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문제 정의
- 본 연구는 코스모스꽃 추출물이 박테리아에 대해서 항균 활성이 있는지를 알아보고 이를 통해 항균 효과를 내는 물질에 대해 규명하고자 하였다. 흰색, 분홍색, 자주색의 코스모스꽃이 4종의 박테리아인 S.
- 코스모스 추출물의 연구는 총 페놀 함량과 플라보노이드 함량을 중심으로 한 in vitro 연구가 대부분이며 항산화 중심의 연구가 주류를 이루고 있다[5-8,19]. 이에 본 연구는 코스모스꽃의 항균 활성 효과에 대해 살펴보고 항균 작용을 발휘하는 물질을 밝혀 보고자 한다.
제안 방법
- 1H의 NMR 분광분석은 한국 기초과학지원연구원에 의뢰하여 Unity Inova 500 (499.5, 125.6 MHz)을 통해서 분석하였다. NMR스펙트럼은 298K의 온도에서 진행하여 결과를 얻었다.
- 1, 2, 3 그리고 자주색 코스모스꽃 Fr. 1에 함유되었을 것으로 유추되는 물질에 대해 항균 효과를 살펴보았다. 우선, 코스모스꽃에 대한 효과 실험에서 표준물질로 사용되는 cosmosiin과 cosmosiin의 구조에서 당이 제거된 형태인 apigenin을 항균 활성과 관련된 유추물질로 선정하였다.
- 3종의 코스모스꽃 추출물들이 보여준 항균 활성 중에서도 EtOAc 층 분획물이 S. aureus에 대해 나타낸 우수한 항균 효과를 좀 더 살펴 보기 위해 Silica gel column chromatography를 실시하였다. 이를 통해 흰색 코스모스꽃과 분홍색 코스모스꽃 EtOAc 층 분획물은 5개로 분획하여 물질을 얻었고 자주색 코스모스꽃 EtOAc층 분획물은 3개의 분획물을 얻었다.
- 1). 3종의 코스모스꽃 추출물을 에틸아세테이트(EtOAc), 클로로포름(CHCl3), 물(DW)의 세가지 용매로 분획, 분리하여 활성을 추적하였다. 세 가지 분획물 중에서도 EtOAc층 분획물에서 가장 우수한 항균 활성이 관찰되었고 CHCl3층 분획물에서도 균의 성장이 저해되는 양상이 나타났다.
- 코스모스꽃 분획물들 중에서도 EtOAc층 추출물이 우수한 항균효과가 나타남에 따라 균의 성장을 저지하는 물질에 대해 알아보기 위해 silica gel column chromatograpy를 실시하였다. Column관에 silica gel 60을 시료량 대비 100배로 충전한 후 전개용매를 2~3번에 나누어 부어주면서 적셔주었다. 전개용매는 chloroform : methanol : hexane =7:4:1 비율로 제조하였다.
- 성분 분석과 관련하여 NMR 측정과 HPLC 측정을 진행하였다. NMR 측정은 Unity Inova 500 (Agilent technologies, Santa Clara, CA, USA)을 이용하였고 HPLC 측정에는 iLC3300 (LABOGENE, Eresing, Bavaria, Germany)을 사용하여 측정하였다.
- Silica gel column chromatography는 silica gel 60 (230400 mesh; Merck KGaA, Darmstadt, Hessen, Germany)으로 실험을 진행하였다. 또한, High-Pressure Liquid Chromatography (HPLC) 분석에는 methanol, water 등의 용매를 사용하였고 이는 Fisher Scientific (Pittsburgh, Pennsylvania, USA)에서 구입하였다.
- 항균 활성은 대조군의 접종 초기의 0 h 흡광도값에 대한 각 시간대별 시료군들의 흡광도값을 시료의 색채값을 제한 효과값으로 나타내었다. 또한, 항균 활성을 시간 흐름의 연속적인 형태로 관찰하고 표현하였다.
