하여 계산하였고, 추출물의 소거활성은 다음 식으로 %를 구하였다.
0 이 되도록 Ethanol을 이용하여 희석 준비하였다. 각 농도별 추출물 40㎕에 DPPH solution 760㎕를 첨가한 후 20분간 37℃에서 반응시켜 UV/Visible spectrophotometer (Human Cop, Xma-3000PC)을 이용하여 515nm에서 흡광도를 측정하였다. 시료처리에 의한 소거활성률은 DMSO 처리 대조 구와 비교하여 계산하였고, 추출물의 소거활성은 다음 식으로 %를 구하였다.
생체 시료를 세척한 다음 지상부와 지하부를 분리하여 동결건조한 뒤 분석을 위한 시료로 사용하였다. 각 처리별 수경재배 人蔘잎 1g을 100% MeOH 15mL에 침지한 뒤, 초음파를 가하여 추출하여 유효 성분 분석 및 활성측정을 위한 시료로 사용하였다.
실험에 앞서 사료 섭취로 인해 나타날 수 있는 위장관을 통한 알코올의 흡수 방해 현상을 배제하기 위해 18시간 동안 절식시켰으며 이때 물은 제한 없이 공급하였다. 각 처리별 시료는 500㎎/㎏씩 알코올 투여 30후 경구 투여 하였다. 알코올은 40%의 주정을 5㎖/㎏씩 경구투여하였다.
각 처리별 추출물 1㎖를 취하여 증류수 1㎖를 가한 뒤 Sep-Pak으로 전처리하였다. 먼저 Sep-Pak Plus C18 cartridge 에 3㎖의 MeOH로 서서히 용출시켜 conditioning 하고 다시 3㎖의 증류수로 2차 conditioning시켰다.
각 추출물은 메탄올에 10㎎/㎖ 농도로 녹인 시료 1㎖와 Folin시약 1㎖를 혼합하여 실온에서 3분간 정치한 뒤, 10% Na2CO3용액 1㎖l를 혼합한 후 실온에서 1시간 정치한 후 700㎚에서 흡광도를 측정하였다. 총 페놀 화합물의 함량은 gallic acid를 이용하여 검량곡선을 작성하고 gallic acid에 대한 당량으로 환산하였다.
2) 발효 조건
건조된 수경재배 人蔘 잎 분말과 물을 1:2 비율로 잘 배합한 후 당 함량(0%, 3%, 5%)을 달리하여 30℃에서 일자별로 배양하여 기능성 및 성분 분석을 통하여 최적의 발효 조건을 확립하였다.
상등액을 분액 깔대기에 취하여 증류수 30㎖를 첨가하여 혼합 후 6시간 동안 방치하였다. 물층을 제거하고 수포화부탄올층을 8 0℃에서 감압농축하고 에테르 30㎖를 넣고 46℃에서 30분간 가열한 후 건조오븐을 이용하여 105℃에서 20분간 건조한 후방냉하여 무게를 측정하여 조사포닌의 양을 계산하였다.
본 연구는 수경재배 人蔘 잎의 생물학적 이용가치 증진을 위해 Bacillus subtilis 균주를 이용한 발효 수경재배 人蔘 잎으로부터 항산화활성, 총 페놀성 화합물, 조사포닌 함량, 진세노사이드 함량 분석을 통해 최적 발효조건을 확립하여 다음과 같은 결론을 도출하였다.
본 연구에서 최근 다양하게 이용되고 있는 수경재배 人蔘 잎의 산업적 이용가치를 높이기 위해, B. subtilis 균주를 이용하여 다양한 발효조건으로 발효된 수경재배 人蔘 잎으로부터 총 페놀성 화합물, 조사포닌과 진세노사이드 함량, 항산화 활성 비교를 통해 최적의 발효조건을 확립하고, 발효 수경재배 인삼잎의 간 보호 효과 검증을 통해 발효에 의한 수경재배 인삼잎의 생물학적 유용성 증진을 검증하였다.
상기 B.subtilis로 발효된 수경재배 人蔘 잎의 항산화 활성이 대체로 9일 째에 높은 경향치를 보여, 발효 9일째 수경 재배 人蔘 잎으로부터 추출한 시료를 통해당 첨가 조건별 ginsenoside 함량을 분석 비교 하였다(Table 6). B.
