Non-O157 장출혈성대장균 검출을 위한 증균배지 및 선택배지 성능 평가 Evaluation of enrichment broth and selective media for the detection of non-O157 enterohemorrhagic Escherichia coli원문보기
본 연구는 non-O157 EHEC의 혈청형별 증균 및 선택배지에서의 분리 조건 및 비교 시험을 하여 최적의 검출 방법을 제시하고자 하였다. EC medium with MUG broth, BRILA broth, mTSB broth with novobiocin 3종의 증균배지 성능 및 배양 조건의 비교 결과 EC-MUG 증균배지를 $42^{\circ}C$에서 24시간 배양하면 EHEC의 효율적인 증균이 이루어질 수 있을 것이라 생각된다. ENDO agar, Chromocult agar, TBX agar, CHROMagar$^{TM}$ STEC medium 4종의 선택배지에 가장 효과적인 배지를 확인결과 TBX agar가 검출율이 가장 높았으나 1종의 배지를 사용했을 경우 다양한 EHEC 혈청형 균를 검출 하기는 어렵다고 생각된다. 그러므로 EHEC를 효과적으로 검출하고자 할 경우 TBX agar와 보완이 가능한 그 외의 배지를 사용하여야 효과적인 검출이 가능할 것으로 생각된다. 또한, 각 배지가 혈청형에 따른 분리효율이 다르므로 본 연구 결과를 참조하여 가장 적합한 배지를 선택 해야 할 것으로 보인다. 향후 non-O157 EHEC의 적절한 기질을 사용하여 다양한 혈청형을 모두 검출 할 수 있는 효율적인 배지의 개발이 필요하다고 생각된다.
본 연구는 non-O157 EHEC의 혈청형별 증균 및 선택배지에서의 분리 조건 및 비교 시험을 하여 최적의 검출 방법을 제시하고자 하였다. EC medium with MUG broth, BRILA broth, mTSB broth with novobiocin 3종의 증균배지 성능 및 배양 조건의 비교 결과 EC-MUG 증균배지를 $42^{\circ}C$에서 24시간 배양하면 EHEC의 효율적인 증균이 이루어질 수 있을 것이라 생각된다. ENDO agar, Chromocult agar, TBX agar, CHROMagar$^{TM}$ STEC medium 4종의 선택배지에 가장 효과적인 배지를 확인결과 TBX agar가 검출율이 가장 높았으나 1종의 배지를 사용했을 경우 다양한 EHEC 혈청형 균를 검출 하기는 어렵다고 생각된다. 그러므로 EHEC를 효과적으로 검출하고자 할 경우 TBX agar와 보완이 가능한 그 외의 배지를 사용하여야 효과적인 검출이 가능할 것으로 생각된다. 또한, 각 배지가 혈청형에 따른 분리효율이 다르므로 본 연구 결과를 참조하여 가장 적합한 배지를 선택 해야 할 것으로 보인다. 향후 non-O157 EHEC의 적절한 기질을 사용하여 다양한 혈청형을 모두 검출 할 수 있는 효율적인 배지의 개발이 필요하다고 생각된다.
In this study, specific and rapid enrichment and growth conditions for the most important, classic non-O157 enterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC) serogroups were assessed. Three enrichment broth types, namely, EC medium with MUG broth, BRILA broth, and mTSB broth with novobiocin, were compared t...
In this study, specific and rapid enrichment and growth conditions for the most important, classic non-O157 enterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC) serogroups were assessed. Three enrichment broth types, namely, EC medium with MUG broth, BRILA broth, and mTSB broth with novobiocin, were compared to identify the optimum enrichment broth for EHEC isolation. Four kinds of selective media, namely, ENDO agar, Chromocult agar, TBX agar, and CHROMagar$^{TM}$ STEC medium, were compared to identify the optimum one for non-O157 EHEC isolation. The results suggested that incubation in EC medium with MUG broth at $42^{\circ}C$ for 20 h is optimum for the enrichment of non-O157 EHEC. TBX agar was identified to have the highest specificity among the tested media. Consequently, a combination of complementary selective media according to serotype must be considered for comprehensive isolation of specific EHEC.