- 이를 통해 흰색 코스모스꽃과 분홍색 코스모스꽃 EtOAc 층 분획물은 5개로 분획하여 물질을 얻었고 자주색 코스모스꽃 EtOAc층 분획물은 3개의 분획물을 얻었다. 물질의 분리는 TLC를 통해 확인하였다.
- 본 연구의 실험들은 3회 이상 반복, 시행하였다. 그래프의 값들은 각 실험들의 횟수에 따르는 평균(mean)과 표준편차(standard deviation)로 나타내었다.
- 선정된cosmosiin과 apigenin이 S. aureus에 대해서 항균 활성을 보이는지 실험을 진행하였다.
- ), microplate reader (Synergy HT; BioTek Instruments, Winooski, VT, USA) 등이 있다. 성분 분석과 관련하여 NMR 측정과 HPLC 측정을 진행하였다. NMR 측정은 Unity Inova 500 (Agilent technologies, Santa Clara, CA, USA)을 이용하였고 HPLC 측정에는 iLC3300 (LABOGENE, Eresing, Bavaria, Germany)을 사용하여 측정하였다.
- 세 가지 다른 색깔의 코스모스꽃 추출물들이 박테리아에 대한 성장 저해 효과를 보이는지 알아보기 위해 그람양성균 2종(S. aureus, S. epidermidis)과 그람음성균 2종(P. aeruginosa, E. coli)으로 항균 실험을 진행하였다.
- 이를 0h의 측정값으로 하고 6 h 이후부터 3h마다 24 h 동안 흡광도값을 측정하였다. 시험관들을 shaking incubator에 보관하면서 측정시간마다 LB배지를 얻어 흡광도값을 측정하여 시간 흐름에 따라 균의 성장과 이에 대응하는 시료의 활성을 살펴 보았다. 항균 활성은 대조군의 접종 초기의 0 h 흡광도값에 대한 각 시간대별 시료군들의 흡광도값을 시료의 색채값을 제한 효과값으로 나타내었다.
- 실험에 사용된 균주들은 멸균 처리가 된 액체 배지에 5 µL 씩 접종되었고 코스모스꽃 시료들은 0.1, 0.2, 0.5 mg/mL 농도로 처리되었다.
- 이런 과정을 3회 반복하여 모은 1차 추출물에 클로로포름(CHCl3)과 증류수(DW)를 첨가하여 분획하여 CHCl3층을 분리하고 DW층에 에틸아세테이트(EtOAc)를 더하여 DW층과 EtOAc층을 얻었다. 이 3가지 분획물들을 농축하여 1차 항균 실험을 진행하였다.
- 이후 감압 여과와 농축의 과정을 통해서 시료 추출물을 얻었다. 이런 과정을 3회 반복하여 모은 1차 추출물에 클로로포름(CHCl3)과 증류수(DW)를 첨가하여 분획하여 CHCl3층을 분리하고 DW층에 에틸아세테이트(EtOAc)를 더하여 DW층과 EtOAc층을 얻었다. 이 3가지 분획물들을 농축하여 1차 항균 실험을 진행하였다.
- 코스모스 100 g에 85% 에탄올을 처리한 후 빛을 차단한 채로 24 h 동안 보관였다. 이후 감압 여과와 농축의 과정을 통해서 시료 추출물을 얻었다. 이런 과정을 3회 반복하여 모은 1차 추출물에 클로로포름(CHCl3)과 증류수(DW)를 첨가하여 분획하여 CHCl3층을 분리하고 DW층에 에틸아세테이트(EtOAc)를 더하여 DW층과 EtOAc층을 얻었다.
- )꽃은 9월에 부산시 사상구 낙동강변의 삼락공원에 서식하는 것을 채집하였다. 코스모스 중에서도 흰색, 분홍색, 자주색의 3가지 꽃을 채취하여 깨끗하게 세척한 후 그늘에서 말려서 실험을 진행하였다. 코스모스꽃의 항균 활성을 알아보기 위해 4가지 박테리아를 사용하였다.
