[논문]아토피피부염이 유발된 마우스에 대한 3종 가감방풍통성산(활석 제외)의 효과 비교

임경민; 송지훈; 김종한; 최정화; 정민영; 박수연

doi:10.6114/jkood.2020.33.3.001

아토피피부염이 유발된 마우스에 대한 3종 가감방풍통성산(활석 제외)의 효과 비교
Effects of Three Types of GagamBangpungtongseong-san(Except Talcum) on the Atopic Dermatitis in Mice 원문보기

韓方眼耳鼻咽喉皮膚科學會誌 = The journal of Korean Medicine Ophthalmology & Otolaryngology & Dermatology, v.33 no.3, 2020년, pp.1 - 26

임경민 (도솔한방병원) , 송지훈 (동신대학교 한의과대학 한방안이비인후피부과학교실) , 김종한 (동신대학교 한의과대학 한방안이비인후피부과학교실) , 최정화 (동신대학교 한의과대학 한방안이비인후피부과학교실) , 정민영 (동신대학교 한의과대학 한방안이비인후피부과학교실) , 박수연 (동신대학교 한의과대학 한방안이비인후피부과학교실)

Abstract ▼ AI-Helper

Objectives : This study was to examine the effects of 3 types of BTS which were excluded talcum only or replaced talcum to Lonicera japonicae Flos or Kochiae Fructus on the DNCB-induced atopic dermatitis in mice. Methods : In this study, Balb/c mice were divided into five groups: normal, control, GBT(BTS except talcum), GBTG(GBT added Lonicera japonicae Flos), and GBTJ(GBT added Kochiae Fructus). And the effects on atopic dermatitis were evaluated by weight change, ear's thickness and weight, thickness of dorsal skin, severity scale of dorsal skin, histopathologic findings of dorsal skin by H&E and toluidine blue stain, proliferation of splenocyte and thymocyte in vitro, proliferation of splenocyte in vivo, IL-4, TNF-α, IgE in serum. Results : There were no significantly changes in body weight and effect of ear's weight in GBT, GBTG, and GBTJ group. The thickness of ear of GBT and GBTJ group showed significant decrease. And the thickness of dorsal skin of GBTJ group significantly decreased compared to the control, GBT, and GBTG group. All the treated groups significantly decreased in severity scale, histopathologically reduced epidermal thickness, and mast cell infiltration. In vitro, all the treated groups increased in the proliferation rates of splenocyte. However, in vivo study, it showed a falling tendency and GBT group significantly decreased compared to control, GBTG, and GBTJ group. In vitro study, GBTG group significantly decreased in the proliferation rates of thymocyte. There was no IgE contents chnage in GBT, GBTG, and GBTJ groups but IL-4 and TNF-α contents were significantly decreased. Conclusions : GBT, GBTG, and GBTJ are expected to improve symptoms of atopic dermatitis and further studies are needed for development of BTS's transformation.

주제어

표/그림 (31)

표 Table 1. Prescription of GBT
표 Table 2. Prescription of GBTG
표 Table 3. Prescription of GBTJ
표 Table 4. Yield of Peroral Samples
표 Table 5. Yield of Topical Application Samples
표 Table 9. The Process of DNCB Application, Sample Application and Oral Administration
표 Table 7. The Score of Skin Conditions
그림 Fig. 1. The Changes of Body Weight in AD-induced Mice
표 Table 8. The Changes of Body Weight in AD-induced mice
그림 Fig. 2. The Effect on Ear Weight in AD Mice
그림 Fig. 3. The Effect on Ear Thickness in AD Mice
표 Table 9. The Effect on Ear Weight in AD Mice
표 Table 10. The Effect on Ear Thickness in AD Mice
그림 Fig. 4. The Effect on Dorsal Skin Thickness in AD Mice
그림 Fig. 5. Effect of GBTSs on Severity Score in AD Mice
표 Table 10. The Effect on Dorsal Skin Thickness in AD Mice
표 Table 12. Effect of GBTSs on Severity Score in AD Mice
그림 Fig. 6. Effect of GBTSs on Clinical Observation Score in AD Mice
그림 Fig. 7. Effect of GBTSs on Histopathological Observation of Dorsal Skin in AD Mice Using H&E Stain(×400).
그림 Fig. 8. Effect of GBTSs on Histopathological Observation of Dorsal Skin in AD Mice Using Toluidine Blue Stain(×100).
그림 Fig. 9. Effect of GBTSs on Proliferation Rates of Splenocyte in Vitro
표 Table 13. Effect of GBTSs on Proliferation Rates of Splenocyte in Vitro
그림 Fig. 10. Effect of GBTSs on Proliferation Rates of Thymocyte in Vitro
표 Table 14. Effect of GBTSs on Proliferation Rates of Thymocyte in Vitro.
표 Table 15. Effect of GBTSs on Proliferation Rates of Splenocyte in Vivo
그림 Fig. 11. Effect of GBTSs on Proliferation Rates of Splenocyte in Vivo
그림 Fig. 12. Effect of IL-4 in AD Mice
표 Table 16. Effect of IL-4 in AD Mice
표 Table 17. Effect of TNF-α in AD Mice
그림 Fig. 14. Effect of IgE in AD Mice
표 Table 18. The Change of IgE in AD Mice