In this study, specific and rapid enrichment and growth conditions for the most important, classic non-O157 enterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC) serogroups were assessed. Three enrichment broth types, namely, EC medium with MUG broth, BRILA broth, and mTSB broth with novobiocin, were compared to identify the optimum enrichment broth for EHEC isolation. Four kinds of selective media, namely, ENDO agar, Chromocult agar, TBX agar, and CHROMagar$^{TM}$ STEC medium, were compared to identify the optimum one for non-O157 EHEC isolation. The results suggested that incubation in EC medium with MUG broth at $42^{\circ}C$ for 20 h is optimum for the enrichment of non-O157 EHEC. TBX agar was identified to have the highest specificity among the tested media. Consequently, a combination of complementary selective media according to serotype must be considered for comprehensive isolation of specific EHEC.
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문제 정의
따라서 본 연구는 기존에 나와있는 E. coli 배지를 선별하여 nonO157 EHEC의 혈청형별 증균 및 선택배지에서의 분리 조건을 비교 분석하고 결과를 토대로 최적의 검출 방법을 제시하고자 하였다.
본 연구는 non-O157 EHEC의 혈청형별 증균 및 선택배지에서의 분리 조건 및 비교 시험을 하여 최적의 검출 방법을 제시하고자 하였다. EC medium with MUG broth, BRILA broth, mTSB broth with novobiocin 3종의 증균배지 성능 및 배양 조건의 비교 결과 EC-MUG 증균배지를 42℃에서 24시간 배양하면 EHEC의 효율적인 증균이 이루어질 수 있을 것이라 생각된다.
특이성과 효율성 또한 다른 배지에 비해 높아 4종의 선택배지 중 80%의 최고 검출율을 보였다(Table 6). 본 연구의 목적은 기존에 분리법이 확립되어있는 E. coli O157: H7을 분리하는 것보다는 non-O157 EHEC의 다양한 혈청형을 효과적으로 분리할 수 있는 배지의 비교가 목적이었는데, E. coli O157을 제외한 non-O157 EHEC에 가장 효과적인 배지를 확인결과 TBX agar가 검출율 80.5%로 가장 높았다(Table 7).
제안 방법
시험구로 7종의 EHEC 혈청형 및 verotoxin 유전자를 가지고 있는 병원성 대장균 2종을 사용하였다. 37℃에서 24시간 배양한 후 생성되는 특징적인 집락의 형태를 관찰하여 전형적인 양성 5개 집락, 음성 5개 집락을 추정 균주로 분리하였다. 분리한 집락 10개에 대하여 각 혈청형 확인을 위한 PCR을 수행하고 양성(True Positive), 위양성(False positive), 위음성(False Negative), 음성(True Negative)을 판정하였다.
aerogenes, E. coli와 혈청형 균주 총 5종의 균을 100 CFU/g이 되도록 시험액 제조 후 ENDO agar (Merck Co.), Chromocult agar (Merck Co.), TBX agar (Merck Co.), CHROMagarTM Shiga toxin-producing E. coli medium (CHROMagar, Paris, France) 각 4종의 선택배지에 3장씩, 한 배지당 시험액을 250 μL씩 분주하고 도말 하였다.
분리한 집락 10개에 대하여 각 혈청형 확인을 위한 PCR을 수행하고 양성(True Positive), 위양성(False positive), 위음성(False Negative), 음성(True Negative)을 판정하였다. 결과는 아래 산출식을 이용하여 민감성(sensitivity), 특이성(specificity), 효율성(efficiency)으로 계산하였다.
결과처리는 비생장(no growth)는 0, 생장 (growth) E. coli는 1, 억제생장(growth inhibition; E. coli 외의 균 생육)는 −1으로 3반복 실험 실시 후 나온 값의 합으로 증균배지 검출율을 계산하였다.