- 코스모스꽃 EtOAc층 silica gel 분획물들에서 항균 효과에 영향을 주는 물질에 대해 알아보기 위해 NMR과 HPLC를 진행하였다.
- 코스모스꽃 EtOAc층 분획물에 존재하는 물질에 대한 분석을 위해 HPLC 분석을 진행하였다. 항균 효과가 우수한 코스모스꽃 EtOAc층 분획물과 apigenin에 대한 HPLC 분석 결과는 다음과 같다(Fig.
- 코스모스꽃 silica gel 분획물들에 함유된 화합물의 분석을 위해 High-Pressure Liquid Chromatography (HPLC)를 시행하였다. HPLC분석은 iLC3300을 통해 진행되었는데 YMC-Pack Polyamine II (4.
- 코스모스꽃 분획물들 중에서도 EtOAc층 추출물이 우수한 항균효과가 나타남에 따라 균의 성장을 저지하는 물질에 대해 알아보기 위해 silica gel column chromatograpy를 실시하였다. Column관에 silica gel 60을 시료량 대비 100배로 충전한 후 전개용매를 2~3번에 나누어 부어주면서 적셔주었다.
- 코스모스꽃의 항균 활성 물질을 살펴보기 위해silica gel column chromatography 분획물(silica gel 분획물)에 대해 Nuclear Magnetic Resonance (NMR)을 진행하였다. 1H의 NMR 분광분석은 한국 기초과학지원연구원에 의뢰하여 Unity Inova 500 (499.
- 본 연구는 코스모스꽃 추출물이 박테리아에 대해서 항균 활성이 있는지를 알아보고 이를 통해 항균 효과를 내는 물질에 대해 규명하고자 하였다. 흰색, 분홍색, 자주색의 코스모스꽃이 4종의 박테리아인 S. aureus, S. epidermidis, P. aeruginosa, E. coli에 대해 항균 효과가 있는지 접종 후 24 h 동안 관찰하였다. 3종의 꽃 추출물 중에 EtOAc층 분획물에서 4개의 박테리아에 대해 가장 우수한 항균 활성이 관찰되었고 S.
대상 데이터
- HPLC분석은 iLC3300을 통해 진행되었는데 YMC-Pack Polyamine II (4.6*250 mm, S-5 µm, 12 nm)의 column을 사용하였다.
- 코스모스꽃의 항균 활성을 알아보기 위해 4가지 박테리아를 사용하였다. 그람양성균으로는 황색포도상구균(S. aureus, KCTC 1927; Korean Collection for Type Cultures, Korea), 표피포도상구균(S. epidermidis, KCTC 1917; Korean Collection for Type Cultures, Korea)을 그람음성균으로는 녹농균(P. aeruginosa, KCTC 2004; Korean Collection for Type Culture, Korea), 대장균(E. coli, KCTC 2571; Korean Collection for Type Culture, Korea)이 사용되었다. 박테리아들은Luria-Bertai (LB) 액체 배지에 접종된 뒤에 shaking incubator (37 ℃, 200 rpm) 안에서 배양되었다.
- Silica gel column chromatography는 silica gel 60 (230400 mesh; Merck KGaA, Darmstadt, Hessen, Germany)으로 실험을 진행하였다. 또한, High-Pressure Liquid Chromatography (HPLC) 분석에는 methanol, water 등의 용매를 사용하였고 이는 Fisher Scientific (Pittsburgh, Pennsylvania, USA)에서 구입하였다.
- 본 연구에서 사용된 코스모스꽃은 채취 후 그늘에서 말려 세절해서 사용하였다. 코스모스 100 g에 85% 에탄올을 처리한 후 빛을 차단한 채로 24 h 동안 보관였다.
- 본 연구의 재료인 코스모스(Cosmos bipinnatus Cav.)꽃은 9월에 부산시 사상구 낙동강변의 삼락공원에 서식하는 것을 채집하였다. 코스모스 중에서도 흰색, 분홍색, 자주색의 3가지 꽃을 채취하여 깨끗하게 세척한 후 그늘에서 말려서 실험을 진행하였다.