수경재배 人蔘을 구매하여 사용하였다. 생체 시료를 세척한 다음 지상부와 지하부를 분리하여 동결건조한 뒤 분석을 위한 시료로 사용하였다. 각 처리별 수경재배 人蔘잎 1g을 100% MeOH 15mL에 침지한 뒤, 초음파를 가하여 추출하여 유효 성분 분석 및 활성측정을 위한 시료로 사용하였다.
각 농도별 추출물 40㎕에 DPPH solution 760㎕를 첨가한 후 20분간 37℃에서 반응시켜 UV/Visible spectrophotometer (Human Cop, Xma-3000PC)을 이용하여 515nm에서 흡광도를 측정하였다. 시료처리에 의한 소거활성률은 DMSO 처리 대조 구와 비교하여 계산하였고, 추출물의 소거활성은 다음 식으로 %를 구하였다.
각 농도별 추출물 40㎕에 DPPH solution 760㎕를 첨가한 후 20분간 37℃에서 반응시켜 UV/Visible spectrophotometer (Human Cop, Xma-3000PC)을 이용하여 515nm에서 흡광도를 측정하였다. 시료처리에 의한 소거활성률은 DMSO 처리 대조 구와 비교하여 계산하였고, 추출물의 소거활성은 다음 식으로 %를 구하였다.
6) 250㎕과 1% Potassium Hexacyanoferrate(Ⅲ) 250㎕을 혼합한 후, 50℃에서 20분간 반응시킨 후 찬물로 냉각한 후, trichloroacetic acid(TCA) 250㎕를 첨가하였다. 위 반응액을 2000g에서 5분간 원심 분리하여 상등액 400㎕ 에 증류수 200㎕와 0.1% ferric chloride 16㎕를 첨가하여 혼합한 후, UV/Visible spectrophotometer(Human Cop, Xma-3000PC)을 이용하여 700nm에서 흡광도를 측정하였다. 흡광도 값이 높을수록 환원력이 강한 것으로 평가된다.
위의 연구를 통해 9일의 발효기간이 최적의 발효 기간으로 설정하여 B.subtilis로 발효된 수경재배 人蔘 잎의 당 첨가조건에 따른 ginsenoside 함량을 HPLC를 이용하여 분석하였다. 분석을 실시한 발효 전 수경재배 人蔘 잎 추출물의 ginsenoside는 Rg 1, Re, Rf, Rb1, Rb2, Rd, F2, Rg3로 이 8가지의 ginsenoside 중 Rd의 함량(3.
알코올은 40%의 주정을 5㎖/㎏씩 경구투여하였다. 채혈은 시료 투여 1시간 후에는 꼬리 정맥 채혈 하였으며 4시간 후에는 diethyl ether 마취하여 복부 정중선을 따라 개복하고 복부 대동맥으로부터 채혈하였다.
92mg/g으로 가장 높은 함량을 보였다. 총 페놀 함량은 농도별로 희석한 Tannic acid의 표준곡선을 통해 함량을 계산하였다.
대상 데이터
동물은 생후 5주 된 체중 150g 내외의 웅성 Sprague-Dawley rat를 대한바이오링크(충북, 음성)로부터 구입하여 동물사육 chamber에서 일정한 조건(온도:22±2℃, 습도:50±5%, 명암:12시간 light/darkcycle)으로 일주일간 적응시킨 후 사용하였으며, 실험군은 3마리씩 정상군(무처리), 대조군(알코올만 처리), 시료 투여군(시료+알코올 처리)으로 나누었다. 실험에 앞서 사료 섭취로 인해 나타날 수 있는 위장관을 통한 알코올의 흡수 방해 현상을 배제하기 위해 18시간 동안 절식시켰으며 이때 물은 제한 없이 공급하였다.
본 연구에 사용된 시료는 (주)수인삼농업회사법인에서 생산한 수경재배 人蔘을 구매하여 사용하였다. 생체 시료를 세척한 다음 지상부와 지하부를 분리하여 동결건조한 뒤 분석을 위한 시료로 사용하였다.
본 연구의 선행연구에 있어 수경재배 인삼잎을 발효하기 위해 4종(Aspergillus oryzae, Lactobacillus plantarum, Bacillus subtilis, Monascus purpureus)의 균주로부터 1차 발효된 발효산물의 항산화 활성과 총페놀함량 분석하여 가장 활성이 높았던 Bacillus subtilis 균주를 선발하였다. 본 연구에서는 선발된 Bacillus subtilis 의 최적 발효조건을 확립하기 위해 발효 일자 및 당 첨가에 따른 생물학적 유용성을 평가하였다.