37℃에서 24시간 배양한 후 생성되는 특징적인 집락의 형태를 관찰하여 전형적인 양성 5개 집락, 음성 5개 집락을 추정 균주로 분리하였다. 분리한 집락 10개에 대하여 각 혈청형 확인을 위한 PCR을 수행하고 양성(True Positive), 위양성(False positive), 위음성(False Negative), 음성(True Negative)을 판정하였다. 결과는 아래 산출식을 이용하여 민감성(sensitivity), 특이성(specificity), 효율성(efficiency)으로 계산하였다.
시험구로 사용한 균주는 E. coli 3종, EHEC 혈청형별 7종을 분석하였으며 대조구로는 E. coli와 유사한 특성을 가진 그람 음성균 8종을 선택하여 증균배지에 EC medium with 4-methylumbellifeny-β-D-glucuronide broth (Difco Laboratories, Detroit, MI, USA), Brilliant-green bile lactose broth (Merck Co.), modified typtic soy broth with novobiocin (Merck Co.) 3종을 선택하여 증균배지 10 mL에 각 균을 0.5 McFarland로 희석하여 동일량 접종하고 접종하고 42, 44.5℃에서 배양하며 20, 24, 48시간 별 생육 여부를 확인하였다.
coli O121은 대장균의 전형적 집락인 녹색의 금속성 광택이 아닌 자주색의 대장균군의 양상이 나타났다. 이 실험에서는 미지의 균주일 경우를 전제로 하였기에 다른 혈청형 균들과 동일하게 녹색 금속성 광택을 보이는 집락을 양성으로 판단하였다. 그로 인해 선택한 집락 모두 위양성, 위음성이 되어 검출율이 0%를 보였다.
대장균의 혈청학적 검사를 위해 O26, O157, O145, O111, O121, O103, O91의 혈청형에 대해 rfb (o-specific polysaccharide), wzx (o-unit flippase), wbsD (aminotransferase)의 유전자에 특이적으로 결합하는 primer를 사용하였다(Table 1)(19,20). PCR 반응액은 1 U Taq polymerase, 250 μM 각 dNTPs, 10 mM Tris-HCl, 30 mM KCl, 1.
본 실험에 사용한 균주는 국가병원체 자원 은행(National Culture Collection for Pathogens, NCCP), American type culture collection (ATCC, Manassas, VA, USA)에서 분양은 표준균주 15종, 분리주 3종으로 tryptic soy agar (TSA; Merck Co., Darmstadt, Germany)에서 37℃, 24시간 배양 하여 활성화 시킨 후 시험 분석하였다. Escherichia coli (ATCC 25922), E.
coli medium (CHROMagar, Paris, France) 각 4종의 선택배지에 3장씩, 한 배지당 시험액을 250 μL씩 분주하고 도말 하였다. 시험구로 7종의 EHEC 혈청형 및 verotoxin 유전자를 가지고 있는 병원성 대장균 2종을 사용하였다. 37℃에서 24시간 배양한 후 생성되는 특징적인 집락의 형태를 관찰하여 전형적인 양성 5개 집락, 음성 5개 집락을 추정 균주로 분리하였다.
성능/효과
ENDO agar는 대장균/군 검출을 위한 배지로서 유당을 발효하는 균은 녹색의 금속성 광택을 가진 집락을 형성, 유당을 비발효하는 균은 무색의 집락을 형성한다(22). 9종의 균 중 E. coli O103이 100%의 가장 높은 검출율을 보였다. 반면, E.