AI 본문요약
AI-Helper

문제 정의

임상에서는 흔히 滑石을 제외하거나, 滑石을 제외하고 石膏를 증량하여 사용하기도³⁵⁾ 하는 등 다양한 방면으 로 BTS를 활용해보고자 하는 시도가 있었다. 따라서 본 저자는 BTS의 활용에 대한 추가적인 실험연구가 필요하다고 생각하였으며, 대만에서 실시된 분석연구에서 金銀花와 地膚子를 AD, 건선의 다빈도 활용약재로 선정 한 점²¹⁾에 착안하여 金銀花나 地膚子를 君藥으로 사용한 GBTS, 또는 BTS에서 滑石을 제외한 GBTS가 DNCB를 통해 AD가 유발된 생쥐에게 미치는 영향을 실험적으로 알아보고자 하였다.

제안 방법

3종의 GBTS의 효능을 관찰하기 위해 실험군의 설정은 Normal(AD를 유발하지 않고 식염수를 도포한 후 식염수 경구투여한 군), Control(AD 유발 후 식염수 경 구투여와 AOO 도포를 시행한 군), GBT(AD 유발 후 GBT 시료를 경구투여 및 도포한 군), GBTG(AD 유발 후 GBTG 시료를 경구투여 및 도포한 군), GBTJ(AD 유발 후 GBTJ 시료를 경구투여 및 도포한 군)로 총 5개 군으로 분류하였다. 실험군의 개체수는 normal군은 5마리, control군은 9마리, GBT, GBTG, GBTJ군은 각각 10마리로 실험하였다.
본 실험에서는 滑石을 제외, 또는 滑石을 金銀花나 地膚子로 대체하여 君藥으로 활용한 加減防風通聖散 (GagamBangpungtongseong-san, GBTS)의 AD에 대한 효과를 비교, 관찰하고자 DNCB로 생쥐에 AD를 유발시킨 후, 체중 변화, 귀의 무게와 두께, 등의 피부 두께를 측정하였다. 또한 등 피부의 피부질환 증상 발 현 정도를 살피기 위해 육안적 관찰을 시행하였으며, H&E stain, toluidine blue stain을 시행하여 생쥐의 등 피부를 조직병리학적 관찰을 하였다.

대상 데이터

실험동물은 동물실험 전문업체인 ㈜샘타고에서 구매한 체중 23±2g의 수컷 Balb/c 계통의 7주령 생쥐를 사용하였으며, 동신대학교 실험동물윤리위원회(승인번호: DSU-2014-043)의 승인을 받았다. 동물실험시설 규정(식품의약품안전처에서 고시)에 적합한 시설에서 1 주일의 적응기간을 거치도록 하였으며.
실험에 이용한 처방은 滑石을 제외한 BTS(GBT) (Table 1), 滑石을 제외하고 金銀花를 가미한 GBTS(加減防風通聖散加金銀花, GagamBangpungtongseongsangageumeunhwa, GBTG)(Table 2), 滑石을 제외하 고 地膚子를 가미한 BTS(加減防風通聖散加地膚子, GagamBangpungtongseong-sangajibuja, GBTJ) (Table 3)의 3종의 BTS 加減方이며, 구성 약물은 동신 대학교 목포한방병원에서 구입하여 사용하였다. 그 처방내용 및 1첩 당 분량은 각각 아래와 같다.

데이터처리

유의성 검증을 위해 IBM SPSS Statistics 22 통계 처리 프로그램을 활용하여 통계 처리하였다. 실험을 통해 얻어진 각 데이터군 간의 평균 비교는 일원배치분산 분석(one-way ANOVA)을 이용하여 시행하였으며, Tukey 방식을 통해 사후 검정하였다. 유의성의 인정 기준은 유의확률 p-value 0.

성능/효과

6. In vitro 상 3종의 GBTS 실험군은 농도증가에 따라 비장세포 증식율이 유의성 있게 증가하였으나, in vivo 상에서는 모든 실험군의 비장세포 증식율이 감소하는 경향이 있었으며, GBT군은 대조군, GBTG, GBTJ군에 비해 유의성 있게 감소하였다. ;
7. In vitro 상 3종의 GBTS 실험군의 농도증가에 따라 흉선세포 증식율이 감소하였으며, GBTG, GBTJ군 에서 유의성 있게 감소하였다. ;
9. 3종의 GBTS 실험군에서 혈청 내 IgE 함량변화는 유의성이 없었다.
이상의 결과로 미루어 보아, 滑石을 제외하거나 滑石 을 金銀花 또는 地膚子로 대체한 GBTS는 AD의 귀, 등 두께 감소, 임상적인 증상 경감, 비만세포 침윤 감소, IL-4, TNF-α 감소를 통한 항염증 반응으로 DNCB로 유발된 AD에 대해 유효한 효과가 있는 것으로 생각된 다. GBT군이 아토피피부염을 호전시킨 점은 BTS 원방 에서 滑石이 제외되었음에도 다른 구성약재들의 효능으 로 인해 피부 이상 증상이 경감된 것으로 보인다.

