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문제 정의
- 따라서 한국버섯원균영농조합에서는 이와 같은 현안문제를 해결할 목적으로 본 연구를 실시하였으며, 수한1호와 화성1호간의 di-mono 교잡을 통해 육성된 신품종 “화성2호”가 농가와 시장에서 그 역할을 담당할 수 있을 것으로 보고 육성경위와 품종의 주요 특성을 보고하고자 한다.
제안 방법
- 배양은 23℃에서 15일간 배양후 26℃에서 7~10일간 후숙을 하였다. 14~16℃에서 버섯의 발이유도 및 생육을 조절하고 자실체의 특성을 조사 하였다. 상자재배는 발효폐면배지를 61cmx39cmx12cm(가로x세로x높이)의 상자에 담은 후 톱밥종균을 혼합접종하였다.
- 수한1호 이핵균사체(2n)도 동일한 크기로 자르고 MST단 핵균과 1cm의 간격에 두어 대치시켰다. 5일간 배양후, 두 균 사체가 접한 부분의 반대편에서 MST단핵균사체를 현미경 검경을 통해 꺽쇠연결체(clamp connection)의 유무를 확인 하여 꺽쇠연결체가 형성된 것을 교잡균주(2n)로 분리하였다. 이렇게 분리된 교잡균주는 10% glycerol이 담긴 cryovial에 보관하여 사용하였다.
- 선발된 화성2호 교잡균주의 배지종류에 따른 온도별 균사 생장 상태를 조사하기 위해 PDA와 폐면배지상에서 20, 25, 30℃ 온도별로 실험하였다. PDA(potato dextrose agar)를 분주한 Petridish에, 지름 1cm크기의 배양된 원형절편 균사체를 Petridish의 중심부에 올려두고 6일간 배양후 균사체의 직경을 측정하였다. 폐면배지를 사용한 실험에서는, 두 처리구를 두어 한 처리구는 시험관에 1주일간 발효시킨 폐면배지를 넣었고, 또 한 처리구는 시험관에 발효폐면배지를 넣고 121℃로 30분 살균처리하였다.
- 다양한 느타리버섯 품종간의 교잡을 하였으며 균상재배용으로서 유용한 특성을 갖는 느타리버섯 품종을 육종코자하였다. 그 중 화성1호에서 단핵균을 분리한 후 수한1호 이 핵균과 di-mono교배법으로 육성된 MST247ns가, 세균성 갈변병에 약하고 저온기 재배시 어려움이 많은 수한1호의단점을 보완하면서 우수한 특성을 가지므로 최종 선발하여“화성2호”로 명명하였다.
- 폐면배지를 사용한 실험에서는, 두 처리구를 두어 한 처리구는 시험관에 1주일간 발효시킨 폐면배지를 넣었고, 또 한 처리구는 시험관에 발효폐면배지를 넣고 121℃로 30분 살균처리하였다. 두 처리구의 시험관에 톱밥종균을 5mm의 두께로 상단부에 접종하여 11일간 균사 배양후 생장한 균사체의 길이를 측정하였다.
- 실내온도를 14~15℃로 하온하여 발이를 유도하였고 버섯의 생육시 온도도 동일하게 유지하였다. 또한 2010년 11월부터 2011년 1월사이에 종균접종된 균상재배농가(경기도 3, 강원도 4, 충남도 2, 전북 1, 전남3, 경북 1농가로 총 14개 농가)에서 실증재배를 통하여 특성을 추가 검정하였다.
- 자실체 특성은 병재배와 상자재배를 이용하여 검정하였다. 병배지는 포플라톱밥:발효미송톱밥:면실피:면실박:비트펄트=6.5:6.5:5:2:1의 배합비(v/v)로 혼합하여 121℃에서 50분간 살균하고 교잡균주를 접종하였다. 배양은 23℃에서 15일간 배양후 26℃에서 7~10일간 후숙을 하였다.
- 14~16℃에서 버섯의 발이유도 및 생육을 조절하고 자실체의 특성을 조사 하였다. 상자재배는 발효폐면배지를 61cmx39cmx12cm(가로x세로x높이)의 상자에 담은 후 톱밥종균을 혼합접종하였다. 실내온도 25℃에서 21일간 배양하였다.
