[논문]망태버섯 추출물의 항산화, 베타글루칸 및 아미노산 함량 분석

안기홍; 조재한; 한재구

doi:10.14480/jm.2020.18.1.37

망태버섯 추출물의 항산화, 베타글루칸 및 아미노산 함량 분석
Analysis of antioxidant activities, β-glucan, and amino acid contents of Phallus indusiatus 원문보기

Journal of mushrooms = 한국버섯학회지, v.18 no.1, 2020년, pp.37 - 44

안기홍 (농촌진흥청 국립원예특작과학원 인삼특작부 버섯과) , 조재한 (농촌진흥청 국립원예특작과학원 인삼특작부 버섯과) , 한재구 (농촌진흥청 국립원예특작과학원 인삼특작부 버섯과)

초록
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본 연구는 망태버섯의 성숙한 자실체(fruiting body)와 균모와 자루가 돌출하기 전의 에그(egg)에 함유된 생리활성 성분 중에서 항산화 활성과 베타글루칸 함량, 아미노산 성분함량의 차이를 알아보기 위하여 건조방법 별로 열풍 건조한 시료와 동결 건조한 시료의 열수추출물을 이용하여 실험을 수행하였다. 망태버섯의 에그의 열풍건조 후 열수추출물 1 mg/ml 농도에서 DPPH 라디컬 소거능과 아질산염 소거능은 각각 59.4%와 15.6%로 자실체 추출물 시료에 비하여 높은 소거활성을 보였다. 총 폴리페놀 함량도 역시 망태버섯 에그의 열풍건조 시료의 열수추출물에서 8.25 mg GAE/g의 함량치를 가장 높았다. 망태버섯 에그의 열풍건조 시료의 베타글루칸 함량은 45.9%로 나타나 자실체 및 동결건조 시료에 비하여 높은 값을 보였다. 또한 자실체와 에그의 건조시료로부터 총 17종의 아미노산이 검출되었으며 전체적으로 망태버섯 에그 건조시료 대부분의 아미노산 성분함량이 자실체의 건조시료 함량에 비하여 높은 것으로 나타났다. 망태버섯 자실체와 에그에서 가장 높은 함량치를 보인 아미노산 성분은 비필수 아미노산인 시스테인(Cys)으로 에그에서는 205.6 mg/kg의 함량치를 나타냈다. 다음으로 높은 성분은 필수 아미노산인 페닐알라닌(Phe)과 비필수 아미노산인 글루탐산(Glu) 이었다. 본 연구의 야생 식용버섯으로 잘 알려진 망태버섯의 건조방법에 따른 생리활성 성분의 차이를 살펴 본 결과, 항산화와 관련된 생리활성은 열풍건조에 의한 건조시료로부터 추출하였을 경우 효능이 더 높았으며, 생리활성 및 영양성분 함량은 망태버섯의 자실체에 비하여 에그의 추출물에서 높은 것으로 나타났다.

Abstract ▼ AI-Helper

The antioxidant activities and β-glucan contents of hot-water extracts of the eggs and fruiting bodies of Phallus indusiatus were investigated using different drying methods, and the amino acid contents as nutritional components of the eggs and fruiting bodies of P. indusiatus were analyzed. DPPH radical scavenging and nitrite scavenging activities of hot-water extracts of the eggs of P. indusiatus obtained after hot-air drying were 59.4% and 15.6%, respectively, at 1 mg/ml concentrations, which showed higher activities than those of freeze dried samples. Total polyphenol and β-glucan contents in hot-air-dried hot-water extracts of the eggs of P. indusiatus were 8.25 mg GAE/g and 45.9%, respectively, which were the highest among all samples. Additionally, 17 amino acids were detected from the hot-water extracts of the eggs and fruiting bodies of P. indusiatus, and the amino acid contents were higher in the eggs than in the fruiting bodies. Cysteine, phenylalanine, and glutamic acid were the most abundant essential and non-essential amino acids in the analyzed extracts. The results of this study showed that the physiological activities of the antioxidants from P. indusiatus, well known as wild edible mushroom, were greater when extracted from the dried samples. Further, the amino acid contents were higher in the egg extracts than in the extracts from the fruiting bodies of P. indusiatus.