STEC는 시가독소 생성 대장균의 검출을 위한 발색배지로서 대표적인 시가독소생성 대장균 혈청형은 자주색, 그 외 대장균군은 무색, 파란색 집락을 형성한다(21). CHROMagarTM STEC에서 E. coli O26, E. coli O145, E. coli O157, E. coli (Stx2)을 분주한 배지에 음성 의심 집락은 자라지 않았고 양성 의심 집락만 자랐으며 양성 의심 집락을 PCR 확인 시 모두 양성 균주로 확인되었으므로 민감성이 100%로 굉장히 높았으나 recovery가 다른 배지에 비해 현저하게 낮아 CHROMagarTM STEC에서 EHEC의 생육은 좋지 않았다. 식품 중에 존재하는 EHEC의 균량은 굉장히 적기 때문에 충분히 증균이 되지 않은 배양배지에서 EHEC를 분리하는 선택배지로 사용하는 것은 지양해야 한다고 생각된다.
Chromocult agar는 대장균/군 검출을 위한 배지로 salmon-gal에 의해 β-D-glucuronidase가 분해되어 대장균군은 자주색, 대장균은 보라색 혹은 파란색을 띄는 집락을 형성한다(23). E. coli O103, E. coli O111이 100%의 검출율을 보였으나, E. coli O157은 위양성과 위음성이 많이 나타나 검출율이 9%로 가장 낮았다(Table 5).
증균배지 성능 및 배양 조건의 비교 결과는 Table 2에 나타내었다. E. coli 및 EHEC 혈청형 7종과 verotoxin 유전자를 가지고 있는 병원성 대장균 2종에 대해 growth E. coli 값이 클수록 검출율이 높다고 판단 하였다. 증균배지 3종을 대상으로 검출율을 비교, 분석한 결과 EC-MUG 배지는 42℃에서 24시간이상 배양시 30, BRILA 배지는 42℃에서 20시간 이상 배양 시 30으로 가장 높았고, mTSB 배지는 48시간 이상 배양하여도 28로 다른 배지에 비해 낮았다.
본 연구는 non-O157 EHEC의 혈청형별 증균 및 선택배지에서의 분리 조건 및 비교 시험을 하여 최적의 검출 방법을 제시하고자 하였다. EC medium with MUG broth, BRILA broth, mTSB broth with novobiocin 3종의 증균배지 성능 및 배양 조건의 비교 결과 EC-MUG 증균배지를 42℃에서 24시간 배양하면 EHEC의 효율적인 증균이 이루어질 수 있을 것이라 생각된다. ENDO agar, Chromocult agar, TBX agar, CHROMagarTM STEC medium 4종의 선택배지에 가장 효과적인 배지를 확인결과 TBX agar가 검출율이 가장 높았으나 1종의 배지를 사용했을 경우 다양한 EHEC 혈청형 균를 검출 하기는 어렵다고 생각된다.
EHEC를 제외한 그람 음성균 8종에 대한 growth inhibition가 높을 수록 배지 검출율이 높다고 판단할 수 있는데, EC-MUG 배지 42℃에서 20시간 배양했을 때와 EC-MUG 배지 44.5℃에서20, 24, 48시간 배양했을 때 그람 음성균 8종 모두 증균되지 않았다. 따라서 growth inhibition는 EC-MUG가 가장 좋다는 것을 알 수 있었다.
EC medium with MUG broth, BRILA broth, mTSB broth with novobiocin 3종의 증균배지 성능 및 배양 조건의 비교 결과 EC-MUG 증균배지를 42℃에서 24시간 배양하면 EHEC의 효율적인 증균이 이루어질 수 있을 것이라 생각된다. ENDO agar, Chromocult agar, TBX agar, CHROMagarTM STEC medium 4종의 선택배지에 가장 효과적인 배지를 확인결과 TBX agar가 검출율이 가장 높았으나 1종의 배지를 사용했을 경우 다양한 EHEC 혈청형 균를 검출 하기는 어렵다고 생각된다. 그러므로 EHEC를 효과적으로 검출하고자 할 경우 TBX agar와 보완이 가능한 그 외의 배지를 사용하여야 효과적인 검출이 가능할 것으로 생각된다.
coli O157은 하얀색, 그 외 대장균군은 하얀색 혹은 녹-베이지색 집락을 형성한다(21). TBX agar는 ENDO agar, Chromocult agar 와 마찬가지로 E. coli O103이 검출율 100%로 가장 높았으며, 50%의 가장 낮은 검출율을 보인 E. coli O91을 제외한 8종의 균은 위양성이 나타나지 않아 4종의 배지 중 가장 높은 민감성을 나타내었다. 특이성과 효율성 또한 다른 배지에 비해 높아 4종의 선택배지 중 80%의 최고 검출율을 보였다(Table 6).