- 선발된 MST247ns를 농가실증재배를 거쳐 “화성2호”라고 명명하고 품종보호출원을 하였다.
- 선발된 화성2호 교잡균주의 배지종류에 따른 온도별 균사 생장 상태를 조사하기 위해 PDA와 폐면배지상에서 20, 25, 30℃ 온도별로 실험하였다. PDA(potato dextrose agar)를 분주한 Petridish에, 지름 1cm크기의 배양된 원형절편 균사체를 Petridish의 중심부에 올려두고 6일간 배양후 균사체의 직경을 측정하였다.
- 발아된 균사체를 PDA가 담긴 Petridish에 각각 분리하였으며 다시 항온배양기에서 7일간 배양하였다. 이렇게 분리된 화성1호 균주의 단핵균사체(MST)를 현미경(Olympus BX-40)을 사용하여 꺽쇠연결체(clamp connection)의 유무를 검경하여 단핵균사체(MST)만을 선별하고 이를 10% glycerol이 담긴 cryovial에 넣어 4℃에서 보관하였다.
- 자실체 특성은 병재배와 상자재배를 이용하여 검정하였다. 병배지는 포플라톱밥:발효미송톱밥:면실피:면실박:비트펄트=6.
- PDA(potato dextrose agar)를 분주한 Petridish에, 지름 1cm크기의 배양된 원형절편 균사체를 Petridish의 중심부에 올려두고 6일간 배양후 균사체의 직경을 측정하였다. 폐면배지를 사용한 실험에서는, 두 처리구를 두어 한 처리구는 시험관에 1주일간 발효시킨 폐면배지를 넣었고, 또 한 처리구는 시험관에 발효폐면배지를 넣고 121℃로 30분 살균처리하였다. 두 처리구의 시험관에 톱밥종균을 5mm의 두께로 상단부에 접종하여 11일간 균사 배양후 생장한 균사체의 길이를 측정하였다.
대상 데이터
- 2001년에 수집된 균주들중에서 수량성 및 상품성이 우수한 S001 이핵균주를 모균주로하여 담자포자를 분리하고 다포자임의교배법을 사용하여(공원식 외, 2005) 화성1호를 육성하였다. 이렇게 육성된 화성1호의 단핵균주와 수한 1호 이핵균주를 교잡하여 교잡균주를 선별하였으며, 병재배 및 상자재배를 거쳐 MST247ns를 최종 선발하였다.
- 수한1호는 중고온성 품종으로서 갓색이 진회색이고 대가 약간 굵으면서 곧고 백색을 띠고 있어 시장성이 좋으며, 화성1호는 갓색이 수한1호보다 더 진한 특성을 갖고 있어 모균주로 선발하였고 대조구로 수한1호를 사용하였다. 담자포자 발아에 사용된 배지는 WA(water agar ; agar 15g, 증류수 1,000㎖)이고, 단핵균주 배양 및 교잡, 이핵균주의 배 양에는 PDA(potato dextrose agar)를 사용하였다.
- 실험에서 사용된 느타리버섯 균주는 수한1호와 화성1호 2균주이다. 수한1호는 중고온성 품종으로서 갓색이 진회색이고 대가 약간 굵으면서 곧고 백색을 띠고 있어 시장성이 좋으며, 화성1호는 갓색이 수한1호보다 더 진한 특성을 갖고 있어 모균주로 선발하였고 대조구로 수한1호를 사용하였다. 담자포자 발아에 사용된 배지는 WA(water agar ; agar 15g, 증류수 1,000㎖)이고, 단핵균주 배양 및 교잡, 이핵균주의 배 양에는 PDA(potato dextrose agar)를 사용하였다.
- 실험에서 사용된 느타리버섯 균주는 수한1호와 화성1호 2균주이다. 수한1호는 중고온성 품종으로서 갓색이 진회색이고 대가 약간 굵으면서 곧고 백색을 띠고 있어 시장성이 좋으며, 화성1호는 갓색이 수한1호보다 더 진한 특성을 갖고 있어 모균주로 선발하였고 대조구로 수한1호를 사용하였다.