45㎛ membrane filter로 여과하여 HPLC 분석용 시료로 사용하였다. 실험에 사용된 표준품은 ginsenoside Rg1, Re, Rf, Rb1, RC, Rb2, Rd, F2로 사용하였고, HPLC 분석은 다음과 같은 조건에 의하여 분석하였다.
최적의 발효조건인 B.subtilis 균주로 발효된 3% 당 첨가 및 9일 발효기간으로 설정된 수경재배 人蔘 잎 추출물의 간 손상 보호 효과를 위해 Sprague-Dawley rat을 이용하였다. 발효 전, 후 수경재배 人蔘 잎 추출물의 알코울 섭취에 따른 간 기능 변화를 GOT나 GPT 수준으로 확인한 결과, 물만 처리한 무처리에 비해 알코올만 처리한 대조구의 GOT와 GPT 수준의 변화가 관찰됐다.
데이터처리
모든 실험 결과는 3번 이상 수행하였으며, 통계분석은 각 실험의 평균과 표준편차를 계산하였고, P<0.05 수준에서 Duncan 다중검정법 (duncan's multiple range test)를 이용하여 각 실험의 유의성을 검증하였다.
이론/모형
ABTS 라디칼 소거 활성 능력은 Van den Berg28) 등의 방법을 참고하여 측정하였다. ABTS solutione 7mM 3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid(2, 2'azino-bis)와 2.
DPPH를 이용한 전자 공여능은 Bondet27) 방법을 참고하여 측정하였다. DPPH solutione 300µM 1, 1-diphenyl-2-picryl hydrazyl(DPPH)를 515nm에서 흡광도 값이 1.
Glutamic oxaloacetic transaminase(GOT), glutamicpyruvic transaminase(GPT)의 활성도는 각 기질과 효소반응을 이용한 비색법에 의해 제조된 assay kit(Asan Pharmaceutical, Seoul, Korea)로 측정하였다.
조사포닌 함량은 식품공전에 수록된 홍삼성분분석법에 따라 정량하였다. 수경재배 발효人蔘잎 1g을 수포화부탄올 30㎖에 현탁 하였다.
총 페놀 화합물 함량은 Folin-denis30) 방법으로 비색 정량하였다. 각 추출물은 메탄올에 10㎎/㎖ 농도로 녹인 시료 1㎖와 Folin시약 1㎖를 혼합하여 실온에서 3분간 정치한 뒤, 10% Na2CO3용액 1㎖l를 혼합한 후 실온에서 1시간 정치한 후 700㎚에서 흡광도를 측정하였다.
환원력은 Oyaizu29) 의 방법을 참고하여 측정하였다. 각 농도별 추출액 100㎕에 0.
성능/효과
1. Bacillus subtilis 균주를 통한 발효된 수경재배 人蔘 잎 추출물의 DPPH, ABTS 그리고 환원력은 대체로 9 일의 발효기간과 3% 당 첨가 실험군에서 높은 활성을 보였다.
2. Bacillus subtilis 균주를 통한 발효된 수경재배 人蔘 잎 추출물의 총 페놀성 화합물의 함량은 9일의 발효 기간과 3% 당 첨가 실험군에서 높은 함량으로 분석되었다.
ABTS 라디칼 소거능은 발효 5일째부터 차이를 보였으며 9일에서 가장 높은 활성을 나타냈다. 200㎍/㎖의 농도에서 96.72%의 소거 활성을 보였으며, 발효 전과 비교하여 약 1.07배의 활성 증가를 보였다. 또한 환원력도 매우 높은 활성을 나타내었는데, 발효전 0.
3. Bacillus subtilis 균주를 통한 발효된 수경재배 人蔘 잎 추출물의 조사포닌 함량은 당 첨가와 관계없이 변화를 보이지 않았지만, HPLC를 통한 8종의 ginsenoside 의 분석에서는 당 첨가에 따라 ginsenoside의 함량이 증대되었고, 3% 당 첨가 실험군에서 가장 높은 증대 효과를 보였다.