- 1에 함유되었을 것으로 유추되는 물질에 대해 항균 효과를 살펴보았다. 우선, 코스모스꽃에 대한 효과 실험에서 표준물질로 사용되는 cosmosiin과 cosmosiin의 구조에서 당이 제거된 형태인 apigenin을 항균 활성과 관련된 유추물질로 선정하였다. Apigenin의 선정은 cosmosiin이 코스모스꽃에 함유된 물질 중에 높은 비율을 차지하고 있다는 Saito의 연구(19)와 apigenin이 추출과 분획 과정에서 cosmosiin에서 당이 제거될 때 나타나는 구조라는 점에서 근거하였다.
- Column관에 silica gel 60을 시료량 대비 100배로 충전한 후 전개용매를 2~3번에 나누어 부어주면서 적셔주었다. 전개용매는 chloroform : methanol : hexane =7:4:1 비율로 제조하였다. 전개용매로 세척되어진 silica gel 위에 전개용매에 용해된 코스모스꽃 EtOAc층 시료를 loading하였다.
- 전개용매는 chloroform : methanol : hexane =7:4:1 비율로 제조하였다. 전개용매로 세척되어진 silica gel 위에 전개용매에 용해된 코스모스꽃 EtOAc층 시료를 loading하였다. 전개용매를 column 관 내로 나누어 가한 후 5 mL씩 이어 받고 이를 TLC를 이용하여 동일한 분획물들끼리 모아 감압 농축하였다.
- 코스모스 중에서도 흰색, 분홍색, 자주색의 3가지 꽃을 채취하여 깨끗하게 세척한 후 그늘에서 말려서 실험을 진행하였다. 코스모스꽃의 항균 활성을 알아보기 위해 4가지 박테리아를 사용하였다. 그람양성균으로는 황색포도상구균(S.
성능/효과
- 3종의 코스모스꽃 EtOAc층 silica gel 분획물에서 흰색 코스모스꽃과 자주색 코스모스꽃은 Fr. 1의 경우에 관찰 농도 모두에서 균의 성장이 억제되었으며 최소저해농도가 0.1 mg/mL인 것으로 확인되었다. 분홍색 코스모스꽃은 Fr.
- coli에 대해 항균 효과가 있는지 접종 후 24 h 동안 관찰하였다. 3종의 꽃 추출물 중에 EtOAc층 분획물에서 4개의 박테리아에 대해 가장 우수한 항균 활성이 관찰되었고 S. aureus에 대해서는 CHCl3층 분획물도 효과를 보였다. 추가적으로 흰색 코스모스꽃 silica gel Fr.
- 2 mg/mL에서도 균의 활성을 저지하였다. 3종의 코스모스꽃 CHCl3층 분획물들도 S. aureus에 대해 0.5 mg/mL에서 모두 항균 효과를 보였는데 자주색 코스모스꽃 CHCl3층 분획물은 0.2 mg/mL에서도 21 h까지 균의 성장을 억제하였다. 분획물 중에 DW층은 항균 효과가 없는 것으로 나타났다.
- 세 가지 분획물 중에서도 EtOAc층 분획물에서 가장 우수한 항균 활성이 관찰되었고 CHCl3층 분획물에서도 균의 성장이 저해되는 양상이 나타났다. 3종의 코스모스꽃 EtOAc층 분획물들은 모두 S. aureus에 대해 0.5 mg/mL에서 24 h 키우는 동안 균의 성장을 억제하였으며 그 중 분홍색 코스모스꽃 EtOAc 분획물은 0.2 mg/mL에서도 균의 활성을 저지하였다. 3종의 코스모스꽃 CHCl3층 분획물들도 S.
- 4). 3종의 코스모스꽃 분획물들 중에서 EtOAc층 분획물이 모두 농도의존적으로 균의 성장을 저지하는 것으로 나타났다. 자주색 코스모스꽃과 분홍색 코스모스꽃이 유사하게 항균 활성을 보였고 흰색 코스모스꽃도 0.