주제어

표/그림 (7)

그림 Fig. 1. Fruiting bodies (A) and eggs (B) of Phallus indusiatus used in this study.
표 Table 1. HPLC condition for the analysis of amino acids
그림 Fig. 2. DPPH radical scavenging activities of hot-water extracts (1 mg/ml concentrations) from eggs and fruiting bodies of Phallus indusiatus by different drying methods (hot-air drying and freeze drying).
그림 Fig. 3. Nitrite scavenging activities of hot-water extracts (1 mg/ml concentrations) from eggs and fruiting bodies of Phallus indusiatus by different drying methods (hot-air drying and freeze drying).
그림 Fig. 4. Total polyphenol contents of hot-water extracts (1 mg/ml concentrations) from eggs and fruiting bodies of Phallus indusiatus by different drying methods (hot-air drying and freeze drying).
표 Table 2. Total glucan, α-glucan and β-glucan contents of eggs and fruiting bodies of Phallus indusiatus by different drying methods (hot-air drying and freeze drying)
그림 Fig. 5. The contents of amino acids of fruiting bodies (dark gray bars) and eggs (light gray bars) of Phallus indusiatus (Asp, Aspartic acid, Ser, Serine; Glu, Glutamic acid; Gly, Glycine; His, Histidine; Arg, Arginine; Thr, Threonine; Ala, Alanine; Pro, Proline; Cys, Cystine; Tyr, Tryptophan; Val, Valine; Met, Methionine; Lys, Lysine; Ile, Isoleucine; Leu, Leucine; Phe, Phenylalanine).

AI 본문요약
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문제 정의

망태버섯의 조리방법으로 주로 검은색 갓 부분을 제거한 후 물로 씻어 건조한 후 스프, 스튜 등의 뜨거운 국물요리에 주로 이용되는 것을 감안하여 본 연구에서는 망태버섯의 성숙한 자실체(fruiting body)와 균모 와 자루가 돌출하기 전의 에그(egg)를 대상으로 건조방법별로 열풍 건조한 시료와 동결 건조한 시료의 열수추출물을 이용하여 항산화 활성과 베타글루칸 함량, 아미노산 성분함량의 차이를 알아보기 위하여 실험을 수행하였다.
본 연구는 망태버섯의 성숙한 자실체(fruiting body)와 균모와 자루가 돌출하기 전의 에그(egg)에 함유된 생리활성 성분 중에서 항산화 활성과 베타글루칸 함량, 아미노산 성분함량의 차이를 알아보기 위하여 건조방법별로 열풍 건조한 시료와 동결 건조한 시료의 열수추출물을 이용 하여 실험을 수행하였다. 망태버섯의 에그의 열풍건조 후 열수추출물 1 mg/ml 농도에서 DPPH 라디컬 소거능과 아질산염 소거능은 각각 59.