4. 위의 연구를 통해 선정된 최적의 발효조건인 9일의 발효 기간과 3% 당 첨가를 통한 acillus subtilis 균주를 통한 발효된 수경재배 人蔘 잎 추출물을 이용한 간 손상에 대한 보호효과를 동물실험을 통해 간 손상지표인 GOP, GTP를 관찰한 결과 상당한 효과를 보였다.
ABTS 라디칼 소거활성은(Table 2) 발효 0일에서 90.31% 로 높은 활성을 보였으며, 발효일수가 경과함에 따라 활성이 증가하였다. 발효 9일 째 3% 당 첨가 발효 조건에서 비교적 높은 활성을 보였으며, 200㎍/㎖의 농도에서 96.
B.subtilis 균주로 발효된 수경재배 人蔘 잎 추출물의 조 사포닌 함량은 발효일자가 증가하는 것과 상관없이 변화하지 않았다. 또한 당 첨가 실험군 전체에서 당 첨가 변화와 관계없이 유의적인 변화와 관찰되지 않았다.
. B.subtilis 균주로 발효된 수경재배 人蔘 잎 추출물의 총 페놀성 화합물의 함량은 발효 기간에 따라 증가하였고, Tannic acid 표준곡선을 통해 정량한 결과, 발효 9일 째 3% 당 첨가 조건에서 36.92mg/g으로 0일 째에 비해 약 2.41배 증가하였다.
B.subtilis 균주로 발효된 수경재배 人蔘 잎의 DPPH 라디칼 소거활성을 측정한 결과(Table 1), 각 시료의 발효일수가 길어질수록 DPPH 소거 활성이 높았으며, 특히 발효 9일 째와 11일 째 발효된 수경재배 人蔘 잎의 DPPH 라디칼 소거 활성이 가장 우수하였다. 시료의 농도 200 ㎍/㎖에서 9일 66.
B.subtilis 균주로 발효된 수경재배 人蔘 잎의 페놀성 화합물의 총 함량을 비교 분석한 결과(Table 4), 발효일수에 따라 페놀성 화합물의 총량이 증가하였으며 3% 당 첨가 실험 군이 비교적 높은 함량을 보였다. 발효 9일 째 3% 당 첨가 조건에서 36.
subtilis로 발효된 수경재배 人蔘 잎의 항산화 활성이 대체로 9일 째에 높은 경향치를 보여, 발효 9일째 수경 재배 人蔘 잎으로부터 추출한 시료를 통해당 첨가 조건별 ginsenoside 함량을 분석 비교 하였다(Table 6). B.subtilis 균주로 발효한 수경재배 人蔘 잎 추출물의 ginsenoside 함량은 분석된 8종 모두 발효 전에 비해 발효 후 증가하는 것으로 나타났다. 당 첨가 조건별로는 무첨가에 비해당 첨가군의 ginsenoside 함량이 높았으며, 당 첨가 5%에 비해 3% 당첨가 실험군이 다소 높은 것으로 나타났다(Fig.
B.subtilis로 발효된 수경재배 人蔘 잎의 조사포닌 함량을 분석한 결과(Table 5), 발효 시간의 경과에 따라 조사포닌 함량의 변화는 나타나지 않았다.
subtilis 균주로 발효된 수경재배 人蔘 잎 추출물의 항산화 활성은 DPPH와 ABTS 라디칼 소거능으로 비교 분석하였다. DPPH 라디칼 소거능은 발효 3일 째부터 3% 당 첨가 실험군에서 활성이 높았으며 9일과 11일에서 가장 높은 활성을 보였다. 시료의 농도 200㎍/㎖에서 9일 66.
결론적으로 人蔘 잎의 최적의 발효균주와 발효조건은 3% 당 첨가 및 Bacillus subtilis 균주를 통한 9일간 발효된 수경재배 人蔘 잎으로 나타났으며, 그 추출물의 ginsenoside 함량의 증대와 간 보호 통해 상대적으로 이용이 적은 부산물의 가치 증대와 발효 전에 비해 비교적으로 상당한 활성을 나타내는 발효를 통해 산업적 이용이 기대된다.
subtilis 균주로 발효한 수경재배 人蔘 잎 추출물의 ginsenoside 함량은 분석된 8종 모두 발효 전에 비해 발효 후 증가하는 것으로 나타났다. 당 첨가 조건별로는 무첨가에 비해당 첨가군의 ginsenoside 함량이 높았으며, 당 첨가 5%에 비해 3% 당첨가 실험군이 다소 높은 것으로 나타났다(Fig. 2).