증균배지 3종을 대상으로 검출율을 비교, 분석한 결과 EC-MUG 배지는 42℃에서 24시간이상 배양시 30, BRILA 배지는 42℃에서 20시간 이상 배양 시 30으로 가장 높았고, mTSB 배지는 48시간 이상 배양하여도 28로 다른 배지에 비해 낮았다. 기존 E. coli 검출방법으로 알려진 44.5℃에서 24시간 배양하는 것보다 42℃에서 배양하는 것이 검출율이 높았다.
5℃에서20, 24, 48시간 배양했을 때 그람 음성균 8종 모두 증균되지 않았다. 따라서 growth inhibition는 EC-MUG가 가장 좋다는 것을 알 수 있었다. 그러나 EC-MUG 배지에서 42℃에서 48시간 배양 시 −7, BRILA 배지와 mTSB 배지는 42℃에서 48시간 배양 시 −15로 배지효율이 가장 낮아 위 조건에서의 48시간 배양은 지양해야 한다고 생각된다.
위 연구 결과 목적하는 EHEC 균주의 증균배지 별 검출율은 EC-MUG 증균배지가 EHEC에 대해서 가장 높은 검출율이 확인된 반면 E. coli를 제외한 그람 음성균에 대해서는 가장 낮은 검출율을 나타내었다. 미농무성 또한 background 미생물이 많을 경우 EHEC는 42°C 배양을 권장하고 있으므로 따라서 가장 최적의 배지는 EC-MUG 증균배지로 42℃에서 24시간 배양하면 EHEC의 효율적인 증균이 이루어질 수 있을 것이라 생각된다.
coli 값이 클수록 검출율이 높다고 판단 하였다. 증균배지 3종을 대상으로 검출율을 비교, 분석한 결과 EC-MUG 배지는 42℃에서 24시간이상 배양시 30, BRILA 배지는 42℃에서 20시간 이상 배양 시 30으로 가장 높았고, mTSB 배지는 48시간 이상 배양하여도 28로 다른 배지에 비해 낮았다. 기존 E.
최적 선택배지는 민감성, 특이성, 효율성의 평균이 높을수록 검출율이 높다고 판단할 수 있다. 그러나 실험결과 검출율이 가장 높은 배지도 단독으로 사용했을 경우 다양한 EHEC 혈청형 균을 검출 하기는 어렵다고 생각된다.
coli O91을 제외한 8종의 균은 위양성이 나타나지 않아 4종의 배지 중 가장 높은 민감성을 나타내었다. 특이성과 효율성 또한 다른 배지에 비해 높아 4종의 선택배지 중 80%의 최고 검출율을 보였다(Table 6). 본 연구의 목적은 기존에 분리법이 확립되어있는 E.
후속연구
그러나 실험결과 검출율이 가장 높은 배지도 단독으로 사용했을 경우 다양한 EHEC 혈청형 균을 검출 하기는 어렵다고 생각된다. 개별 분리배지의 경우 분리 효율이 월등하게 높지 않기 때문에 적어도 두 가지 또는 세 가지의 분리배지를 동시에 사용하여야 식품에서 검출 확률을 증가시킬 수 있다는 보고가 있으므로(24) EHEC를 효과적으로 검출하고자 할 경우 TBX agar와 보완이 가능한 그 외의 배지를 사용하여야 효과적인 검출이 가능할 것으로 생각된다. 또한, 각 배지가 혈청형에 따른 분리효율이 다르므로 목적하는 혈청형이 있다면 본 연구에서의 결과를 참조하여 가장 적합한 배지를 선택 해야 할 것으로 보인다.