제안 방법

DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) 라디컬 소거활성 은 Blois (1958)의 방법을 변형하여 측정하였다. 항산화 효능에 주로 이용되는 DPPH는 분자 내 라디컬을 함유하 고 있어 polyhydroxy 방향족 화합물, 방향족 아민류 등에 의해 환원되며 이때 라디컬이 소거되어 짙은 자색이 탈색되는 정도를 흡광도를 이용하여 측정하였다.
Injection volume은 5 µl를 주입하고 UV detector (λ=248 nm, 36°C)를 사용하여 검출하였다.
각 열풍건조 및 동결건조된 시료 5g에 D.W. 100 ml을 가하여 60°C 반응조에서 24시간 추출하였다.
1 ml을 넣 고 10초간 혼합하였다. 그리고 빛을 차단한 상태에서 30 분간 상온에서 반응시킨 뒤 Multimode microplate reader (Varioskan LUX, ThermoFisher Scientific, Inc. Co. MA, USA)를 이용하여 517 nm의 파장에서 흡광도를 측정하였으며, 첨가구와 비첨가구의 흡광도(Varioskan LUX, Thermo Fisher Scientific, USA)를 백분율(%)로 나타내었다.
추출액은 원심분리하여 흡입 여과하였으며, 여과액을 회전감압농축기(EYELA, Japan)를 이용하여 농축하였다. 농축된 버섯시료는 최종 1mg/ml로 희석하여 DPPH 라디컬 소거능, 아질산염 소거능, 총 폴리 페놀 함량 분석에 이용하였다.
망태버섯 자실체와 에그의 열풍건조 및 동결건조 시료 열수추출물 1 mg/ml 농도에서의 항산화 효과를 알아보기 위하여 DPPH 라디컬 소거능을 측정하였다(Fig. 2). DPPH는 비교적 안정한 자유라디컬로써 항산화 활성이 있는 물질과 만나면 환원되거나 소거되어 짙은 자색이 감소된다.
수집된 망태버섯 자실체와 에그의 건조시료에 대한 베 타글루칸 함량은 Megazyme Kit (Mushroom and Yeast β-glucan Assay Procedure K-YBGL)을 이용하여 분석하였다.
1과 같다. 수집된 망태버섯은 분자적 동정과 생리활성 성분분석에 이용하였으며, 건조표본 (specimen # : 190724-C01)은 국립원예특작과학원 버섯 자원관리동에 보존 처리하였다.
MA, USA)를 이용하여 750nm 파장에서 흡광도를 측정하였다. 시료에 포함된 총 폴리페놀 함량은 gallic acid의 표준곡선에 시료의 흡광도 측정값을 대입하여 농도를 결정하였다.
아미노산 성분 분석은 Waters 2795 Separations module, Waters 2475 Fluorscene detector, Empower pro software를 이용하였으며, 분석용 컬럼은 AccQ-Tag For Hydrolysate Amino Acid Analysis column (3.9 × 150 mm)을 사용하였다.
4 ml 가하여 혼합하였다. 이를 상온에서 15분간 암반응 시킨 후 Multimode microplate reader (Varioskan LUX, ThermoFisher Scientific, Inc. Co. MA, USA)를 이용하여 흡광도 520nm로 측정하고 추출액의 첨가 전후에 잔존하는 아질산염량을 구하여 백분율(%)로 표기하였다.
항산화 효능에 주로 이용되는 DPPH는 분자 내 라디컬을 함유하 고 있어 polyhydroxy 방향족 화합물, 방향족 아민류 등에 의해 환원되며 이때 라디컬이 소거되어 짙은 자색이 탈색되는 정도를 흡광도를 이용하여 측정하였다.
흡광도 510nm에서 측정된 토탈글루칸(total glucan)과 알파글루칸(α-glucan) 측정값은 glucose 용액 (1 mg/ml)을 GOPOD 시약과 반응시킨 반응액의 흡광도 값과 함께 www.megazyme.com 홈페이지의 Mega-Calc 함량 계산식을 참고하여 함량(%, w/w)값으로 계산하였다.

대상 데이터

수집된 망태버섯 자실체와 에그 시료는 60°C 열풍건조 기에서 24시간 동안 건조하였다. 동결건조 시료는 동결건 조기에서 3일 간 건조 후 추출시료로 사용하였다. 각 열풍건조 및 동결건조된 시료 5g에 D.
망태버섯의 자실체와 에그는 2019년 7월에 경남 진주시 소재의 국립산림과학원 산림바이오소재연구소 내의 대 나무림에서 수집하였다. 자생지에서 수집된 망태버섯의 자실체와 에그는 Fig.
9 × 150 mm)을 사용하였다. 이동상은 A용매로 10% AccQ-Tag Eluent A, B용매로 60% Acetonitrile를 gradient mode로 적용하였다(Table 1). Injection volume은 5 µl를 주입하고 UV detector (λ=248 nm, 36°C)를 사용하여 검출하였다.