6으로 낮은 값을 보였다. 대조구에서는 알코올 투여 후 1 시간의 각 값은 83.7, 40.1 그리고 4시간의 각 값은 62.4, 30.5로 알코올 투여 직후 GOT 활성이 급격히 상승하였다. 이 상승은 알코올의 독성에 의한 간 조직막의 손상을 나타낸다.
5로 낮은 값을 보였다. 대조구에서는 알코올 투여 후 1시간의 각 값은 76.2, 63.2 그리고 4시간의 각 값은 35.9, 29.7로 알코올 투여 직후 GPT 활성이 급격히 상승하였다. 발효 전 추출물 처리군은 단위에서 1시간 경과 후 59.
3으로 IU 단위에서 약 7%의 낮은 값을 나타냈다. 따라서 수경재배 人蔘잎 추출물은 알코올 처리에 의한 간 보호 작용이 효과적으로 나타났으며, 특히 발효된 수경 재배 人蔘잎 추출물은 발효 전 수경재배 人蔘 잎에 비해 간 보호 효과 활성이 높은 것으로 나타났다.
추출물 처리군은 알코올 처리 1시간과 4시간 후, 대조구에 비해 GOT와 GPT 수준이 현저히 낮게 나타났다. 또한 발효 전 추출물에 비해 발효 후 추출물의 GOT와 GPT 수준이 다소 낮게 나타났다.
07배의 활성 증가를 보였다. 또한 환원력도 매우 높은 활성을 나타내었는데, 발효전 0.3083에 비해 발효 9일째 3% 당 첨가 실험군에서 0.7312로 높은 값을 보였으며 처리 내에서 가장 높은 활성을 보였다. 환원력은 일반적으로 전자나 수소, 산소 등의 전자의 이동이나 공여가 가능한 물질들이 산화를 통해 활성산소를 발생하는 것에 대한 억제 능력을 뜻한다.
31% 로 높은 활성을 보였으며, 발효일수가 경과함에 따라 활성이 증가하였다. 발효 9일 째 3% 당 첨가 발효 조건에서 비교적 높은 활성을 보였으며, 200㎍/㎖의 농도에서 96.72%으로 가장 높은 소거 활성을 보였다.
subtilis 균주로 발효된 수경재배 人蔘 잎의 페놀성 화합물의 총 함량을 비교 분석한 결과(Table 4), 발효일수에 따라 페놀성 화합물의 총량이 증가하였으며 3% 당 첨가 실험 군이 비교적 높은 함량을 보였다. 발효 9일 째 3% 당 첨가 조건에서 36.92mg/g으로 가장 높은 함량을 보였다. 총 페놀 함량은 농도별로 희석한 Tannic acid의 표준곡선을 통해 함량을 계산하였다.
이 상승은 알코올의 독성에 의한 간 조직막의 손상을 나타낸다. 발효 전 추출물 처리군은 1시간 경과 후 77.4, 38.4로 나타났으며, 특히 발효 추출물 처리군은 알코올 처리 대조 구와 발효 전 추출물에 비해 알코올 투여 후 1시간에서는 72.7, 35.1으로 현저히 낮은 값을 나타냈다.
7로 알코올 투여 직후 GPT 활성이 급격히 상승하였다. 발효 전 추출물 처리군은 단위에서 1시간 경과 후 59.6, 29.3로 나타났으며, 특히 발효 추출물 처리군은 알코올 처리 대조구와 발효 전 추출물에 비해 알코올 투여 후 1 시간에서는 58.4, 27.3으로 IU 단위에서 약 7%의 낮은 값을 나타냈다. 따라서 수경재배 人蔘잎 추출물은 알코올 처리에 의한 간 보호 작용이 효과적으로 나타났으며, 특히 발효된 수경 재배 人蔘잎 추출물은 발효 전 수경재배 人蔘 잎에 비해 간 보호 효과 활성이 높은 것으로 나타났다.
subtilis 균주로 발효된 3% 당 첨가 및 9일 발효기간으로 설정된 수경재배 人蔘 잎 추출물의 간 손상 보호 효과를 위해 Sprague-Dawley rat을 이용하였다. 발효 전, 후 수경재배 人蔘 잎 추출물의 알코울 섭취에 따른 간 기능 변화를 GOT나 GPT 수준으로 확인한 결과, 물만 처리한 무처리에 비해 알코올만 처리한 대조구의 GOT와 GPT 수준의 변화가 관찰됐다.
subtilis로 발효된 수경재배 人蔘 잎의 당 첨가조건에 따른 ginsenoside 함량을 HPLC를 이용하여 분석하였다. 분석을 실시한 발효 전 수경재배 人蔘 잎 추출물의 ginsenoside는 Rg 1, Re, Rf, Rb1, Rb2, Rd, F2, Rg3로 이 8가지의 ginsenoside 중 Rd의 함량(3.149㎎/g)이 가장 높게 나타났다. B.