ENDO agar, Chromocult agar, TBX agar, CHROMagarTM STEC medium 4종의 선택배지에 가장 효과적인 배지를 확인결과 TBX agar가 검출율이 가장 높았으나 1종의 배지를 사용했을 경우 다양한 EHEC 혈청형 균를 검출 하기는 어렵다고 생각된다. 그러므로 EHEC를 효과적으로 검출하고자 할 경우 TBX agar와 보완이 가능한 그 외의 배지를 사용하여야 효과적인 검출이 가능할 것으로 생각된다. 또한, 각 배지가 혈청형에 따른 분리효율이 다르므로 본 연구 결과를 참조하여 가장 적합한 배지를 선택 해야할 것으로 보인다.
식품 중에 존재하는 EHEC의 균량은 굉장히 적기 때문에 충분히 증균이 되지 않은 배양배지에서 EHEC를 분리하는 선택배지로 사용하는 것은 지양해야 한다고 생각된다. 또한 그 외 5종의 혈철형이나 독소를 가진 균은 CHROMagarTM STEC에서 양성 의심 집락, 음성 의심 집락이 전혀 생육하지 않았기 때문에 E. coli O26, E. coli O145, E. coli O157, E. coli (Stx2)을 목적으로 한 경우에만 사용해야 할 것으로 생각된다(Table 3). ENDO agar는 대장균/군 검출을 위한 배지로서 유당을 발효하는 균은 녹색의 금속성 광택을 가진 집락을 형성, 유당을 비발효하는 균은 무색의 집락을 형성한다(22).
개별 분리배지의 경우 분리 효율이 월등하게 높지 않기 때문에 적어도 두 가지 또는 세 가지의 분리배지를 동시에 사용하여야 식품에서 검출 확률을 증가시킬 수 있다는 보고가 있으므로(24) EHEC를 효과적으로 검출하고자 할 경우 TBX agar와 보완이 가능한 그 외의 배지를 사용하여야 효과적인 검출이 가능할 것으로 생각된다. 또한, 각 배지가 혈청형에 따른 분리효율이 다르므로 목적하는 혈청형이 있다면 본 연구에서의 결과를 참조하여 가장 적합한 배지를 선택 해야 할 것으로 보인다.
그러므로 EHEC를 효과적으로 검출하고자 할 경우 TBX agar와 보완이 가능한 그 외의 배지를 사용하여야 효과적인 검출이 가능할 것으로 생각된다. 또한, 각 배지가 혈청형에 따른 분리효율이 다르므로 본 연구 결과를 참조하여 가장 적합한 배지를 선택 해야할 것으로 보인다. 향후 non-O157 EHEC의 적절한 기질을 사용하여 다양한 혈청형을 모두 검출 할 수 있는 효율적인 배지의 개발이 필요하다고 생각된다.
향후 non-O157 EHEC의 다양한 혈청형에 적용 될 수 있는 효율적인 배지의 개발이 필요하며 배지의 개발 시 적절한 기질을 사용하여 검출하고자 하는 세균의 생육도 고려해야 할 필요성이 있다고 생각된다.
또한, 각 배지가 혈청형에 따른 분리효율이 다르므로 본 연구 결과를 참조하여 가장 적합한 배지를 선택 해야할 것으로 보인다. 향후 non-O157 EHEC의 적절한 기질을 사용하여 다양한 혈청형을 모두 검출 할 수 있는 효율적인 배지의 개발이 필요하다고 생각된다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
Verotoxin는 어떻게 분류되는가?