- 2001년에 수집된 균주들중에서 수량성 및 상품성이 우수한 S001 이핵균주를 모균주로하여 담자포자를 분리하고 다포자임의교배법을 사용하여(공원식 외, 2005) 화성1호를 육성하였다. 이렇게 육성된 화성1호의 단핵균주와 수한 1호 이핵균주를 교잡하여 교잡균주를 선별하였으며, 병재배 및 상자재배를 거쳐 MST247ns를 최종 선발하였다. 선발된 MST247ns를 농가실증재배를 거쳐 “화성2호”라고 명명하고 품종보호출원을 하였다.
- 화성1호 균주의 자실체로부터 멸균 Petridish에 담자포자를 채취하여 4℃ 냉장고에 보관한 후 사용하였다. 담자포자를 멸균수에 10-5~10-6배로 현탁하고 WA를 담은 Petridish에 500㎕씩 도말한 후 25℃의 항온배양기에서 7일간 배양하였다.
성능/효과
- ‘화성2호’가 두 모균주 그리고 다른 교잡균주 간에 유전적 차이를 가지고 있으며, 양친주의 밴드를 가지는 것을 확인할수 있었다.
- 적정 생육온도는 화성2호는 9~14℃이며, 수한1호의 14~18℃보다 4℃정도 낮았다. 9~14℃에서 생육시 생육기간은 길어졌으나 대가 곧고 길며 백색으로 깨끗하면서 갓이 크게 피지 않아서 좋은 품질의 버섯을 수확할 수 있었다.
- 다른 시험구과 달리 화성2호가 OPA-2에서는 밴드형성이 거의 되지 않았다. MST247단핵균을 사용하여 di-mono교잡된 5번과 7번은 비슷한 밴드양상이 나타났으나, MST255단핵균으로 di-mono교잡된 6번과 8번은 두 교잡균간에 차이가 있음을 나타냈다. ‘화성2호’가 두 모균주 그리고 다른 교잡균주 간에 유전적 차이를 가지고 있으며, 양친주의 밴드를 가지는 것을 확인할수 있었다.
- 그 중 화성1호에서 단핵균을 분리한 후 수한1호 이 핵균과 di-mono교배법으로 육성된 MST247ns가, 세균성 갈변병에 약하고 저온기 재배시 어려움이 많은 수한1호의단점을 보완하면서 우수한 특성을 가지므로 최종 선발하여“화성2호”로 명명하였다.
- ‘화성2호’는 대조구인 수한1호와 비교하여 발이 및 생육 온도가 낮았다. 생육시 15℃이하의 낮은 온도에서 화성2호는 대가 길면서 적정한 굵기를 가지고 있어서 생육 및 버섯의 품질이 양호하였으나, 수한1호는 대가 짧고 굵으며 생육기간이 매우 길어졌다. 갓색은 15℃미만에서는 큰 차이를 보이지 않았으나 15℃이상의 온도에선 수한1호가 좀더 진한 갓색을 나타내었다.
- 생육온도 15~18℃에서는 수한1호는 생육이 양호하고 갓색도 진한 편이었으나, ‘화성2호’는 갓색이 엷어지고 대가 매우 길어지는 경향을 보였으며 환기요구량이 증가하였다.
후속연구
- 9mm 빠르게 생장하였다. 높은 온도에서 균사생장속도가 빠른 것은 발효폐면 균 상재배에서 30℃이상의 온도에서 균사생장이 이루어질 경우 균덩이가 형성되는 현상과 무관하지 않을 것으로 생각되어 좀더 추가적인 연구가 되어야 할 것으로 본다.
- 화성2호는 중고온성인 수한 1호와 비교하여 낮은 온도에서도 갓이 작고 대가 길며 저장성이 좋은 특성을 더욱 잘 나타내었다. 이러한 특성은 시장에서 선호하는 버섯으로서, 낮은 온도에서의 재배관리가 비교적 용이한 가을철에서 이른봄철까지 농가에서의 난방비 부담을 줄여주며 양질의 버섯을 생산할 수 있어 농가의 소득증대에 많은 도움을 줄 것으로 기대된다.
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