DPPH 라디칼 소거능은 발효 3일 째부터 3% 당 첨가 실험군에서 활성이 높았으며 9일과 11일에서 가장 높은 활성을 보였다. 시료의 농도 200㎍/㎖에서 9일 66.85%, 11일 66.89%의 소거 활성을 보였고, 발효전과 비교하여 약 2.16 배 활성 증가를 나타냈다. ABTS 라디칼 소거능은 발효 5일째부터 차이를 보였으며 9일에서 가장 높은 활성을 나타냈다.
실험동물을 이용하여 발효 전, 후 수경재배 人蔘 잎 추출물의 알코올 섭취에 따른 간기능 변화를 GOT나 GPT 수준으로 확인한 결과(Table 7, 8), 알코올 대신 물을 처리한 무처리에 비해 알코올만을 처리한 대조구의 GOT와 GPT 수준은 현저히 높게 나타났다. 추출물 처리군은 알코올 처리 1시간과 4시간 후, 대조구에 비해 GOT와 GPT 수준이 현저히 낮게 나타났다.
이를 통해 발효를 통해 Rg 1, Re, Rf, Rb1, Rb2, Rd, F2, Rg3 모두 함량의 증가를 보였으며 크게는 약 3.31배의 함량 증대를 나타냈다.
높게 나타났다. 추출물 처리군은 알코올 처리 1시간과 4시간 후, 대조구에 비해 GOT와 GPT 수준이 현저히 낮게 나타났다. 또한 발효 전 추출물에 비해 발효 후 추출물의 GOT와 GPT 수준이 다소 낮게 나타났다.
Re는 간 손상 보호 작용, Rf는 진통작용의 효과로 알려져 있다. 특히 3% 당 첨가 군에서 Rg3, Re 및 Rb의 함량이 발효전에 비해 약 3.31, 2.24 및 2.68배 함량이 증가된 것으로 나타났다. Rg3는 암세포 전이 억제, Rb는 항당뇨 및 항산화 물질로 알려져 있다.
D의 값을 비교하였다. 흡광도가 증가하는 것에 따라 환원력이 증가하는 것으로, 발효일수의 경과에 따라 흡광도가 증가하였으며 200 ㎍/㎖의 농도에서 발효 9일 째 3% 당 첨가 조건에서 0.7312의 값으로 가장 높은 활성을 보였다(Table 3).
참고문헌 (37)
Seo BI, Lee JH, Choi HY, Kwon DR, Boo YM. Herbologycal Study on herbal medicine. Seoul : Youngrim. 2008 : 761-6.
Benishin GC. Actions of ginsenoside Rb1 on choline uptake in central cholinegic nerve endings. Neurochem Int. 1992 ; 21 : 1-5.
Hiroshi S, Nobuyoshi N, Akihiko I, Shinichi K, Toshiyuki H, Toshimi S, Chizu F. Effect of ginseng and its saponins on experimental amnesis in mice and on cell cultures of neurons. 5th Int'l Ginseng Symp of Korean Ginseng Society. 1988 : 92-8.
Kikuchi Y, Sasa H, Kita T, Hirata J, Tode T. Inhibition of human ovarian cancer cell proliferation in vitro by ginsenoside-Rb2 and adjuvant effects of cisplatin in vivo. anticancer Drug. 1991 ; 2 : 63-7.
Kang SY, Kim ND. The antihypertensive effect of red ginseng saponin and endothelium- derived vascular relaxation. Korean J Ginseng Sci. 1992 ; 18 : 175-82.
Ogita S, Samugawa K. Clinical effectiveness of Korea ginseng on patients with climateric disturbance. Ginseng Rev. 1994 ; 18 : 95-8.
Saito H, Bao TT. Effect of red ginseng on mice exposed to various stress. 4th Int'l Ginseng Sym of Korean Ginseng Society. 1984.