- 3). 3종의 코스모스꽃 분획물들 중에서도 EtOAc층이 가장 우수한 분획물이었고 자주색 코스모스꽃 EtOAc층이 그 중에서도 균의 성장을 효과적으로 저지하는 것으로 관찰되었다. CHCl3층도 관찰시간 동안 미약하지만 균의 성장을 억제하는 것으로 나타났다.
- 3종의 코스모스꽃 분획물들은 4종의 박테리아 모두에 대해 저지하는 능력에서 차이가 있기는 하였지만 항균 효과를 나타내었다. 코스모스꽃은 박테리아 중에서도 S.
- 2). 3종의 코스모스꽃 추출물 중에서 EtOAc층 분획물들은 모두 관찰시간 24 h 동안 적용한 농도에서 모두 항균 활성을 보였다. 분획물 중에서 자주색 코스모스꽃 분획물 0.
- 3종의 코스모스꽃 추출물들은 E. Coli에 대해 대해서도 항균 효과가 있는 것으로 나타났다(Fig. 4). 3종의 코스모스꽃 분획물들 중에서 EtOAc층 분획물이 모두 농도의존적으로 균의 성장을 저지하는 것으로 나타났다.
- 3종의 코스모스꽃 추출물들은 P. aeruginosa에 대해 대해서도 항균 효과가 있는 것으로 나타났다(Fig. 3). 3종의 코스모스꽃 분획물들 중에서도 EtOAc층이 가장 우수한 분획물이었고 자주색 코스모스꽃 EtOAc층이 그 중에서도 균의 성장을 효과적으로 저지하는 것으로 관찰되었다.
- 3종의 코스모스꽃 추출물들은 S. aureus에 대해 항균 효과가 있는 것으로 나타났다(Fig. 1). 3종의 코스모스꽃 추출물을 에틸아세테이트(EtOAc), 클로로포름(CHCl3), 물(DW)의 세가지 용매로 분획, 분리하여 활성을 추적하였다.
- 3종의 코스모스꽃 추출물들은 S. epidermidis에 대해서도 항균 효과가 있는 것으로 나타났다(Fig. 2). 3종의 코스모스꽃 추출물 중에서 EtOAc층 분획물들은 모두 관찰시간 24 h 동안 적용한 농도에서 모두 항균 활성을 보였다.
- 3종의 코스모스꽃 분획물들 중에서도 EtOAc층이 가장 우수한 분획물이었고 자주색 코스모스꽃 EtOAc층이 그 중에서도 균의 성장을 효과적으로 저지하는 것으로 관찰되었다. CHCl3층도 관찰시간 동안 미약하지만 균의 성장을 억제하는 것으로 나타났다. DW층은 항균 효과가 아주 미약하거나 일시적으로 나타났다.
- 6). 그 결과를 살펴 보면, 흰색 코스모스꽃 EtOAc층 분획물은 Rt=3.652 (17%), Rt=4.525 (41.8%)에서 주요한 peak들이 나타났다. 분홍색 코스모스꽃 EtOAc층 분획물은 Rt=3.
- 이를 통해서 코스모스꽃 EtOAc층 분획물에도 apigenin의 peak과 유사한 시간대에 비중이 있는 peak을 확인할 수 있었기에 apigenin의 존재 가능성을 유추할 수 있었다. 그러나 3종의 코스모스꽃 EtOAc 층 분획물들의 우수한 항균 활성에 비해 apigenin의 항균 효과가 크지 않았던 점과 HPLC결과를 통해 apigenin은 코스모스꽃 분획물의 항균 활성의 결정적인 물질은 아닌 것으로 판단된다. 그러나 apigenin 구조 요소를 포함한 활성 성분이 항균 활성을 발휘하였거나 비중이 높게 나타났던 peak의 성분이 항균 활성 물질일 것으로 추측된다.