데이터처리

모든 실험은 3회 이상 반복 수행하였으며, 얻어진 분석결과는 SPSS statistics 19 프로그램을 이용하여 평균과 표준편차의 값을 산출하였고, Duncan의 다중검증법(DMRT, Duncan’s multiple range test)(Duncan, 1955)을 통하여 각 실험 평균차에 대한 통계적 유의성 검정(p<0.05)을 수행하였다.

이론/모형

수집된 망태버섯 자실체와 에그의 건조시료에 대한 아미노산 분석은 AccQ tag법을 사용하였다. 전처리는 염산가수 분해법(Danial and Steven, 1993)을 적용하였다.
아질산염 소거능은 Gray와 Dugan (1975)의 방법으로 측정하였다. 1 mM NaNO2 0.
수집된 망태버섯 자실체와 에그의 건조시료에 대한 아미노산 분석은 AccQ tag법을 사용하였다. 전처리는 염산가수 분해법(Danial and Steven, 1993)을 적용하였다. 건조된 분말시료 0.
총 폴리페놀함량은 Folin-Denis (1912) 방법에 의하여 측정하였다. 망태버섯 자실체와 에그로부터 열수추출물 0.

성능/효과

7mg GAE/g 의 값을 보였으며, 망태버섯에 비하여 높은 함량치를 나타내고 있었다. Rice-Evans et al. (1996)와 Seo et al. (2017)에 의하면 총 페놀 화합물의 함량이 높을수록 항산 화 활성이 증가되는 것으로 보고하고 있으며, 본 연구의 총 폴리페놀 함량이 가장 높았던 망태버섯 에그의 열풍건조 시료의 열수추출물이 DPPH 라디컬 소거능 및 아질산염 소거능에서도 높은 활성을 보이는 동일한 결과를 확인 할수 있었다.
6 mg/kg로 나타났다. 그 다음으로 높은 성분은 필수 아미노산인 페닐알라닌(Phe)과 비필수 아미노산인 글루탐산(Glu)으로 자실체에서의 페닐알라닌(Phe)과 글루탐산(Glu) 함량은 각각 85.3 mg/kg와 73.2 mg/kg 이었으며, 에그에서의 페닐알라닌(Phe)과 글루탐산(Glu) 함량은 각각 113.2 mg/kg와 105.0 mg/kg 이었다. 아미노산은 크게 필수 아미노산과 비필수 아미노산으로 나뉘며, 주로 단백질 구성성분으로 세포의 성장과 유지하기 위한 신진대사 및 에너지 생성에 중요한 영양소이다.
9%로 나타나 자실체 및 동결건조 시료에 비하여 높은 값을 보였다. 또한 자실체와 에그의 건조시료로부터 총 17종의 아미노산이 검출되었으며 전체적으로 망태버섯 에그 건조 시료 대부분의 아미노산 성분함량이 자실체의 건조시료 함량에 비하여 높은 것으로 나타났다. 망태버섯 자실체와 에그에서 가장 높은 함량치를 보인 아미노산 성분은 비필수 아미노산인 시스테인(Cys)으로 에그에서는 205.
망태버섯의 자실체와 에그의 건조방법별 건조시료의 베타글루칸 함량을 분석한 결과는 Table 2와 같다. 망태버섯 에그의 열풍건조 시료는 45.9%의 베타글루칸 함량을 나타내며 5% 유의수준에서 가장 높은 값을 보였으며 동결건조한 시료는 42.8%이었다. 망태버섯의 자실체 열풍 및 동결건조 시료는 각각 41.
25 mg GAE/g의 함량치를 가장 높았다. 망태버섯 에그의 열풍건조 시료의 베타글루칸 함량은 45.9%로 나타나 자실체 및 동결건조 시료에 비하여 높은 값을 보였다. 또한 자실체와 에그의 건조시료로부터 총 17종의 아미노산이 검출되었으며 전체적으로 망태버섯 에그 건조 시료 대부분의 아미노산 성분함량이 자실체의 건조시료 함량에 비하여 높은 것으로 나타났다.