Kim ND, Han BH, Lee EB, Kong JY, Kim MH, Jin CB. Studies of ginseng on the antistress effects. Korean J Pharmacog. 1979 ; 10 : 61-7.
Brekham Ⅱ. Ancient ginseng and pharmacology. Symp of Institute of Gerontology. 1976.
Choi JH, Oh SK. Studies on the anti-aging acting of Korea ginseng. Korean J Food Nutr. 1983 ; 12 : 323-35.
Mei B, Wang YE, Wu JX, Chen WZ. Protective effects of ginsenosides on oxygen free radical induced damages of cultured vascular endothelial cells in vitro. Yao Hsueh Hsuuh Pao. 1994 ; 29 : 801-8.
Jung NP, Jin SH. Studies on the physiological and biochemical effects of Korea ginseng. Korea J Ginseng Sci. 1996 ; 20 : 431-71.
Chang HK. Effect of preocessiong methods on the saponin contents of panax ginseng leaf-tea. Korean J Food Nutr. 2003 ; 16 : 46-53.
Lee JW, Do JH. Antioxidative activity of ethanol extraction fraction from the Korean red tail ginseng. Korean J Food Sci Technol. 2001 ; 33 : 497-500.
Zhang S, Takeda T, Zhu T, Chen T, Yao X, Tanaka Y, Okihara. A new minor saponin from the leaves of panax ginseng. Planta Med. 1990 ; 56 : 298-301.
Zhang S, Yao X, Chen Y, Cui C, Tezuka T, Kikuchi T. Ginsenoside La, a novel saponin from the leaves of panax ginseng. Chem Pharm Bull. 1989 ; 37 : 1966-8.
Lee GA, Chang YK, Park SY, Kim GA, Kim SH, Park KC, Kim YB, Cha SW, Song BH. Comparative Analysis on Concentration and Uptake Amount of Mineral Nutrients in Different Growth Stages and Temperatures of Panax ginseng C. A. Meyer Grown with Hydroponic Culture. Korean J. Medicinal Crop Sci. 2012 ; 20(4) : 251−8.
Burrage SW. Nutrient film technique in protected cultivation. Acta Hort. 1992 ; 323 : 25-38.
Yang DC, Le QC. Bio-Conversion Technology of Ginseng Saponin for Production of Functional Foods. J Ginseng Res. 2008 ; 2 : 13-21.
Jeon BS, Kwak YS, Baek SS. Research Prospect of Korean Ginseng Processing. J Ginseng Res. 2008 ; 2 : 7-12.
Lee YC. Status of Ginseng Products. J Ginseng Res. 2007 ; 9 : 291-307.
Doh ES, Chang JP, Lee KH, Seong NS. Ginsenoside Change and Antioxidation Activity of Fermented Ginseng. Korean J Medicinal Crop Sci. 2010 ; 18(4) : 255-65.
Bondet V, Brand Williams W, Berset C. Kinetics and mechanisms of antioxidant activity using the DPPH free radical method. Lebensm Wiss u-Technol. 1997 ; 30 : 609-15.
Van den Berg R, Haenen GR, Van den Berg H, Bast A. Applicability of an improved Trolox equivalent antioxidant capacity (TEAC) assay for evaluation of antioxidant capacity measurements of mixtures. Food Chem. 1999 ; 66 : 511-7.
Oyaizu M. Studies on products of browning reaction: antioxidative activities of products of browning reaction prepared from glucosamine. Jpn J Nutr. 1986 ; 44 : 307-15.
AOAC. Official Methods of Analysis. 14th ed. Washington DC. : Association of Official Analytical Chemists. 1995 : 8-35.
Aroraa, Nair G, Strasburg GM. Structure activity relationships for antioxidant activities of a series of plavonoids in a liposomal system. Free Radic Biol Med. 1998 ; 24 : 1355-63.
Sanata S, Kondo N, Shoji J, Tanaka O, Shibata S. Studies on the saponins of ginseng. Structure of ginseng-R0, Rb1, Rb2, Rc and Rd. Chem Pharm Bull. 1974 ; 22 : 421-8.
Yokozawa T, Kobayashi T, Oura H, Kawashima Y. Studies on the mechanism of the hypoglycemic activity of ginsenoside-Rb2 in streptozotocin-diabetic rats. Chem Pharm Bull. 1985 ; 33 : 869-72.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.