- 94%이라고 보고하였다. 그리고 이 성분들 간의 연합이 항균 효과를 나타내는 것으로 판단하였는데 본 연구에서 항균 물질로 파악한 apigenin은 정유 성분 내에는 분석되지 않았다. 이는 추출 방법에 따른 추출 성분의 차이에서 비롯된 것으로 생각되었다.
- aureus에 대해 낮은 농도에서도 최소저해농도가 나타났고 분획물 중에서는EtOAc 층과 CHCl3층 분획물에서 최소저해농도가 관찰되었다. 그리고 자주색 코스모스꽃 EtOAc층 분획물은 S. epidermidis에 대해서도 0.5 mg/mL 에서 최소저해농도가 나타남을 확인할 수 있었다(Table 1). 종합해 보면, 분획물 중에서는 EtOAc층 분획물이 전반적으로 효과가 있는 것으로 나타났고 코스모스꽃 종류 중에서는 자주색과 분홍색이 흰색 코스모스보다 항균 효과가 있는 것으로 관찰되었다.
- aeruginosa에 대해 처리 농도에 따라 균이 성장하였다고보고하였다. 본 연구에서는 그람양성균인 S. aureus와 S. epidermids에 대한 효과만큼은 아니지만 EtOAc층 분획물은 효과가 있었고 CHCl3층 분획물과 DW층 분획물에서도 미약하지만 효과가 있어서 상이하였다.
- 31 mg/mL라고 하였다. 본 연구에서는 잎이 아닌 꽃의 추출물인 차이가 있으나 코스모스꽃 85% 에탄올 추출물을 분획한 CHCl3층 분획물과 EtOAc층 분획물에서 각각 0.5 mg/mL와 0.2 g/mL에서 MIC가 측정되어 S. aureus에 대해서 유사한 결과가 나타났다. 그러나 Shin의 연구[8]를 보면, 코스모스꽃 열수추출물과 80% 메탄올 추출물이 S.
- 2 mg/mL에서도 21 h까지 균의 성장을 억제하였다. 분획물 중에 DW층은 항균 효과가 없는 것으로 나타났다. Olufunmiso와 Ashafa의 연구(16)를 보면, 남아프리카에서 자생하는 코스모스의 잎에서 추출한 정유 추출물이 S.
- 3종의 코스모스꽃 추출물을 에틸아세테이트(EtOAc), 클로로포름(CHCl3), 물(DW)의 세가지 용매로 분획, 분리하여 활성을 추적하였다. 세 가지 분획물 중에서도 EtOAc층 분획물에서 가장 우수한 항균 활성이 관찰되었고 CHCl3층 분획물에서도 균의 성장이 저해되는 양상이 나타났다. 3종의 코스모스꽃 EtOAc층 분획물들은 모두 S.
- 실험 결과를 통해 cosmosiin 보다 apigenin이 좀더 항균 효과가 있는 것으로 관찰되었다(Fig. 5). 관찰 농도 중에서도 100µM가 50 µM에 비해 24 h 동안 균의 증식을 좀더 효과적으로 저지하였다.
- 1 mg/mL에서 최소저해농도가 나타났다. 이 분획물들과 코스모스 내에 존재할 것으로 유추되는 apigenin 간의NMR과 HPLC 비교, 분석한 결과를 통해서 유효 성분내에는 apigenin구조 요소가 함유되어 있는 물질이 있을 것으로 판단되었다.
- Lee 등의 연구[7]는 국화과 꽃들의 미백화장품 가능성을 타진하기 위해 MeOH 추출물과 4가지 분획물들에 대해 총 페놀함량과 총 플라보노이드 함량을 조사하였다. 이 연구에서 총 페놀 함량은 흰색 코스모스꽃의 n-hexane 분획물에서 67.07 mg GAE/g DW, 분홍색 코스모스꽃의 n-hexane분획물과EtOAc 분획물에서 각각 36.58, 26.40 mg GAE/g DW로 국화과 식물들 중에서도 상당히 많은 양을 함유하고 있다고 하였다. 총 플라보노이드 함량도 흰색 코스모스꽃과 빨간색 코스모스꽃 EtOAc 분획물들에서 54.