, 2010). 망태버섯 에그의 열풍건조 후 열수추출물에서 라디컬 소거활성은 5% 유의수준에서 59.4%로 가장 높은 것으로 나타났으며, 건조방법별로 살펴보았을 때에는 열풍건조 후 추출물의 라디컬 소거능이 동결건조에 비하여 높았다. Nguyen et al.
총 17종의 아미노산이 검출되었으며 전체적으로 망태버섯 에그 건조시료 대부분의 아미노산 성분함량이 자실체의 건조시료 함량에 비하 여 높은 것으로 나타났으나 비필수 아미노산인 알라닌 (Ala)과 필수 아미노산인 라이신(Lys)성분은 자실체에서 높은 함량을 보였다. 망태버섯 자실체와 에그에서 가장 높은 함량치를 보인 아미노산 성분은 비필수 아미노산인 시스테인(Cys)으로 자실체에서는 116.8 mg/kg, 에그에서 는 205.6 mg/kg로 나타났다. 그 다음으로 높은 성분은 필수 아미노산인 페닐알라닌(Phe)과 비필수 아미노산인 글루탐산(Glu)으로 자실체에서의 페닐알라닌(Phe)과 글루탐산(Glu) 함량은 각각 85.
본 연구는 망태버섯의 성숙한 자실체(fruiting body)와 균모와 자루가 돌출하기 전의 에그(egg)에 함유된 생리활성 성분 중에서 항산화 활성과 베타글루칸 함량, 아미노산 성분함량의 차이를 알아보기 위하여 건조방법별로 열풍 건조한 시료와 동결 건조한 시료의 열수추출물을 이용 하여 실험을 수행하였다. 망태버섯의 에그의 열풍건조 후 열수추출물 1 mg/ml 농도에서 DPPH 라디컬 소거능과 아질산염 소거능은 각각 59.4%와 15.6%로 자실체 추출물 시료에 비하여 높은 소거활성을 보였다. 총 폴리페놀 함량도 역시 망태버섯 에그의 열풍건조 시료의 열수추출물에서 8.
8%이었다. 망태버섯의 자실체 열풍 및 동결건조 시료는 각각 41.8%와 42.5%의 베타글루 칸 함량을 보였다. 버섯에 함유되어 있는 주요한 생리활 성 물질 중 하나인 베타글루칸은 다당류의 일종으로 인체 의 면역시스템에 작용하여 정상적인 세포조직의 면역기능을 활성화 시켜 백혈구의 수를 증가시킴으로서 세포조직의 면역기능을 향상 시킨다고 보고되고 있다(Chandrasekaran et al.
또한 Seo et al, (2016)은 꽃송이버섯의 DPPH 라디컬 소거활성은 베타글루칸 함량과 관련이 높았으며 상대적으로 높은 총 폴리페놀 함량이 복합적으로 작용한 결과라고 보고하고 있다. 본 연구의 망태버섯의 열풍건조한 에그의 열수추출물에서도 DPPH 라디컬 소거 활성, 아질산염 소거활성 및 총 폴리페놀 함량이 가장 높았으며 베타글루칸 함량과 항산화능과의 관련성이 있는 것으로 추측된다.
다음으로 높은 성분은 필수 아 미노산인 페닐알라닌(Phe)과 비필수 아미노산인 글루탐산 (Glu) 이었다. 본 연구의 야생 식용버섯으로 잘 알려진 망태버섯의 건조방법에 따른 생리활성 성분의 차이를 살펴본 결과, 항산화와 관련된 생리활성은 열풍건조에 의한 건조시료로부터 추출하였을 경우 효능이 더 높았으며, 생리활성 및 영양성분 함량은 망태버섯의 자실체에 비하여 에그의 추출물에서 높은 것으로 나타났다.
3과 같다. 에그의 열풍건조 후 추출물 1mg/ml 농도에서 아질산염 소거능은 5% 유의수준에서 15.6%로 다른 추출물 시료에 비하여 높은 소거활성을 보였다. 자실체 추출물의 경우, 동결건조 후 추출물이 열풍건조 후 추출물에 비하여 높은 소거활성을 나타내고 있었다.