Verotoxigenic Escherichia coli (VTEC)는 장 점막에 부착 후 verotoxin (Stx)의 강력한 세포 독소를 생산하는 것이 특징이며 이 질균(Shigella dysenteriae)이 생성하는 독소와 거의 같거나 밀접한 관련이 있다고 하여 Shigatoxin이라고도 한다. Verotoxin은 Stx1, Stx2 두 가지 형으로 분류되며 두 독소를 모두 생산하는 균과 어느 한쪽만 생산하는 균이 있고, 두 독소는 모세혈관을 손상시켜 용혈성 빈혈을 일으키는 생화학적 특성과 작용 기작은 비슷하나 Stx2가 더 위험하다고 알려져 있다(1-3).
Verotoxigenic Escherichia coli의 특징은?
Verotoxigenic Escherichia coli (VTEC)는 장 점막에 부착 후 verotoxin (Stx)의 강력한 세포 독소를 생산하는 것이 특징이며 이 질균(Shigella dysenteriae)이 생성하는 독소와 거의 같거나 밀접한 관련이 있다고 하여 Shigatoxin이라고도 한다. Verotoxin은 Stx1, Stx2 두 가지 형으로 분류되며 두 독소를 모두 생산하는 균과 어느 한쪽만 생산하는 균이 있고, 두 독소는 모세혈관을 손상시켜 용혈성 빈혈을 일으키는 생화학적 특성과 작용 기작은 비슷하나 Stx2가 더 위험하다고 알려져 있다(1-3).
Enterohemorrhagic Escherichia coli의 특징은?
coli O157:H7이 처음 보고된 후(6), EHEC로 인한 식중독의 발병이 계속 증가하고 있다. EHEC의 감염식품은 완전히 익지 않은 고기나 샐러드, 멸균되지 않은 우유 등으로 확인되었으며 특징은 내산성으로 pH 2-4에서 생존이 가능하며, 균 자체는 70oC 정도 온도에서 2분이면 사멸한다(2,7). 아직까지 이 균에 유효한 백신은 없으며, 잠복기는 2-8일이다.
참고문헌 (24)
Koo MS, Kim HJ. Shiga toxin producing Escherichia coli and foodborne disease. Safe Food 6: 23-28 (2011)
Rey J, Sanchez S, Blanco JE, de Mendoza JH, de Mendoza MH, Garcia A, Gil C, Tejero N, Rubio R, Alonso JM. Prevalence, serotypes and virulence genes of shiga toxin-producing Escherichia coli isolated from ovine and caprine milk and other dairy products in Spain. Int. J. Food Microbiol. 107: 212-217 (2006)
Kim HY, Kim EJ, Park YC, Cho JI, Lee JO. Prevalence and characterization of enterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC) isolated from ground beefs distributed in Gyeong-in region. Korean J. Food Sci. Technol. 38: 773-778 (2006)
Karmali MA, Petric M, Steele BT, Lim C. Sporadic cases of haemolytic-uraemic syndrome associated with faecal cytotoxin and cytotoxin-producing Escherichia coli in stools. Lancet 321: 619-620 (1983)
Gill A, Martinez-Perez A, McIlwham S, Blais B. Development of a method for the detection of verotoxin-producing Escherichia coli in Food. J. Food Protect. 75: 827-837 (2012)
Centers for Disease Control and Prevention. National Enteric Disease Surveillance: STEC Surveillance Overview. Available from: http://www.cdc.gov/ncezid/dfwed/pdfs/national-stec-surveillanceoverview-508c.pdf. Accessed July. 28, 2016.