후속연구

3종 GBTS 실험군을 비교, 관찰한 결과, 등 두께 비교실험 에서 GBTJ군이 타 실험군에 비해 유의성 있는 감소가 있었으며, in vivo 상 비장세포 증식률 관찰에서 GBT 군이 유의한 감소를 얻었다. 비록 실험군 간 비교에서 는 일관적으로 유의한 관찰결과를 얻지 못하였으나, 전 체 실험 측면에서 GBTJ군이 다른 군에 비해 유의성 있 는 실험항목이 더 많이 관찰된 점을 미루어 보아 地膚子 를 활용한 GBTS를 중심으로 기전 분석을 위한 후속 연 구가 필요하리라 사료된다. ;
본 연구의 한계점은 BTS 원방과 3종의 GBTS를 동일한 실험으로 효과를 비교하지 못한 점과, DNCB로 AD 를 유발한 동물모델에서 얻어진 결과라는 점이다. 아울러 본 연구에서는 면역 물질 중 일부만을 측정대상으로 삼았고, 경구 투여와 도포에 대한 각각의 효능 비교가 되지 못하였으며, in vivo와 in vitro 상의 비장세포 증식률 실험에서 나타난 상반된 결과에 대해 오류분석 및 후속적 연구의 필요성이 있다고 생각된다. 하지만, 본 연구를 바탕으로 임상에서 사용이 어려워진 BTS를 기 존 약재를 통해 가감방으로 변용하여 AD의 임상적 치료제로 활용할 수 있는 가능성을 보여주었으며, 향후 다양한 습진 질환에 접근할 수 있는 연구의 기초자료가 될 수 있으리라 생각한다.
아울러 본 연구에서는 면역 물질 중 일부만을 측정대상으로 삼았고, 경구 투여와 도포에 대한 각각의 효능 비교가 되지 못하였으며, in vivo와 in vitro 상의 비장세포 증식률 실험에서 나타난 상반된 결과에 대해 오류분석 및 후속적 연구의 필요성이 있다고 생각된다. 하지만, 본 연구를 바탕으로 임상에서 사용이 어려워진 BTS를 기 존 약재를 통해 가감방으로 변용하여 AD의 임상적 치료제로 활용할 수 있는 가능성을 보여주었으며, 향후 다양한 습진 질환에 접근할 수 있는 연구의 기초자료가 될 수 있으리라 생각한다. ;

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	아토피피부염(Atopic Dermatitis, AD)이란 무엇인가	아토피피부염(Atopic Dermatitis, AD)은 삼출물, 태선화, 소양감을 호소하고 호전과 재발을 반복하여 지속 적인 관리가 필요한 만성 피부질환으로 스테로이드제, 항히스타민제, 항생제 등과 같은 약물이 사용되고 있으며1,2), 한방에서도 AD 치료제 개발을 강구하기 위해 黃連解毒湯3-7), 龍膽瀉肝湯8), 凉膈散火湯9,10) 등의 청열해독 처방을 이용한 실험연구 및 임상례가 보고되어 오고 있다.
	AD의 치료방법에는 어떠한 것들이 있는가	AD에 대해 한의학에서는 병인을 胎中積熱(유전적인 소인), 動風化熱食物(부적절한 식생활), 濕熱로 보고 병 인에 따른 변증을 통해 健脾, 淸熱, 利濕, 消風止痒, 滋陰養血의 치법을 사용하여 다양한 내, 외치를 시행한다23). AD의 치료방법으로는 기본적으로 적절한 습도 유지가 권장되고 있으며 국소 및 전신적인 부위에는 로션, 연고 형태, 경구 형태의 스테로이드제를 사용하나, 내성 및 피부위축 등의 스테로이드 부작용 위험으로 인해 단기간 사용이 권장된다. 또한 선택적으로 항히스타민제, 항생제 치료, 광선치료 등의 치료법이 활용되고 있으나 1), 근본적인 치료와 더욱 효과적인 치료법 개발을 위하여 한의학적인 치료법에 대한 연구가 활발히 이루어지고 있다.
	약물이 비장세포의 증식율에 미치는 영향은 무엇인가	LPS 미투여군인 normal군을 기준으로 하여 백분율로 표시하였다. 관찰 결과 control 군에 비해 모든 GBTS 실험군들이 감소하는 경향이 보였으며, 특히 GBT군은 control군뿐만 아니라 GBTG 와 GBTJ군과도 유의성 있게 비장세포 증식률이 감소되었음을 관찰할 수 있었다(Table 15, Fig. 11).

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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