이처럼 망태버섯의 자실 체와 에그의 열풍 및 동결건조 시료 추출물의 아질산염 소거능은 다른 식용가능한 야생버섯류들에 비하여 낮은 활성을 나타내고 있었으나, 망태버섯 자실체가 생성되기 전의 에그 상태의 열풍건조한 시료의 열수추출물이 동결 건조 후 열수추출물에 비하여 아질산염 소거능이 높음을 알 수 있었다.
5와 같다. 총 17종의 아미노산이 검출되었으며 전체적으로 망태버섯 에그 건조시료 대부분의 아미노산 성분함량이 자실체의 건조시료 함량에 비하 여 높은 것으로 나타났으나 비필수 아미노산인 알라닌 (Ala)과 필수 아미노산인 라이신(Lys)성분은 자실체에서 높은 함량을 보였다. 망태버섯 자실체와 에그에서 가장 높은 함량치를 보인 아미노산 성분은 비필수 아미노산인 시스테인(Cys)으로 자실체에서는 116.
6%로 자실체 추출물 시료에 비하여 높은 소거활성을 보였다. 총 폴리페놀 함량도 역시 망태버섯 에그의 열풍건조 시료의 열수추출물에서 8.25 mg GAE/g의 함량치를 가장 높았다. 망태버섯 에그의 열풍건조 시료의 베타글루칸 함량은 45.
(2013)은 흰망 태버섯 1mg/ml 농도의 메탄올 추출물에서 93%의 소거 활성을 보인다고 보고하였으며, Yoon and Lee (2019)에 의하면 같은 말뚝버섯과에 속하는 말뚝버섯의 메탄올추출 물 1mg/ml 농도에서 80% 이상의 라디컬 소거능을 보인다는 보고에 비하여 본 연구에서 수행한 열수추출물 1mg/ml농도에서의 DPPH 라디컬 소거활성이 비교적 낮은 것으로 나타났다. 하지만 본 연구결과 망태버섯의 열풍건 조한 시료의 열수추출물이 동결건조한 열수추출물에 비하 여 라디컬 소거능이 우수하였으며, 균모와 자루가 돌출하기 전의 에그상태에서 라디컬 소거 활성이 자실체에 비하여 높음을 알 수 있었다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	활성산소는 인체 내에서 어떤 문제를 야기하는가?	활성산소는 불안정하고 산화력이 높아 생체물질과 쉽게 반응하기 때문에 인체 내에서 제거되지 못하면 산화적 스 트레스를 유발하게 되는데, 생체 내에는 superoxide dismutase (SOD),a catalase, glutathione reductase 등의 생 리학적 항산화 효소가 산소 상해에 대한 방어기능을 하고 있다(Kim et al., 2013; Xu et al.
	아미노산은 인체 내에서 어떠한 역할을 하는가?	, 2017). 특히, 근육의 원료물질로 에너지 를 발생시키며, 신진대사의 촉매역할과 인체조직의 재생 과 회복에 크게 관여하는 것으로 알려져 있다. 아미노산 은 크게 필수 아미노산과 비필수 아미노산으로 나뉜다.
	활성산소의 정의는?	이처럼 호흡과정 중에서 생체 내에 유 입된 산소는 대사과정을 통하여 일부분은 흔히 유해산소라 알려진 활성산소로 전환이 된다. 즉, 활성산소는 가장 안정한 형태의 산소인 삼중항산소( 3O3)가 산화, 환원과정에 서 생성되는 일중항산소인 superoxide (3O2)와 hydorxyl radical (OH)과 같은 짝짓지 않은 상태의 자유 라디컬 및 과산화수소(H2O2)를 통칭한다(Papa and Skulachev, 1997).

저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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