- 이것으로 분획물들 속에 cosmosiin과 apigenin의 형태가 존재할 가능성이 있을 뿐 아니라 이 중에 apigenin이 우수하지는 않지만 항균 효과와 관련된 물질 중의 하나일 것으로 확인되었다.
- 이를 코스모스꽃 분획물들의 NMR의 chemical shift와 비교해 보면 6.92 (d, 2H, 유사 H2'/H6'), 6.71 (s, 1H, H3), 6.44 (d, H8), 6.18 (d, H6)에서 동일한 peak이 관찰되기에 본 연구의 분획물 내에도 apigenin구조 요소가 존재할 가능성을 타진할 수 있었다.
- aureus에 대해 나타낸 우수한 항균 효과를 좀 더 살펴 보기 위해 Silica gel column chromatography를 실시하였다. 이를 통해 흰색 코스모스꽃과 분홍색 코스모스꽃 EtOAc 층 분획물은 5개로 분획하여 물질을 얻었고 자주색 코스모스꽃 EtOAc층 분획물은 3개의 분획물을 얻었다. 물질의 분리는 TLC를 통해 확인하였다.
- 710 min에서 peak이 관찰되었다. 이를 통해서 코스모스꽃 EtOAc층 분획물에도 apigenin의 peak과 유사한 시간대에 비중이 있는 peak을 확인할 수 있었기에 apigenin의 존재 가능성을 유추할 수 있었다. 그러나 3종의 코스모스꽃 EtOAc 층 분획물들의 우수한 항균 활성에 비해 apigenin의 항균 효과가 크지 않았던 점과 HPLC결과를 통해 apigenin은 코스모스꽃 분획물의 항균 활성의 결정적인 물질은 아닌 것으로 판단된다.
- 3종의 코스모스꽃 분획물들 중에서 EtOAc층 분획물이 모두 농도의존적으로 균의 성장을 저지하는 것으로 나타났다. 자주색 코스모스꽃과 분홍색 코스모스꽃이 유사하게 항균 활성을 보였고 흰색 코스모스꽃도 0.5 mg/mL에서는 동일한 농도의 다른 분획물들과 유사한 효과가 관찰되었다. CHCl3층과 DW층에서는 항균 효과가 나타나지 않았다.
- 5 mg/mL 에서 최소저해농도가 나타남을 확인할 수 있었다(Table 1). 종합해 보면, 분획물 중에서는 EtOAc층 분획물이 전반적으로 효과가 있는 것으로 나타났고 코스모스꽃 종류 중에서는 자주색과 분홍색이 흰색 코스모스보다 항균 효과가 있는 것으로 관찰되었다.
- 40 mg GAE/g DW로 국화과 식물들 중에서도 상당히 많은 양을 함유하고 있다고 하였다. 총 플라보노이드 함량도 흰색 코스모스꽃과 빨간색 코스모스꽃 EtOAc 분획물들에서 54.38, 54.28 mg NAE/g DW 가 측정되어 다른 식물의 분획물에 비해서 높게 나타났다고 하였다. 그리고 Shin의 연구[8]에서는 코스모스꽃 열수 추출물과 80% MeOH 추출물 중에 MeOH 추출물에서 총 폴리페놀 함량이 62.
- 3종의 코스모스꽃 분획물들은 4종의 박테리아 모두에 대해 저지하는 능력에서 차이가 있기는 하였지만 항균 효과를 나타내었다. 코스모스꽃은 박테리아 중에서도 S. aureus에 대해 낮은 농도에서도 최소저해농도가 나타났고 분획물 중에서는EtOAc 층과 CHCl3층 분획물에서 최소저해농도가 관찰되었다. 그리고 자주색 코스모스꽃 EtOAc층 분획물은 S.
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