Woteki CE, Kineman BD. Challenges and approaches to reducing foodborne illness. Annu. Rev. Nutr. 23: 315-344 (2003)
Tzschoppe M, Martin A, Beutin L. A rapid procedure for the detection and isolation of enterohaemorrhagic Escherichia coli (EHEC) Serogroup O26, O103, O111, O118, O121, O145 and O157 strains and the aggregative EHEC O104: H4 strain from ready-to-eat vegetables. Int. J. Food Microbiol. 152: 19-30 (2012)
Park S, Kim SH, Seo JJ, Kee HY, Kim MJ, Seo KW, Lee DH, Choi YH, Lim DJ, Hur YJ, Cho SH, Lee BK. An outbreak of inapparent non-O157 enterohemorrhagic Escherichia coli infection. Korean J. Med. 70: 495-504 (2006)
Ojeda A, Prado V, Martinez J, Arellano C, Borczyk A, Johnson W, Lior H, Levine MM. Sorbitol-negative phenotype among enterohemorrhagic Escherichia coli strains of different serotypes and from different sources. J. Clin. Microbiol. 33: 2199-2201 (1995)
Pradel N, Livrelli V, de Champs C, Palcoux JB, Reynaud A, Scheutz F, Sirot J, Joly B, Forestier C. Prevalence and characterization of shiga toxin-producing Escherichia coli isolated from cattle, food, and children during a one-year prospective study in France. J. Clin. Microbiol. 38: 1023-1031 (2000)
Beutin L, Krause G, Zimmermann S, Kaulfuss S, Gleier K. Characterization of shiga Toxin-producing Escherichia coli strains isolated from human patients in Germany over a 3-year period. J. Clin. Microbiol. 42: 1099-1108 (2004)
Ludwig K, Bitzan M, Zimmermann S, Kloth M, Ruder H, Muller-Wiefel DE. Immune response to non-O157 vero toxin-producing Escherichia coli in patients with hemolytic uremic syndrome. J. Infect. Dis. 174: 1028-1039 (1996)
Kleanthous H, Smith HR, Scotland SM, Gross RJ, Rowe B, Taylor CM, Milford DV. Haemolytic uraemic syndromes in the British isles, 1985-8: Association with verocytotoxin producing Escherichia coli. Part 2: Microbiological aspects. Arch. Dis. Child. 65: 722-727 (1990)
Russmann H, Kothe E, Schmidt H, Franke S, Harmsen D, Caprioli A, Karch H. Genotyping of shiga-like toxin genes in non-O157 Escherichia coli strains associated with haemolytic uraemic syndrome. J. Med. Microbiol. 42: 404-410 (1995)
Jeon BW, Jeong JM, Won GY, Park H, Eo SK, Kang HY, Hur J, Lee JH. Prevalence and characteristics of Escherichia coli O26 and O111 from cattle in Korea. Int. J. Food Microbiol. 110: 123-126 (2006)
Bae WK, Lee YK, Cho MS, Ma SK, Kim SW, Kim NH, Choi KC. A case of hemolytic uremic syndrome caused by Escherichia coli O104:H4. Yonsei Med. J. 47: 437-439 (2006)
Paddock Z, Shi X, Bai J, Nagaraja TG. Applicability of a multiplex PCR to detect O26, O45, O103, O111, O121, O145, and O157 serogroups of Escherichia coli in cattle feces. Vet. Microbiol. 156: 381-388 (2012)
Verhaegen B, de Reu K, Heyndrickx M, de Zutter L. Comparison of six chromogenic Agar media for the isolation of a broad variety of Non-O157 shigatoxin-producing Escherichia coli (STEC) serogroups. Int. J. Environ. Res. public health 12: 6965-6978 (2015)
Kozub-Witkowski E, Krause G, Frankel G, Kramer D, Appel B, Beutin L. Serotypes and virutypes of enteropathogenic and enterohaemorrhagic Escherichia coli strains from stool samples of children with diarrhoea in Germany. J. Appl. Microbiol. 104: 403-410 (2008)
Gonzalez RD, Tamagnini LM, Olmos PD, de Sousa GB. Evaluation of a chromogenic medium for total coliforms and Escherichia coli determination in ready-to-eat foods. Food Microbiol. 20: 601-604 (2003)
Uyttendaele M, Bagamboula CF, de Smet E, van Wilder S, Debevere J. Evaluation of culture media for enrichment and isolation of Shigella sonnei and S. flexneri. Int. J. Food Microbiol. 70: 255-265 (2001)
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